多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷中的應(yīng)用

1、多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷中的應(yīng)用 作者：趙玲莉,劉淑敏,馬慧英,王芳【摘要】 目的： 探討多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）早期診斷中的意義. 方法： 采用散射比濁法檢測(cè)類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）；間接免疫熒光法檢測(cè)抗核抗體（ANA），抗角蛋白抗體（AKA）；ELISA法檢測(cè)抗Sa抗體，抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗?CCP抗體）；斑點(diǎn)法檢測(cè)抗聚角蛋白微絲蛋白抗體（AFA）. 結(jié)果： 各組自身抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率比較，抗AKA抗體，RF和抗?CCP抗體的陽(yáng)性率較高，分別為46.8%，45.8%和61.4%，為多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)中的最佳實(shí)驗(yàn)；RF，抗?CCP抗體，抗AKA抗體三種抗體聯(lián)合檢

2、測(cè)RA，為較好的組合項(xiàng)目，在RA檢測(cè)中有較高的應(yīng)用價(jià)值. 結(jié)論： 選擇適當(dāng)?shù)淖陨砜贵w指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)有助于提高RA檢測(cè)的陽(yáng)性率. 【關(guān)鍵詞】 自身抗體；關(guān)節(jié)炎，類(lèi)風(fēng)濕；類(lèi)風(fēng)濕因子 0引言 風(fēng)濕病是由不同病因引起并以累及多器官損傷為特征的自身免疫性疾病，臨床上多有反復(fù)發(fā)作性和漸進(jìn)性，典型的特征是存在多種變異體和重疊綜合癥，給診斷帶來(lái)一定困難1. 類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)的早期臨床表現(xiàn)不典型，且多樣性2，至今仍沒(méi)有大家公認(rèn)的特異的生化、免疫或組織學(xué)診斷指標(biāo)，常造成誤診，其單項(xiàng)自身抗體檢測(cè)的靈敏度和特異性均有不足，類(lèi)風(fēng)濕因子的檢出率偏低2-3. 因此，診斷以特定的

3、癥狀，檢出特定的自身抗體為依據(jù)，尋找合適的檢測(cè)項(xiàng)目是提高RA早期確診率的關(guān)鍵. 我們通過(guò)對(duì)RA患者進(jìn)行多種自身抗體的聯(lián)合檢測(cè)，以探討RA早期診斷的臨床意義. 1材料和方法 1.1材料標(biāo)本選擇我院2007?01/2007?12風(fēng)濕專(zhuān)科門(mén)診確診為RA患者96例（RA組），年齡5065歲. 其中63例其他自身免疫疾病患者：系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE) 45例(SLE組)；干燥綜合征（PSS）8例（PSS組）；系統(tǒng)性硬化癥（SSc）10例（SSc組）. 另外選擇近期在我院健康體檢者30例，作為對(duì)照組. 類(lèi)風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF）檢測(cè)試劑（浙江伊利康公司）；抗核抗體（anti?n

4、uclear antibodies，ANA），抗角蛋白（antikeratin antibodies，AKA）抗體，抗Sa抗體，抗環(huán)瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide，CCP)抗體（抗?CCP抗體），抗聚角蛋白微絲蛋白（antifilaggrin antibody，AFA）抗體檢測(cè)試劑（德國(guó)歐蒙公司）. 1.2方法 1.2.1RF檢測(cè)（散射比濁法）人微球蛋白膠合于乳膠微粒，與待測(cè)樣本中的RF發(fā)生免疫反應(yīng)，引起微粒的凝集，增加濁度，20 IU/mL為陽(yáng)性. 1.2.2抗ANA抗體，抗AKA抗體檢測(cè)（間接免疫熒光法）稀釋血清（ANA起始稀釋度1100，AKA起始稀釋

