植物組織培養(yǎng)試題及答案

1、試卷編號NO8微體嫁接高等函授教育植物組織培養(yǎng)試題學(xué)號：姓名：題號一k三四五總分分數(shù)9、人工種子10體細胞無性系變異一名詞解釋：（10*2分=20分）1、植物細胞組織培養(yǎng)2、細胞全能性二填空：（30*1分=30分）1、目前植物組織培養(yǎng)應(yīng)用最廣泛的方面是 和3、脫分化2、由脫分化的細胞再分化出完整植株有兩種途徑，一種叫做，另一種叫做。3、 培養(yǎng)用具的常用滅菌方法 、4、外植體5、試管苗馴化6、間接不定芽發(fā)生7、雙極性4、某些生長調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗生素、酶類物質(zhì)遇熱不穩(wěn)定，對其滅菌時不能進行，而要進行5、 一般來說，黑暗條件下有利于I 需要一定的光照。6、植物離體授粉技術(shù)通常包括三個方面。般液體培養(yǎng)的繼

2、代時間較短，養(yǎng)繼代時間可以長些，繼代一次。8外植體器官發(fā)生的三種途徑包扌7、的增殖，而往往繼代一次；而固體培1、造成組織培養(yǎng)過程中發(fā)生污染的原因有哪些如何有效控制污染9、 從再生植株倍性來看，小孢子培養(yǎng)通常產(chǎn)生植株，胚培養(yǎng)通常產(chǎn)生植株，通常產(chǎn)生三倍體植株。10、 脫毒苗鑒定與檢測的主要方法有、11、 在生長素中， 對于許多作物花粉的啟動、分裂、形成愈傷組織和胚狀體起著決定性作用，但是對卻有抑制作用。12、用平板培養(yǎng)法培養(yǎng)單細胞或原生質(zhì)體時，常用來衡量細胞培養(yǎng)效果。13、 用藥劑處理是誘導(dǎo)染色體加倍的傳統(tǒng)方法。三計算題（1*10分=10分）2、簡述外植體消毒的一般步驟。某培養(yǎng)基的配方是MSBA

3、L+NAA W%蔗糖+%瓊脂粉。MS母液的濃度 分別是：大量元素20倍，微量元素500倍，鐵鹽100倍，有機物50倍；BA 母液濃度mg/ml , NAA母液濃度ml。要配制400ml該培養(yǎng)基，需要吸取各種母 液各多少ml分別稱取蔗糖、瓊脂粉各多少克（要求寫出計算步驟）四簡答題（5*5分=25分）3、胚培養(yǎng)在科學(xué)研究及生產(chǎn)實踐中有哪些應(yīng)用4、結(jié)合花粉培養(yǎng)，簡述看護培養(yǎng)法。5、如何減輕植物組織培養(yǎng)中試管苗玻璃化現(xiàn)象五論述題（1*15=15分）試述植物組織培養(yǎng)中影響器官分化的因素有哪些在實驗研究中應(yīng)該如何 考慮這些因素以達到較好的器官分化效果植物組織培養(yǎng)參考答案一名詞解釋1、植物細胞組織培養(yǎng)：指在

4、離體條件下利用人工培養(yǎng)基對植物器官、組織、細胞、原生質(zhì)體 等進行培養(yǎng)，使其長成完整的植株。2、3、細胞全能性：指一個完整的植物細胞擁有形成一個完整植株所必需的全部遺傳信息。脫分化：在細胞組織培養(yǎng)中，一個成熟細胞或分化細胞轉(zhuǎn)變成為分生狀態(tài)的過程，即形成 愈傷組織的過程。4、外植體：在植物細胞組織培養(yǎng)中，由活體植物體上提取下來的，接種在培養(yǎng)基上的無菌細 胞、組織、器官等均稱為外植體。5、試管苗馴化：植物組織培養(yǎng)中獲得的小植株，長期生長在試管或三角瓶內(nèi)，體表幾乎沒有 保護組織，生長勢弱，適應(yīng)性差，要露地移栽成活，完成由“異養(yǎng)”到“自養(yǎng)”的轉(zhuǎn)變，需要一個逐 漸適應(yīng)的馴化過程。6、7、間接不定芽發(fā)生：指

