LASIK術(shù)后組織病理實驗研究

1、    LASIK術(shù)后組織病理實驗研究王宏彬胡泳霞張薇向里南洪明理李明銘 摘要目的研究LASIK治療10.00D兔眼的組織病理學(xué)損害。方法對10只新西蘭大白兔右眼行PRK，左眼行LASIK手術(shù)范圍10.0D，分別于術(shù)后10d、1、3、6mo隨機選取動物摘除雙眼，行光鏡及電鏡檢查。結(jié)果LASIK術(shù)后，屈光切削區(qū)的邊緣可見一圈混濁并有上皮折疊植入生長的現(xiàn)象，基質(zhì)層膠原纖維排列規(guī)則。結(jié)論LASIK矯正高度近視雖然潛在的并發(fā)癥較多，但基質(zhì)層愈合反應(yīng)較輕，不會造成長期的組織病理學(xué)損害。 關(guān)鍵詞準分子激光；角膜磨鑲術(shù) Histopathological study

2、of laser in situ keratomileusis in rabbits WANG Hong BinHU Yong XiaZHANG WeiXIANG Li NanHONG Ming LiLI Ming Ming From the Department of Ophthalmology, Beijing Friendship Hospital,Beijing 10050,China Abstract Objective To investigate the histopathological change of laser in situ keratomileusis in rab

3、bits. Method We treated 10 New Zealand white rabbits with PRK(right eye),and LASIK(left eye),both treated with 10.0D. After surgery 10 days,one month,three months,half year,all eyes removed and prepared for light and electron microscopy. Results All histological investigations after LASIK showed a r

4、egular epithelial and stromal architecture. Conclusion Though LASIK have more complications than PRK, the histopathological study shows it appears especially suitable for correcting higher myopic. Key words excimer laser;keratomileusis 90年代以來，準分子激光原位角膜磨鑲術(shù)(LASIK)已逐漸成為治療屈光不正的一個重要手段，其對于治療高度近視的臨床研究有部分報導(dǎo)

5、14，動物實驗研究尚報導(dǎo)不多。我們對兔眼進行了LASIK治療高度近視的手術(shù)治療，并對其結(jié)果進行了組織病理學(xué)分析。 1材料和方法 1.1實驗動物新西蘭大白兔10只(友誼醫(yī)院動物室提供)，雌雄不限，平均體重2.5kg。術(shù)前行裂隙燈檢查均無明顯眼前節(jié)病變，并用超聲角膜測厚儀測量角膜中央厚度(平均為398.3m)。 1.2手術(shù)方法20g . L1戊巴比妥鈉(2mL . kg1)耳緣靜脈麻醉后，行手術(shù)治療。采用Kerracor116型準分子激光儀，能量密度120mJ . cm2，脈沖頻率10Hz，最大切削直徑7mm，先剪除第三眼瞼，參照Buratto手工瓣法57，用8mm環(huán)鉆打印并鉆一定深度達基質(zhì)淺層，

6、用手術(shù)刀及微型虹膜恢復(fù)器片一個一端蒂相連的同層間的板層角膜瓣，對于角膜瓣層間不規(guī)則者棄去不用，掀開后使用準分子激光儀于基質(zhì)床上行10.00D的原位切削，復(fù)位角膜瓣，用平衡液沖洗瓣下基質(zhì)床，擦干后暴露1min，活動兔眼瞼，以角膜瓣無移動為準，術(shù)畢點3g . L1氟嗪酸及艾氟龍(FML)眼液。術(shù)后每日換藥，觀察上皮及創(chuàng)面愈合情況，點FML和氟嗪酸每日3次，10d后僅點氟嗪酸。于術(shù)后10d、1、3、6mo分別隨機選1只動物，摘除雙眼，取其角膜，分別固定于戊二醛及福爾馬林中，送友誼醫(yī)院電鏡室和病理科檢查。 2結(jié)果 (1)裂隙燈觀察:術(shù)后1d全部再上皮化，刺激癥狀較PRK組輕，大多數(shù)兔眼混濁度為零，僅切