5、度110）與包被基質(zhì)反應(yīng)，抗原與抗體結(jié)合，加入熒光素標(biāo)記，與基質(zhì)上的抗體反應(yīng)形成特異性熒光. ANA陽(yáng)性可根據(jù)不同的熒光模式進(jìn)行判定其陽(yáng)性結(jié)果，AKA陽(yáng)性于角質(zhì)層出現(xiàn)線(xiàn)性或板層狀熒光判定為陽(yáng)性. 1.2.3抗Sa抗體，抗?CCP抗體檢測(cè)（ELISA法）將稀釋血清加入包被孔，血清中的特異性抗體與包被在固相上的抗原結(jié)合，酶標(biāo)記的抗人抗體與已結(jié)合的抗體反應(yīng)，結(jié)合的標(biāo)記抗體與底物液作用陽(yáng)性呈現(xiàn)藍(lán)色，顏色深淺與抗體濃度成正比. 1.2.4抗AFA抗體檢測(cè)（斑點(diǎn)法）將已稀釋標(biāo)本加入反應(yīng)板，稀釋血清中的抗體與抗原結(jié)合，酶標(biāo)記的抗人抗體與結(jié)合的抗體反應(yīng)，加入底物液顯色，陽(yáng)性出現(xiàn)藍(lán)色條帶，條帶顏色深淺與抗體含量

6、成正比. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用SPSS10.0軟件統(tǒng)計(jì)，組間計(jì)量資料比較采用方差分析. 2結(jié)果 2.1各組自身抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率96例RA患者、63例其他自身免疫疾病患者及30例健康體檢者采用RF，抗ANA抗體，抗Sa抗體，抗AKA抗體，抗AFA抗體，抗?CCP抗體自身抗體檢測(cè)結(jié)果如表1所示. 檢測(cè)中，RF，抗Sa抗體，抗AKA抗體，抗AFA抗體以及抗?CCP抗體的檢出率明顯高于其他自身免疫性疾病患者及健康體檢者，其中，抗?CCP抗體的檢出率最高.表1各組自身抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率 2.2不同自身抗體對(duì)RA診斷效能比較結(jié)果顯示，各組自身抗體在RA的早期實(shí)驗(yàn)診斷中均有一定的診斷價(jià)值. RF為RA篩檢的常用指

7、標(biāo)，其陽(yáng)性率為45.8，支持早期RA的傾向性診斷，但診斷缺乏特異性；抗ANA抗體的檢測(cè)陽(yáng)性率為35.4，是活動(dòng)性SLE非常敏感的參數(shù)，但并非SLE特異的；抗Sa抗體檢測(cè)陽(yáng)性率為39.6，其在RF陽(yáng)性和陰性RA患者中均可呈現(xiàn)陽(yáng)性，尤其對(duì)RF陰性的患者，可成為診斷RA的一個(gè)指標(biāo)；抗AKA抗體陽(yáng)性率為46.8，可作為RA檢測(cè)的特異性指標(biāo)和RA診斷的輔助實(shí)驗(yàn)診斷項(xiàng)目，適合于早期不典型及血清陰性RA的診斷；抗AFA抗體檢測(cè)陽(yáng)性率為37.5，其對(duì)RA早期診斷有意義，敏感性和特異性高，可出現(xiàn)于RF陰性的RA血清中；抗CCP抗體檢測(cè)陽(yáng)性率為61.4，可作為RA早期診斷指標(biāo). 抗?CCP抗體含量與RA病情嚴(yán)重程

8、度及病程進(jìn)展有關(guān). 其中抗AKA抗體，RF和抗?CCP抗體的陽(yáng)性率較高，三項(xiàng)抗體聯(lián)合檢測(cè)，在臨床的應(yīng)用中具有較高的檢測(cè)價(jià)值. 3討論 RA是一種慢性全身性炎性疾病，目前仍以臨床表現(xiàn)為主要診斷依據(jù). 多年來(lái)，人們?cè)噲D尋找一種RA特異的診斷指標(biāo)，但仍沒(méi)有一個(gè)大家公認(rèn)的診斷指標(biāo). 為此，我們對(duì)96例RA患者進(jìn)行了多種自身抗體的聯(lián)合檢測(cè)與分析. 研究結(jié)果表明，自身抗體檢測(cè)是RA確診的重要的實(shí)驗(yàn)診斷，從各組自身抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率比較可以看出，抗AKA抗體，RF和抗?CCP抗體的陽(yáng)性率較高，可為 友情提醒：本文來(lái)自范文論文網(wǎng)收集與整理，感謝原作者。最佳的聯(lián)合檢測(cè)方案. RF識(shí)別的自身抗原是變性的IgG Fc

