黃柏中生物堿提取工藝的研究

1、誅獸藥黃柏中生物堿提取工藝的研究高麗紅1孟繁嬌2張伍林2（1.大慶華科股份有限公司黑龍江大慶163316，2.大慶志飛生物化工有限公司黑龍江大慶163411）黃柏由蕓香科植物黃皮樹(shù)干燥樹(shù)皮制成。黃柏含有多種生物堿成分，主要為小檗堿。其他生物堿有黃柏堿、巴馬丁、白瓜蔞堿、蝙蝠葛任堿等，其總生物堿具有抗?jié)兗翱垢篂a作用，對(duì)免疫功能具有調(diào)節(jié)作用。本篇文字以幾個(gè)實(shí)驗(yàn)的形式，以小檗堿含量作為判定標(biāo)準(zhǔn)，研究能影響黃柏提取效率的因素。希望能對(duì)廣大讀者生產(chǎn)提供一定的參考意見(jiàn)，與之分享。1儀器與試藥醫(yī)用電子天平（瑞士梅特勒公司產(chǎn)），M202/LC電磁爐（廣東美的電器股份有限公司），電熱套（河南愛(ài)博特科技發(fā)展有限

2、公司），RE-5205旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海譜元儀器有限公司），高效液相色譜儀（美國(guó)生產(chǎn)制造）。本實(shí)驗(yàn)中使用的硫酸、生石灰、乙醇均為分析純?cè)噭｛}酸小聚堿對(duì)照品來(lái)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。黃柏藥材購(gòu)自河北安國(guó)市藥昌藥材有限公司。試驗(yàn)中所用的水為雙蒸水。2測(cè)定方法與結(jié)果鹽酸小檗堿含量測(cè)定方法：色譜條件為使用高效液相色譜儀其流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸溶液（50:50），每100毫升，加十二烷基磺酸鈉0.1克。流速為1.0毫升每分鐘，高效液相色譜儀柱溫：35。標(biāo)準(zhǔn)曲線制備，用醫(yī)用電子天平稱(chēng)量適量的干燥至恒重的鹽酸小檗酸對(duì)照品后加乙3醇，制成每毫升含0.120毫克的

3、溶液，吸取其2、4、6、8微升注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣5次。以對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，對(duì)照品峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明，鹽酸小檗堿在0.301.02微克范圍內(nèi)線性良好。配置供試品溶液的方法：取精確上述樣品50毫克，置100毫升量瓶中，加乙醇85毫升，超聲處理40分鐘，加乙醇定容，用0.2微米濾膜過(guò)濾。制備對(duì)照品溶液的方法：準(zhǔn)確稱(chēng)取1.5毫克鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品，置50毫升容量瓶中，用乙醇溶解并稀釋至刻度，即得。加0.05摩爾/升硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻，另取乙醇1毫升，置100毫升量瓶中，加0.05摩爾/升硫酸溶液稀釋至刻度，作為空白對(duì)照溶液，檢測(cè)波長(zhǎng)：345納米。3黃柏總生物堿的提取方

4、法與結(jié)果3.1黃柏藥材顆粒粗細(xì)對(duì)其總生物提取的影響取黃柏藥材粉碎成最粗粉，共3份，每份100克。采用紫外分光光度法測(cè)定提取物中總生物堿百分含量。提取物總生物堿含量、總生物堿收得率結(jié)果：堿水提取法、乙醇提取法與酸水提取法，得到黃柏總生物堿含量分別為0.93%、12.47%與0.34%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，乙醇提取法黃柏總生物堿提取率最高。3.2黃柏總生物堿提取粉碎粒度對(duì)提取效率的影響取同一批黃柏分別炮制成最粗粉（10目）、細(xì)絲納米）、塊狀（20納米），每份各200克，以干膏總生物堿提取率為考察指標(biāo)，優(yōu)選黃柏總生物堿提取的最佳粉碎粒度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果，粗粉、細(xì)絲與塊狀出膏率分別為26.31%、18.32%與1

5、3.23%，其總生物堿含量分別是22.12%、30.45%與29.91%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，黃柏藥材粉炮制成最粗粉和細(xì)絲，其總生物堿提取率優(yōu)于炮制成塊，其細(xì)絲狀最佳。3.3提取次數(shù)對(duì)黃柏中生物堿提取效率的影響取同一批黃柏粉碎成細(xì)絲，稱(chēng)取5份，每份100克。采用乙醇提取法，采用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定提取物中黃柏總生物堿含量與其提取率。結(jié)果表明，提取1、2、3、4、5次的黃柏總生物堿含量分別是9.60%、15.45%、29.70%、30.21%、30.44%。結(jié)果表明，黃柏提取3、4次中總生物堿含量差別小，只有0.51個(gè)百分點(diǎn)。從生產(chǎn)效率上考慮，作者建議最佳黃柏提取次數(shù)為3次。4結(jié)論從本次試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，不同提取方法、黃柏粒度均對(duì)其總生物堿的回收效率有很大影響。作者建議，可考慮乙醇提取法為提取方法，可采用細(xì)絲（2納米）作為提取粒度標(biāo)準(zhǔn)。生產(chǎn)部門(mén)應(yīng)根據(jù)自身實(shí)際情況來(lái)確定具體操作方法，以便提高工作效率與提升產(chǎn)量，更好的指導(dǎo)實(shí)踐工作。（2黃柏中生物堿提取工藝的研究作者：作者單位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：高麗紅， 孟繁嬌， 張伍林高麗紅(大慶華科股份有限公司 黑龍江大慶 16331