參芍膠囊對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠心肌功能的影響(一)

1、參芍膠囊對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠心肌功能的影響(一)    【摘要】 目的 觀察參芍膠囊能否影響高脂血癥大鼠心肌組織中一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的水平。方法 將50只大鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、模型組、治療組（低、中、高劑量），模型組給予高脂飲食，對(duì)照組給予普通飲食，治療組給予高脂飲食的同時(shí)給予參芍膠囊治療（低、中、高三個(gè)治療劑量）；42天后分別測(cè)定各組大鼠心肌組織中NO、 NOS、 SOD、MDA的含量、治療組與模型組比較，觀察各項(xiàng)指標(biāo)有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果 （1）與對(duì)照組相比：動(dòng)脈粥樣硬化組大鼠心肌組織中NO

2、、 NOS水平降低，同時(shí)SOD水平降低，而MDA水平升高，差異有顯著性（P0.05）。（2）治療組與模型組相比較：給予參芍膠囊治療后心肌組織中NO、NOS及SOD水平均升高，而MDA水平降低，其中中劑量組與模型組相比差異有顯著性（P0.05），低劑量和高劑量組與模型組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 參芍膠囊可以通過(guò)影響大鼠心肌組織中NO、NOS、SOD及MDA水平，從而改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病。 【關(guān)鍵詞】 參芍膠囊；心肌；一氧化氮（NO）；一氧化氮合酶（NOS）；超氧化物歧化酶（SOD）；丙二醛（MDA）Effects of shenshao capsules on the

3、 function of myocardium in rats with atherosclerosisLI Ya-qin,LIU Wen-min,HAN Xuan.Health College of Hebei University.Hebei 071000，China【Abstract】 Objective To investigate the effects of shenshao capsules on the levels of nitric oxide（ NO）, nitric oxide synthase （NOS）, superoxide dismutase （SOD） and

4、 malondialdehyde （MDA）in myocardium of rat with atherosclerosis.Methods 50 SD rats were randomly divided into model group,control group ,low dose, middle dose and hige dose treatment groups. Model group rats were given high-fat diet，the control group were given normal diet ,and the treatment groups

5、were given low -, middle- and hige- dose shenshao capsules, respectively. 42 days later , the levels of NO、NOS、SOD and MDA in rats myocardium were detected and analyzed.Results （1） Compared with the control group, the levels of NO,NOS and SOD in myocardium of rats with atherosclerosis decreased clea

6、rly （P0.05）, while the level of MDA increased clearly（P0.05）.（2） Compared with the model group ,shenshao capsules treatment could improve the levels of NO,NOS and SOD and decrease the MDA level in rats myocardium. There was significant difference between the middle-dose treatment group and model gro

7、up（P0.05）.Conclusion Shenshao casulps can decrease the level of MDA and increase the levels of NO,NOS and SOD in rats myocardium, and improve the function of the vascular endothelial cells,which may be a bases of the benificial effect of shenshao capsules in the treatment of atherosclerosis.【Key wor

8、ds】 Shenshao capsule; myocardium ;NO;NOS; SOD;MDA現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已經(jīng)證實(shí)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的一個(gè)主要原因，而超氧化物歧化酶（SOD）可以通過(guò)延緩細(xì)胞衰老,清除氧自由基,阻止自由基連鎖反應(yīng)以及抑制炎性反應(yīng)而維持內(nèi)皮細(xì)胞功能1，丙二醛（MDA）是組織細(xì)胞損傷的產(chǎn)物，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病由于長(zhǎng)時(shí)間的血管病變導(dǎo)致心肌缺血，長(zhǎng)時(shí)間的心肌缺血導(dǎo)致心肌功能障礙，心肌組織產(chǎn)生的一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）減少，進(jìn)一步加重了心肌損害，促進(jìn)心肌功能減低。本試驗(yàn)通過(guò)給予動(dòng)脈粥樣硬化大鼠參芍膠囊治療后檢測(cè)心肌組織中NO、NOS、SOD 及M

