直腸癌和癌旁組織表皮生長(zhǎng)因子受體的表達(dá)及其臨床意義

1、    直腸癌和癌旁組織表皮生長(zhǎng)因子受體的表達(dá)及其臨床意義        1材料與方法1.1標(biāo)本選取西安醫(yī)科大學(xué)一附院1992年1月至1993年12月間53例直腸癌根治手術(shù)標(biāo)本作為研究對(duì)象，所有病例術(shù)前均未做過任何化療或放療。其中男性27例，女性26例，年齡最大76歲，最小18歲，平均508歲。在53例癌組織蠟塊中，有45例含有癌旁組織（距癌組織小于2?的粘膜組織）。15例正常直腸粘膜作為正常對(duì)照，53例中有40例獲完整隨訪資料，隨訪率為75.5。1.2主要試劑與方法兔抗人E

2、GFR多克隆抗體(SANTA CRUZ USA)、SP免疫組化試劑盒（ZYMED USA）均購(gòu)自北京市中山試劑公司。所有蠟塊均連續(xù)切片，厚約4 m，常規(guī)脫蠟酒精至水，經(jīng)微波爐抗原修復(fù)處理后，用SP免疫組化法進(jìn)行檢測(cè)，EGFR抗體稀釋度為150。以已知EGFR染色陽(yáng)性的直腸癌組織切片作為陽(yáng)性對(duì)照，以PBS代替第一抗體作為陰性對(duì)照。1.3結(jié)果判斷參照Tanaka的方法判斷結(jié)果1。EGFR陽(yáng)性為在細(xì)胞膜或胞漿中有棕黃色顆粒，光鏡下觀察EGFR染色切片5個(gè)具有代表性的高倍視野，分別計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，共計(jì)1 000個(gè)細(xì)胞，按陽(yáng)性細(xì)胞所占比例分為4級(jí)，無陽(yáng)性細(xì)胞為陰性（-），小于30%為弱陽(yáng)性（+），30

3、%70%為陽(yáng)性（），70%100%為強(qiáng)陽(yáng)性（）。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用t檢驗(yàn)、2檢驗(yàn)及等級(jí)相關(guān)分析，P<0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果與討論EGFR在癌組織、癌旁組織及正常粘膜中的表達(dá)與分布。EGFR陽(yáng)性產(chǎn)物位于細(xì)胞膜細(xì)胞漿，以胞膜為主，呈棕黃色顆粒樣，散在或彌漫狀分布。在15例正常直腸粘膜中均陰性，在癌組織中的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于癌旁組織（P<0.05）（見表1）。EGFR在癌組織中的表達(dá)與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系（見表2）。EGFR的表達(dá)與生存期的關(guān)系，從所檢病例的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)看，癌組織EGFR呈陰性和弱陽(yáng)性表達(dá)者(共16例)，患者的生存期平均為52.94±26.9個(gè)月，而EG

4、FR呈陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)者(共24例)的平均生存期為36.29±23.97個(gè)月，二者有顯著差異(t檢驗(yàn)，P<0.05)。 表1EGFR在直腸癌組織與癌旁組織中的表達(dá)組織類別EGFR表達(dá)強(qiáng)度合計(jì)-+癌組織15782353癌旁組織2297745Spearman 檢驗(yàn) P<0.05 表2EGFR在直腸癌中的表達(dá)與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系臨床參數(shù)例數(shù)陽(yáng)性數(shù)陽(yáng)性率（%）性別男271866.7女262076.9年齡<50歲251872.050歲282071.4腫瘤大體類型 腫塊型161275.0潰瘍型352571.4浸潤(rùn)型2150.0組織學(xué)分型管狀腺癌473472.3粘液腺癌與未分化

