HPLC法測定胃寧沖劑中丹參素的含量

1、    HPLC法測定胃寧沖劑中丹參素的含量        胃寧沖劑系由丹參、黨參等12味中藥用水煎煮提取濃縮制粒而成。成份復(fù)雜 ，而丹參是其主藥，主要活性成份為丹參素。本文采用HPLC法對丹參素的含量進(jìn)行測定，以 期能有效地控制胃寧沖劑的質(zhì)量。1儀器與設(shè)備1.1美國Waters高效液相色譜儀；Waters486紫外檢測器；DL-800色譜工作站。1.2丹參素鈉對照品(上海醫(yī)科大學(xué))；甲醇、醋酸均為分析純。1.3胃寧沖劑樣品(江蘇蘇中制藥廠，批號：970527，970528，

2、970529) 。2色譜分析條件色譜柱Waters C18(3.9× 150mm);流動相：甲醇-0.4%醋酸溶液(595);檢測波長:281nm;柱溫:室溫；流速：1.2ml/mi n;按該條件測定樣品中的丹參素與其它相關(guān)成分能達(dá)到基線分離，理論板數(shù)為11600,，分離 度為4.1。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)，當(dāng)理論板數(shù)為8000時，丹參素仍能較好分離，規(guī)定理論板數(shù)應(yīng)不少 于8000。對照品及樣品色譜見1。3方法及結(jié)果3.1 對照品丹參素鈉的純度測定：取丹參素鈉對照品約6mg,置100ml量瓶中加水至刻度，搖勻 ，依上述條件進(jìn)樣100l,采樣時間為1h,以峰面積歸一化法計(jì)算，丹參素鈉的含量為99.

3、61% 。 1對照品色譜樣品色譜a-丹參素3.2對照品溶液的制備：取丹參素鈉對照品(約相當(dāng)于丹參素10mg), 精密稱定，置10ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密吸取對照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0和1.2ml置10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。依上述條件取10l注入色譜儀，記錄色譜 ，以對照品濃度為橫坐標(biāo)，對照品峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=2.45X+1.163,r=0.9994。丹參素濃度在20120g/ml范圍內(nèi)峰面積積分值 與濃度呈良好的線性關(guān)系。3.4樣品的測定：取樣品約0.5g,精密稱定

4、 ，置50ml量瓶中，加水適量，超聲處理30min,取出，放冷至室溫，用水稀釋至刻度，搖勻， 濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按上述條件取供試品溶液10l進(jìn)行分析， 結(jié)果見表1。 表1胃寧沖劑中丹參素的含量(n=3 )批號含量(%)RSD (%)9705270.2320.839705280.2180.689705290.2811.243.5穩(wěn)定性試驗(yàn)：取樣品依本法進(jìn)行處理后，每間隔1h測定一次含量， 結(jié)果表明樣品中丹參素含量在24h內(nèi)幾乎沒有變化。3.6重現(xiàn)性試驗(yàn)： 取同一批號樣品5份，分別依本法處理進(jìn)行測定，結(jié)果見表2。 表2重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果編號含量(%)平均含量(%)RSD( %)

5、10.23120.22330.2260.2251.5940.22250.2243.7回收率試驗(yàn)：精密稱取已知含量的樣品適量，精密加入一定量的丹 參素對照品，依本法進(jìn)行含量測定并計(jì)算回收率，結(jié)果見表3。 表3回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)樣品中丹參素含量(mg) 加入丹參素量(mg)測得丹參素量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)0.6261.116100.900.6341.09498.200.5871.05799.060.6520.4801.144101.06100.541.560.6451.149102.130.5981.098101.864討論4.1丹參為處方中主藥成份，其水溶性有

6、效成份有丹參素，原兒茶醛，原兒茶酸等，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道1丹參素含量較高，故選 擇測定丹參素含量，作為胃寧沖劑的含量指標(biāo)。丹參素的測定方法有紙層析紫外分 光光度法2、薄層掃描法3和高效液相色譜法4，5等，大多 測定的是藥材、單方制劑或兩味的復(fù)方制劑。胃寧沖劑成份復(fù)雜，有效成份分離比較困難， 選用本法可同時達(dá)到分離測定的目的。4.2由于丹參素鈉對照品的水 溶液不夠穩(wěn)定，為此，在測定過程中丹參素鈉對照品溶液應(yīng)臨用現(xiàn)配為好。 作者單位：陳志清姜堰 225500 江蘇蘇中制藥廠鐘克儉姜堰 225500 江 蘇姜堰人民醫(yī)院參考文獻(xiàn)1倪坤儀，張國清.反相高效液相色譜測定丹參注射液的三 種有效成份.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1988，23(4)293.2何懷冰，秦芝玲，張德成，等.紙層析紫外分光 光度法測定丹參注射液中丹參素的含量.藥物分析雜志，1984，4(4)212.3倪坤儀，張雨梅，于如霞，等.薄層掃描測定丹參注射劑 中水溶性成份.南京藥學(xué)院學(xué)報(bào)，1986，17265.4王杰民，何懷冰，竺葉青，等.RP-HPLC法測定丹參