9、部分，是最早發(fā)現(xiàn)的RA的自身抗體. 近年的研究3-4表明，RF與臨床表現(xiàn)和關(guān)節(jié)損傷程度密切相關(guān)，是損傷指標(biāo)中最強(qiáng)有力的預(yù)后因子，其他自身抗體不能取代RF在診斷和預(yù)后判斷中的地位. 但RF陽(yáng)性還存在于RA陰性的患者中，正常人尤其是高齡者可有5%的陽(yáng)性，因而，RF對(duì)RA的診斷特異性欠滿(mǎn)意，RF陽(yáng)性不能作為診斷RA的唯一標(biāo)準(zhǔn)5. 抗AKA抗體是由Inanc等6以Wistar大白鼠中段食管的角質(zhì)層為底物，采用間接免疫熒光法，在患者血清中發(fā)現(xiàn)的一種抗食管上皮角質(zhì)層的自身抗體，本研究中抗AKA抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率為47，而其檢測(cè)的特異性近90100，可作為RA檢測(cè)的特異性指標(biāo)及輔助實(shí)驗(yàn)診斷項(xiàng)目，以提高診斷的陽(yáng)

10、性率，特別是當(dāng)RF檢測(cè)陰性時(shí)，RA具有補(bǔ)充診斷的意義. 抗CCP抗體是RA早期診斷的標(biāo)志物7，是RA早期診斷較好的指標(biāo)，也是鑒別浸蝕性、非浸蝕性RA的靈敏指標(biāo). 本研究中抗CCP抗體的檢測(cè)陽(yáng)性率為61.4，其檢測(cè)陽(yáng)性率為各項(xiàng)自身抗體最高，因此，將抗?CCP抗體檢測(cè)用于RA早期診斷具有非常重要的臨床意義. 綜上所述，抗AKA抗體，RF和抗?CCP抗體三種抗體聯(lián)合檢測(cè)，彌補(bǔ)了單一的RF對(duì)RA診斷的不足，提高了RA的檢出率及檢測(cè)特異性，為聯(lián)合檢測(cè)較好的組合項(xiàng)目，為RA的早期診斷及判斷預(yù)后提供了較為可靠的實(shí)驗(yàn)指標(biāo). 鑒于各項(xiàng)自身抗體檢測(cè)在RA的早期診斷中有著不同的意義，可以按照自己的實(shí)驗(yàn)條件，選擇適當(dāng)

11、的項(xiàng)目組合，有助于提高RA的早期確診.【參考文獻(xiàn)】 1 Kuhn KA, Kulik L, Tomooka B, et al. Antibodies against eitrullinated proteins enhance tissue injury in experimental autoimmune arthritisJ. J Clin Invest，2006，116(4)：961-973.2 Matsuo K, Xiang Y, Nakamura H, et al. Identification of novel eitrullinated autoantigens of synov

12、ium in rheumatoid arthritis using a proteomie approachJ. Arthritis Res Ther, 2006, 8(6)：1-3.3 Harrison MJ, Paget SA. Anti?CCP antibody testing as a diagnostic and prognostic tool in rheumatoid arthritisJ. QJM, 2007, 100(4)：193-201. 4 梅品玉,商新梅. 類(lèi)風(fēng)濕因子測(cè)定方法及測(cè)定意義評(píng)價(jià)J. 臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2006, 5(12):2034.5 趙超，王雪. 類(lèi)風(fēng)濕因子定量檢測(cè)在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診治中的應(yīng)用J. 實(shí)用醫(yī)技雜志，2005,12(5)：1345.6 Inanc N, Dalkilic E, Kamali S, et al. Anti?CCP antibodies in rheumatoid arthritis and psoriatic arthritisJ. Clin Rheumatol, 2007, 26(1):17-23.7 Brownlie RJ, Myers LK, Woley PH. Treatment of murine co