9、DA水平的變化，從而驗(yàn)證參芍膠囊是否通過(guò)影響心肌組織中NO、NOS、SOD 及MDA而改善血管動(dòng)脈粥樣硬化。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar 大鼠50只，雌雄各半，體重（250±10）g，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證編號(hào)805108。1.2 實(shí)驗(yàn)藥品 膽固醇（分析純）購(gòu)于上海新興化學(xué)試劑公司，膽酸鈉購(gòu)于德國(guó)Serva公司，丙基硫氧嘧啶為上海復(fù)興制藥廠有限公司原料藥（質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)符合C.P>2000版藥典），維生素D注射液購(gòu)于上海第九制藥廠。參芍膠囊購(gòu)于河北長(zhǎng)天藥業(yè)有限公司，合格證號(hào)：Z10960062。NO、 NOS、SOD 及MDA試劑盒均購(gòu)自南京建成生物制

10、品有限公司。1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 （1）雙功能水浴恒溫振蕩器，型號(hào)：SHA-BA，產(chǎn)地：金壇市杰瑞爾電器有限公司。（2）漩渦混勻器，型號(hào)：IKA-MSZ，產(chǎn)地： IKA Works Guangzhou。（3）低速臺(tái)式離心機(jī)，型號(hào)：TDL-5-A，產(chǎn)地：上海安亭科學(xué)儀器廠。（4）501-A型超級(jí)恒溫器， 產(chǎn)地：上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司。（5）Stat-Fax-2100酶標(biāo)儀，產(chǎn)地：Awareness technologying。（6）高速冷凍離心機(jī)，型號(hào)：GL-16G-型，產(chǎn)地：上海安亭科學(xué)儀器廠。1.4 動(dòng)物模型的制備 正常飼料喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分成對(duì)照組及模型組和治療組，對(duì)照組給予普通飼料，模型組給

11、予高脂飼料，即3%膽固醇、0.5%膽酸鈉、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白糖、10%豬油、81.3%基礎(chǔ)飼料，同時(shí)在喂食開(kāi)始時(shí)一次性腹腔注射維生素D 60萬(wàn)IU/kg；對(duì)照組給予同等體積的生理鹽水1。治療組在給予高脂飼料的同時(shí)給予參芍膠囊灌胃，其中高、中、低劑量組分別按125mg/kg、250m g/kg、500mg/kg的劑量。6周后處死大鼠，分別取其心肌組織，將心肌組織勻漿后進(jìn)行檢測(cè)。1.5 實(shí)驗(yàn)方法 將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成5組，對(duì)照組、模型組與治療組（低、中、高三個(gè)劑量治療組），各組動(dòng)物均為雌雄各半。首先自由飲食1周，然后對(duì)照組給予普通飲食，模型組給予高脂飲食，治療組除給予高脂飲食外，治療組在給

12、予高脂飼料的同時(shí)給予參芍膠囊灌胃，其中高、中、低劑量組分別按125mg/（kg·d）、250mg/（kg·d）、500mg/（kg·d）的劑量。6周后處死大鼠，分別取其心肌組織，將心肌組織勻漿后進(jìn)行NO、NOS、SOD及MDA水平的檢測(cè)。16 檢測(cè)指標(biāo)及方法 分別檢測(cè)對(duì)照組、模型組與治療組中心肌組織中NO、NOS、SOD及MDA的水平，試劑盒均購(gòu)自南京建成生物制品有限公司，具體操作步驟見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書。1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用F檢驗(yàn)、q檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)=0.05。 結(jié)果見(jiàn)表1、表2。表1 各組心肌組織中NO

13、、TNOS水平的比較 注：（1）NO水平的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明：模型組 vs對(duì)照組，P0.05，模型組vs低劑量組，P>0.05, 模型組vs中劑量，P0.05，模型組vs高劑量，P>0.05。（2）TNOS水平的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明：模型組 vs對(duì)照組，P0.05，模型組vs低劑量組，P>0.05, 模型組vs中劑量，P0.05，模型組vs高劑量，P>0.05 表2 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組中大鼠心肌組織中SOD 、 MDA水平的比較3 討論本試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化造成的心肌功能的影響，本實(shí)驗(yàn)體現(xiàn)為心肌組織產(chǎn)生的NO水平及NOS活性的降低，同時(shí)有SOD水平的降低和MDA水平的升高