7、削區(qū)邊緣一圈混濁;(2)光鏡：所有眼中央角膜上皮細胞排列良好，在屈光切削區(qū)的邊緣可見上皮細胞層的明顯增厚，并有上皮折疊植入生長的現(xiàn)象(圖1)，在切削區(qū)邊緣基質(zhì)不規(guī)則，可見各種形態(tài)的角膜細胞，中央角膜細胞基本正常，基質(zhì)排列規(guī)則;(3)電鏡：術(shù)后10d，在切削區(qū)邊緣可見水腫液，上皮與下方分離(圖2)。在切開區(qū)的起始處可見角膜細胞形態(tài)學(xué)的改變，細胞核固縮，核間隙增寬。在其它各個時期沿著切開區(qū)無細胞活躍的表現(xiàn)，角膜細胞正常，膠原纖維呈規(guī)則排列(圖3)，在邊緣局部觀察到少許排列紊亂。 圖1中央角膜上皮細胞排列良好，在屈光切削區(qū)的邊緣可見上皮細胞層明顯增厚，并有上皮折疊植入生長現(xiàn)象。 圖2術(shù)后10d，在切

8、削區(qū)邊緣可見水腫液、上皮與下方分離。 圖3角膜細胞正常，膠元纖維全部呈持續(xù)規(guī)則排列。 3討論 LASIK手術(shù)是近年來利用準分子激光切削組織精確性較高的優(yōu)勢和角膜磨鑲術(shù)可切削較高度數(shù)的特點，將兩者結(jié)合起來，獲得的一種精確性、預(yù)測性好的屈光手術(shù)方法，其掀開角膜瓣后，在基質(zhì)層中間進行切削，從而達到矯正近視的需要，故保留了前彈力層，該手術(shù)的問世，使角膜屈光手術(shù)產(chǎn)生了一次質(zhì)的飛躍。但角膜屈光手術(shù)均會啟動角膜的修復(fù)機制，威脅到角膜的透明，部分表現(xiàn)為角膜的混濁及屈光的回退，故有必要對其創(chuàng)面愈合過程進行組織病理學(xué)研究。 在準分子激光研究的初始階段，多數(shù)人認為角膜的混濁是與基質(zhì)的重塑有關(guān)8，但是，做為混濁產(chǎn)生的

9、原因，上皮的重要性已逐漸被人們重視。Gauthier和其同事9進行了PRK后上皮厚度的臨床研究發(fā)現(xiàn)，在32mo內(nèi)，上皮顯著持續(xù)增厚，Lohman等10同樣認為上皮的增生是關(guān)系到角膜透明度的一個直接的因素，另外切削的部位、深度和切削區(qū)的直徑也與之有關(guān)，近視度數(shù)越高，角膜混濁及修復(fù)機制的啟動就越高。前彈力層的損傷導(dǎo)致上皮與基質(zhì)層的直接相互作用，被認為是增殖性愈合和瘢痕形成的原因。我們的試驗均控制在6mo內(nèi)，許多臨床資料表明6mo后，屈光結(jié)果已趨于穩(wěn)定。LASIK組的所有眼由于保留了前彈力層在視中央均表現(xiàn)為透明，在切開處邊緣可見一圈輕度混濁。與人不同的是，兔子無前彈力層，我們發(fā)現(xiàn)兔角膜整體愈合反應(yīng)均

10、較人眼略重，可能與兔角膜對外傷的敏感度與人不同有關(guān)。 我們認為，混濁產(chǎn)生的原因與上皮的過度增生、上皮基底膜各種組織學(xué)改變、基質(zhì)的異常組成及排列有關(guān)。LASIK術(shù)后由于中央角膜上皮及前彈力層、淺層基質(zhì)未受損傷，故角膜愈合反應(yīng)較輕，未見明顯增生異常改變，故未見角膜混濁。由于掀開了角膜瓣，在邊緣處可見上皮增生折疊植入生長的現(xiàn)象，角膜表現(xiàn)為一圈混濁，可能與手工片瓣邊緣較粗糙有關(guān)。隨著儀器設(shè)備的不斷改進，相信會獲得更好的手術(shù)效果。 總之，對于治療高度近視，從組織學(xué)上可以看出，LASIK組早期即獲得了穩(wěn)定，由于角膜淺層未受損傷，其僅產(chǎn)生很小的愈合反應(yīng)，回退較少且角膜透明，故穩(wěn)定性較好。但是由于手術(shù)需要掀開

11、角膜瓣，故潛在的并發(fā)癥較高，如上皮植入，感染，瓣層間異物等，但是對于矯正高度近視，該手術(shù)不會造成長期的組織學(xué)損害，其角膜上皮，上皮基底膜，前彈力層和淺層基質(zhì)未受損傷，故從組織學(xué)比較而言，LASIK是一種更好的選擇。 作者單位：10005北京友誼醫(yī)院眼科 參考文獻： 1Sher NA, Hardten DR,Fundmgsland B,et al.193 nm excimer laser photorefractive keratectomy in high myopia. Ophthalmology 1994;101(9):1575 1582. 2Krueger RR, Talamo JH,

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