5、外植體先脫分化產(chǎn)生愈傷組織，再分化形成芽器官。雙極性：指在細胞發(fā)育的初期其內(nèi)含物的分布具不均勻性，形成胚性細胞后具有發(fā)育成芽 端和根端的潛在能力。8、微體嫁接：指將的莖尖作為接穗，嫁接到由試管中培養(yǎng)出來的無菌實生砧木上，繼續(xù)進 行試管培養(yǎng)，愈合成為完整的的植株。9、人工種子：指通過植物組織培養(yǎng)的方法獲得的具有正常發(fā)育能力的材料，外面還被有特定 物質(zhì)，在適宜條件下可以發(fā)芽成苗的植物幼體。10、體細胞無性系變異：在植物組織和細胞培養(yǎng)中，培養(yǎng)細胞及再生植株往往會出現(xiàn)各種變異,稱為體細胞無性系變異。離體快繁2高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌 器官的分化周8不定器官形成（器官形成）體細胞胚胎發(fā)生4、高溫高壓滅菌過濾

6、滅菌、胚珠試管受精離體子房授粉雌蕊離體授粉 、腋芽萌發(fā)不定芽發(fā)生體細胞胚胎發(fā)生填空植物脫毒3、干熱滅菌5、愈傷組織7 > 1 周 2-49、單倍體二倍體胚乳培養(yǎng)10、指示植物法抗血清鑒定法11、2,4-D 器官分化 12、三、計算題大量元素母液：鐵鹽母液：BA母液：NAA母液：電子顯微鏡鑒定法酶聯(lián)免疫測定法 植板效率13 、秋水仙素400ml/20=20ml400ml/100=4ml*L/ml=*L/ml=2ml微量元素母液：400ml/500= 有機母液：400ml/50=8ml瓊脂粉：400g *%=蔗糖：400g *%= 10g四、簡答題1、造成組織培養(yǎng)過程中污染的原因很多，如工作

7、環(huán)境及儀器的因素、培養(yǎng)基及器皿滅菌不徹底、外植體帶菌、操作時不遵守操作規(guī)程等。造成污染的病原主要分為細菌和真菌兩大類。真菌性污染主要指霉菌引起的污染。一般接種后38d即可發(fā)。真菌性污染一般多由接種室內(nèi)的空氣不清潔、超凈工作臺的過濾效果不理想、操作不慎等原因引起。此類污染可通過完善操作、控 制培養(yǎng)環(huán)境、嚴格操作程序來克服。細菌性污染除外植體帶菌或培養(yǎng)基滅菌不徹底外，主要是操作人員的不慎造成。除要求操作人 員嚴格按照無菌操作程序操作外，外植體帶菌引起的污染與外植體的種類、取材季節(jié)、部位、預(yù)處理 方法及消毒方法密切相關(guān)。因此，取材以春夏生長旺季、當年生的嫩梢為佳，應(yīng)盡量選擇晴天中午進 行，或取離體枝

8、梢在潔凈空氣條件下抽芽，然后從新生組織中取材接種。外植體的徹底消毒是控制污染的前提，應(yīng)根據(jù)不同材料選擇合適的消毒劑和消毒方法，有些特殊材料還須進行預(yù)處理，以達到最佳消毒效果。對于材料內(nèi)部帶菌的組織有時還需在培養(yǎng)基中加入適 量抗生素。2、外植體取材7自來水沖洗7 70%酒精表面消毒 2060S7無菌水沖洗7消毒劑(升汞或2- 3%次氯酸鈉)消毒處理 8-10min或2535min7無菌水充分洗凈f備用。3> (1)用于胚的挽救 遠緣雜交是植物育種工作的重要途徑之一，單遠緣雜交難以成功的一個主要原因就是雜交后的合子胚發(fā)育不良，常常表現(xiàn)中途敗育。通過人工胚培養(yǎng)可使之成苗，用于育種。(2) 打破

