高效液相色譜法測定血清中蘆氟沙星及藥代動力學(xué)研究

1、    高效液相色譜法測定血清中蘆氟沙星及藥代動力學(xué)研究        摘要目的：建立HPLC法測定蘆氟沙星血藥濃度，研究其藥代動力學(xué)過程。方法：-1磷酸-乙晴-40%氫氧化四丁銨溶液(80:7:1,v/v)的混合液,吡哌酸為內(nèi)標(biāo)物。結(jié)果：在0.44.0g.ml-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為Y=2.330X-0.100,r=0.990 4，回收率為91.7%102.0%。結(jié)論：適用于藥動學(xué)研究，測定結(jié)果為臨床合理用藥提供了依據(jù)。關(guān)鍵詞蘆氟沙星;HPLC;藥代動力學(xué)中分

2、類號R966.1 DETERMINATION OF LOFLOXACIN BY HPLC IN HUMAN SERUM AND STUDY OF PHARMACOKINETICSJiang Lifu，Zheng Yi，Ma Yaping，Xiao Yong(The 5th Hospital of PLA,Yinchuan750004)AbstractAIM A sensitive HPLC method has been developed for the determination of Lofloxacin in human serum.METHODS Lofloxacin analysi

3、s was carried out by using ODS column (150x4.6mm,ID).The mobile phase consisted of 0.03mol.L-1 phosphoric acid:acetonitrile:tetrabuty lammon hydroxide (8071,v/v).Pipemidic acid was used as an internal standard.RESULTS The method has good linearity betwcen 0.44.0g.ml-1.The regression equation is Y=2.

4、330X-0.100,r=0.990 4.Recovery rate varied from 91.7% to 102.0%.CONCLUSION The method can be used in pharmcokinetics.Key WordHPLC；Lofloxacin蘆氟沙星為一種新型廣譜氟喹諾酮類國家級二類抗菌藥。目前不少醫(yī)院已開始應(yīng)用于臨床,但有關(guān)該藥的研究多為臨床療效觀察。筆者參考了國外有關(guān)文獻(xiàn),建立了快速,簡便易行的血清蘆氟沙星濃度的HPLC測定法,適用于蘆氟沙星的臨床藥動學(xué)、藥效學(xué)及藥物相互作用方面的研究。1 儀器與試藥1.1儀器高效液相色譜儀，附SPD-10A紫外檢測器。

5、LC-16AT高速恒流泵。C-R6A數(shù)據(jù)處理機(jī)(均為日本島津)。1.2試劑蘆氟沙星標(biāo)準(zhǔn)品(武漢濱湖制藥廠,批號 960911),吡哌酸(華北制藥廠，批號 960405),40%氫氧化四丁銨溶液;5-磺基水揚(yáng)酸的50%甲醇溶液(西安雁塔化學(xué)試劑廠);磷酸(GR,北京紅星化工廠);乙晴(GR,北京防化化工廠)。LG-10-2A高速離心機(jī)(北京醫(yī)用器械廠)。2方法與結(jié)果2.1.L-1;磷酸-乙晴-40%氫氧化四丁銨溶液(8071,v/v)的混合液,流速1.2mol.L-1;進(jìn)樣10l,檢測波長293nm,靈敏度0.02AUFS,紙速0.25cm/min，溫度 室溫。2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制蘆氟沙星標(biāo)準(zhǔn)品

6、溶液的制備:精稱蘆氟沙星對照品8.0mg,置50ml量瓶中,加0.03mol.L-1磷酸溶液溶解并稀釋至刻度。搖勻,制成160g.ml-1蘆氟沙星溶液,室溫保存。內(nèi)標(biāo)溶液的制備:精稱吡哌酸20.0mg,置50ml量瓶中,加0.03mol.L-1磷酸溶液溶解并稀釋至刻度,制成40g.ml-1內(nèi)標(biāo)溶液,室溫保存。血清樣品處理:取人血清180l加內(nèi)標(biāo)物溶液20l,振蕩混勻,加入5-磺基水楊酸50%甲醇溶液200l振蕩30s,使其充分沉淀。離心5min 10 000r/min室溫保存?zhèn)溆?。分別制含蘆氟沙星0.04、0.10、0.40、1.0、和4.0g.ml-1的人血清，用上述方法進(jìn)行預(yù)處理和測定,計

7、算蘆氟沙星與內(nèi)標(biāo)物色譜峰高之比,以此比值(Y)與濃度(X)作標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性回歸方程為:Y=2.330X-0.100,r=0.996 4(n=5)。2.3.ml-1的蘆氟沙星人血清進(jìn)行回收率試驗,計算回收率分別為102.0%、95.4%、91.7%。2.4.ml-1的蘆氟沙星人血清各3份,于同日內(nèi)進(jìn)行樣品預(yù)處理和測定,每份樣品各3次,計算RSD分別為0.7%、3.4%和4.2%。同時每一濃度于同一日內(nèi)測定3次,連續(xù)測3d,計算日間RSD分別為8.0%、6.9%和4.2%。2.51健康志愿者口服蘆氟沙星后藥-時曲線將藥-時數(shù)據(jù)用PKBP-N1藥代動力學(xué)程序在IBM微機(jī)處理,曲線擬合后選擇房室模型,

8、藥動學(xué)參數(shù)計算結(jié)果見表1。表1口服蘆氟沙星人體內(nèi)藥代動力學(xué)參數(shù)T (h)(h-1)(h-1)Ka(h-1)K12(h-1)K21(h-1)K10(h-1)Ka1/2(h)K1/2(h)Ta1/2(h)0.25±0.140.92±0.420.10±0.011.88±0.540.37±0.260.44±0.180.22±0.070.86±0.346.77±0.600.039±0.103討論本文建立了人血清蘆氟沙星HPLC法,該法快速,簡便,準(zhǔn)確性好,靈敏度高。本法只需普通ODS色譜柱,不需加熱,進(jìn)樣

9、量少,樣本不需特殊處理,經(jīng)離心后的上清液可直接進(jìn)樣測定。研究結(jié)果表明,血清蘆氟沙星的藥-時數(shù)據(jù)經(jīng)計算機(jī)擬合后,最適合的藥代動力學(xué)模型為二室開放模型(r=0.9840)。由表1的藥代動力學(xué)參數(shù)可以認(rèn)為，口服蘆氟沙星在人體內(nèi)的吸收速度較快,1.5h左右即達(dá)到血藥濃度的最高峰。藥物隨即由中央室向周邊室快速分布,t為0.87h。同時藥物在體內(nèi)排泄或代謝消除時間為6.49h。此結(jié)果與國外研究報道基本一致，為臨床合理用藥提供了依據(jù)。作者簡介：江立富，男，主管藥師。作者單位：中國人民解放軍第5醫(yī)院銀川750004參考文獻(xiàn)：1white Lo, Maco Gowan-AP.Lovering AM.et al.

10、A preli-minary report on the pharmacokinetics of ofloxacin.desmethyl ofloxacin N-oxide inpatients with chronic renal failure,Drugs 1987；34;562Lode H,Hoffen G.olschewski et al.pharmacokinetics of ofloxacinafter parenteral and oral administration.Antimicrobial.Agcnts and chemotheraphy,1987；9;13383Dudley MN,Ericosonl Zinner SH.Effect of doseon serum pharmacokinetics of intravenous ciprofloxacin with indentification and characterization of extravascular compa