14、，治療組分別給予參芍膠囊低、中、高劑量治療，6周后分別觀察心肌組織中各指標(biāo)變化情況。通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出如下結(jié)論：與模型組相比：三種劑量組對(duì)心肌功能均有改善作用，但低劑量組和高劑量組對(duì)于心肌功能的影響差異無(wú)顯著性（P>0.05），只有中劑量組有明顯的改善心肌功能的作用，差異有顯著性（P0.05）。通過(guò)上述試驗(yàn)結(jié)果可以看出，參芍膠囊可以通過(guò)影響NO、NOS、SOD及MDA的水平而改善冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病大鼠心肌功能的作用，驗(yàn)證了參芍膠囊治療冠心病心肌缺血的機(jī)制。目前,大量的流行病學(xué)、基礎(chǔ)及臨床研究已經(jīng)公認(rèn),高脂血癥及其隨后形成的動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致缺血性心臟疾病最重要的危險(xiǎn)因素2。長(zhǎng)時(shí)間的

15、心肌缺血會(huì)導(dǎo)致心肌細(xì)胞功能障礙，進(jìn)一步影響心臟舒張及收縮功能，導(dǎo)致冠狀血管損傷，血管內(nèi)皮功能細(xì)胞障礙（endothelialdysfunction,ED）,最后導(dǎo)致缺血性心肌病 ，而內(nèi)皮功能障礙又與動(dòng)脈粥樣硬化的形成、發(fā)展密切相關(guān)，是一個(gè)惡性循環(huán)過(guò)程。參芍膠囊是根據(jù)中醫(yī)氣血相關(guān)理論組方制成治療冠心病心絞痛的高效新型中成藥,主要由其有效成分主要是人參莖葉皂苷及有活血化瘀滋陰止痛、降血脂的白芍。參芍膠囊以人參為君藥,用于補(bǔ)氣,以白芍為臣藥,行瘀止痛,養(yǎng)血和陰,兩藥合用,共奏活血化瘀,益氣止痛之功效。內(nèi)皮功能障礙是指血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)非適應(yīng)性功能狀態(tài)所作的有限調(diào)整,通常是內(nèi)皮細(xì)胞功能特性改變或功能的部分

16、缺失。內(nèi)皮細(xì)胞具有多方面的生理功能,主要為調(diào)節(jié)血管張力，維持凝血和纖溶系統(tǒng)之間的平衡，抑制血小板的聚集和活性等。它通過(guò)分泌具有擴(kuò)血管作用的內(nèi)皮源性舒張因子（EDRF,即NO）來(lái)調(diào)節(jié)血管張力,因此通常使用內(nèi)皮依賴性的血管舒張功能來(lái)反映內(nèi)皮功能3。內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙時(shí)其釋放到心肌組織中的NO、NOS均減少。本實(shí)驗(yàn)以NO及一氧化氮合酶（NOS）作為監(jiān)測(cè)指標(biāo)，可以較好地反映內(nèi)皮細(xì)胞功能，NOS是NO合成過(guò)程中的關(guān)鍵酶，故可以從機(jī)制上探討心肌功能受損及改善的原因。MDA為脂質(zhì)過(guò)氧化代謝產(chǎn)物，含量增高時(shí)，說(shuō)明有明顯的組織或細(xì)胞損傷；SOD是組織自身產(chǎn)生的抗氧化酶，對(duì)組織或細(xì)胞具有保護(hù)作用，含量增高時(shí)說(shuō)明組織或細(xì)胞抗氧化損傷的能力增強(qiáng)4，本實(shí)驗(yàn)中，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化大鼠心肌組織中SOD水平降低，而MDA水平升高；給予參芍膠囊治療后，可見(jiàn)有明顯的MDA降低及SOD的升高，說(shuō)明參芍膠囊有增強(qiáng)心肌抗氧化及抗損傷的功能。本實(shí)驗(yàn)研究表明了參芍膠囊可以改善心肌細(xì)胞功能。其機(jī)制可能與下列方面有關(guān)：參芍膠囊是由人參莖葉皂苷、白芍組