9、種子休眠 胚培養(yǎng)可使休眠的種子提高萌發(fā)成苗、縮短育種周期或加速良種繁育。(3) 克服珠心胚的干擾 利用幼胚離體培養(yǎng)技術(shù)可以排除多胚性植物珠心胚對合子胚的干擾， 獲得雜種胚，大大提高雜交育種的效率。(4) 誘導(dǎo)胚狀體及胚性愈傷組織利用植物的幼胚或其他胚胎組織，在離體培養(yǎng)條下可以產(chǎn)生大量次生胚狀體，從而用于快速繁殖。(5) 種子生活力的快速測定 木本植物經(jīng)層積和未層積處理的種胚離體培養(yǎng)條件的萌發(fā)速率一 致。4、Sharp等(1972)建立一種看護培養(yǎng)法，從培養(yǎng)的番茄形成了細胞無性繁殖系。做法是： 將濾紙片放置在完整花藥的上面，將花粉放置在濾紙片上。5、在組織培養(yǎng)過程中，經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)不定芽叢或者試管苗

10、畸形生長，莖葉呈半透明水漬狀，葉片失綠、皺縮，并沿縱向卷曲，脆弱易碎，葉表面完全無蠟質(zhì)，稱之為“玻璃化現(xiàn)象”。這種“玻璃苗”細胞喪失持水能力，細胞內(nèi)水分大量外滲，增加了植株水分的散失和蒸騰，是組織培養(yǎng)中一種生理失 調(diào)或生理病變，它極易引起植株死亡，很難移植成活，已成為莖尖脫毒、工廠化育苗等方面的嚴重障 礙。為了更好解決“玻璃化現(xiàn)象”，可以：(1) 適當提高培養(yǎng)基中的瓊脂、蔗糖或其他滲透劑的濃度，降低培養(yǎng)基的襯質(zhì)勢。(2) 可在培養(yǎng)基中加入適量生長延緩劑，例如 ABA PP333,并降低培養(yǎng)基中含氮量和細胞分 裂素、赤霉素濃度。(3) 增加培養(yǎng)容器的透氣性，并避免容器底部受下層日光燈的加熱，使容

11、器底部適當降溫造成容器內(nèi)的濕度有自上而下的梯度。(4) 控制培養(yǎng)室內(nèi)溫度，可對培養(yǎng)材料適當進行低溫處理。(5) 增加自然光照。五、論述題首先，通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中生長素和激動素或激動素之間的平衡關(guān)系，可以在一定程度上影響不 定芽的分化。培養(yǎng)基中存在的腺卩票吟或激動素能夠促進不定芽的分化和發(fā)育，但是培養(yǎng)基中的其他化合物，特別是IAA和NAA可以改變這種促進作用，因為生長素能夠抑制不定芽的形成。當與激動素或 腺瞟吟結(jié)合使用時， 生長素可以抵消他們促進不定芽形成的作用，若IAA的相對濃度較高則有利于細胞的增殖和根的分化；若腺卩票吟或激動素的相對濃度較高，則有利于不定芽的分化；當這兩種激素之 間的比例適中時，則或產(chǎn)生無結(jié)構(gòu)的愈傷組織。赤霉素對于不定芽的分化具有抑制作用，但是如果不 定芽已經(jīng)形成，赤霉素則會促進它們進一步伸長。不同組織在不定芽分化過程中對生長素和細胞分裂素的要求是不同的，所要求的水平取決于這兩類物質(zhì)的內(nèi)生水平。其次，培養(yǎng)方式和培養(yǎng)條件也會影響不定芽的分化。一些植物的培養(yǎng)材料在固體培養(yǎng)基上只能 以一種完全無結(jié)構(gòu)的狀態(tài)生長，但在成分相同的液體培養(yǎng)基中卻能分化不定芽叢。此外，光周期、光 質(zhì)和光強對器官的分化也有影響。一般培養(yǎng)物適合的光強為1000 1500IX ,