5、癌6466.7組織學(xué)分級(jí)+級(jí)392871.8+級(jí)141071.4Dukes分期A+B期301756.7C+D期232191.3 P<0.05 EGFR基因又稱c-erB-1或Her-1基因,為原癌基因之一，定位于人第7號(hào)染色體的短臂，其mRNA長(zhǎng)約6.810 kb,其蛋白產(chǎn)物為EGFR,是一種具有酪氨酸激酶的跨膜糖蛋白受體,與其相應(yīng)配體表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)結(jié)合后,激活酪氨酸激酶導(dǎo)致受體本身及細(xì)胞內(nèi)的酪氨酸殘基磷酸化,引起細(xì)胞鐵過度分裂、增殖及惡變。研究表明，食管癌、乳腺癌、膀胱癌和消化道等多種腫瘤細(xì)胞可過度表達(dá)EGFR，并促進(jìn)上述癌細(xì)胞的生長(zhǎng)2。本實(shí)驗(yàn)中EGFR

6、在正常粘膜中均無表達(dá)，而在癌組織與癌旁組織中均高表達(dá)，癌組織中表達(dá)越強(qiáng)，其分期越晚，生存期也越短。此結(jié)果提示高表達(dá)的EGFR與直腸癌的發(fā)生發(fā)展均有關(guān)。首先，在多種致癌因子的作用下，正常直腸粘膜向惡性轉(zhuǎn)化，也伴隨有EGFR基因活性的增高，EGFR表達(dá)亦增高，促進(jìn)惡性轉(zhuǎn)化的進(jìn)展，使癌細(xì)胞的過度分裂、增殖和向周圍組織浸潤(rùn)。同時(shí)，腫瘤細(xì)胞本身分泌的EGF，TGF等生長(zhǎng)因子，又可以通過自分泌與旁分泌途徑，作用于癌組織與癌旁組織，刺激EGFR過度表達(dá)，從而形成惡性循環(huán)。本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)EGFR的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤大體類型及組織學(xué)分型與分級(jí)有顯著相關(guān)性。但與Dukes分期有關(guān)，EGFR在Dukes C

7、，D期的表達(dá)率明顯高于A，B期（P<0.05），這與steele等人的研究結(jié)果一致3。說明EGFR的高表達(dá)有促進(jìn)直腸癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的作用。EGFR的表達(dá)與腫瘤病人的預(yù)后關(guān)系早已受到重視，Hickey等用免疫組化技術(shù)證實(shí)，EGFR陰性表達(dá)的食管癌的生存率明顯高于陽(yáng)性表達(dá)者4。我們對(duì)有完整隨訪資料的40例直腸癌病人分析發(fā)現(xiàn)，EGFR表達(dá)陰性、弱陽(yáng)性者的生存期及生存率明顯高于陽(yáng)性、強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)者（P0.05)。提示EGFR的表達(dá)強(qiáng)度與直腸癌的預(yù)后有關(guān)，可作為判斷直腸癌預(yù)后的一項(xiàng)指標(biāo)。范國(guó)利 (勝利石油管理局肛腸病防治院東營(yíng)257077）張仕成 (勝利石油管理局肛腸病防治院東營(yíng)257077）董洪新 (

8、勝利石油管理局肛腸病防治院東營(yíng)257077）許延發(fā) (西安醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院普外科西安710061）參 考 文 獻(xiàn)1，Tanaka S, Imanishi K, Yoshiara M, et al. Immunoreactive transforming growth factor alpha is commonly present in colorectal neoplasia. Am J Pathol, 1991, 139(1): 1232，樊代明， 陳元方， 尤 涵. 胃腸肽類激素對(duì)消化系統(tǒng)腫瘤生物學(xué)行為的調(diào)控作用. 中華消化雜志， 1996， 16（4）： 2303，Steele RJC, Kelly P, Elul B, et al. Epidermal growth factor receptor expression in colorectal cancer. Br J Surg, 1990, 77（2）： 13524，Hickey K, Grehan D, Keid IM, et al. Expression of epidermal growth factor receptor and p