檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)課件

1、檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)檢測生物組織中的糖類、檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)脂肪和蛋白質(zhì)檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)鑒定原理鑒定原理 本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中可溶性的還本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中可溶性的還原糖存在與否，而不能鑒定可溶性的非還原性糖。原糖存在與否，而不能鑒定可溶性的非還原性糖。還原糖還原糖+斐林試劑斐林試劑（0.01g/ml NaOH+0.05g/ml GuSO4）磚紅色沉淀磚紅色沉淀選材：梨汁、西瓜汁、冰糖選材：梨汁、西瓜汁、冰糖水浴加熱水浴加熱檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)1. 1.另取另取1 1支潔凈的試管編號（支潔凈的試管編號（C C

2、、D D和和E E）備用。）備用。2.2.用量筒量取用量筒量取樣品樣品3mL3mL，分別注入試管中，分別注入試管中，再滴加再滴加1mL1mL清水。清水。3.3.向試管中加入向試管中加入樣品樣品4.4.向試管中分別加入向試管中分別加入2mL2mL斐林試劑，隔水加斐林試劑，隔水加熱熱2min2min，觀察并記錄溶液顏色的變化情況。，觀察并記錄溶液顏色的變化情況。實驗步驟檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)實驗記錄實驗記錄檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)1 1. .利用斐林試劑鑒定麥芽糖等還原性糖利用斐林試劑鑒定麥芽糖等還原性糖時，會產(chǎn)生磚紅色的沉淀。利用這一時，會產(chǎn)生磚紅色的沉淀。利用這一原理，如何鑒別果

3、實中是否含有還原原理，如何鑒別果實中是否含有還原性糖？性糖？檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)鑒定原理鑒定原理 鑒定生物組織中是否含有脂肪，常用鑒定生物組織中是否含有脂肪，常用蘇丹蘇丹IIIIII染液染液( (或蘇丹或蘇丹IVIV染液染液). ). 脂肪可被蘇丹脂肪可被蘇丹IIIIII染液染成橘黃色染液染成橘黃色( (或被或被蘇丹蘇丹IVIV染液染成紅色染液染成紅色), ),鏡檢時可觀察到相鏡檢時可觀察到相應(yīng)顏色的脂肪顆粒應(yīng)顏色的脂肪顆粒. .檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)實驗用具實驗用具推薦器材推薦器材 刀片，載玻片刀片，載玻片, ,蓋玻片，毛筆蓋玻片，毛筆, ,吸

4、水紙吸水紙, ,顯微鏡顯微鏡, ,等。等。實驗材料實驗材料 花生種子、花生種子勻漿等富含蛋花生種子、花生種子勻漿等富含蛋脂肪的材料。脂肪的材料。檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)方法步驟方法步驟1. 1.取材：取取材：取1 1粒浸泡過的花生種子，去掉種皮。粒浸泡過的花生種子，去掉種皮。2.2.切片：用刀片在花生種子子葉的橫斷面上切片：用刀片在花生種子子葉的橫斷面上平行切下薄片，放入盛有清水的培養(yǎng)皿中平行切下薄片，放入盛有清水的培養(yǎng)皿中備用。備用。（注意安全?。ㄗ⒁獍踩。z測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)方法步驟方法步驟3.3.制片：制片：（1 1）選取最薄的綠片置于載玻片中央；）選取最薄的綠片置于

5、載玻片中央；（2 2）在薄片上滴）在薄片上滴2-32-3滴滴蘇丹蘇丹IIIIII染液，染色染液，染色3 3分鐘分鐘；（3 3）用吸水紙吸去染液，再滴加）用吸水紙吸去染液，再滴加1-21-2滴滴50%50%的酒精的酒精（作用？）。（作用？）。（4 4）吸去周圍酒精，滴）吸去周圍酒精，滴1 1滴蒸餾水，蓋上蓋滴蒸餾水，蓋上蓋玻片。玻片。檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)方法步驟方法步驟4.4.觀察：觀察：（1 1）低倍鏡觀察：找到花生子葉最薄處，）低倍鏡觀察：找到花生子葉最薄處，移至視野中央；移至視野中央；（2 2）高倍鏡觀察：查看是否有橘黃色顆粒。）高倍鏡觀察：查看是否有橘黃色顆粒。檢測生物組織中糖

6、類脂肪和蛋白質(zhì)檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)鑒定原理鑒定原理 鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)，常鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)，常用雙縮脲法，使用的是用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑雙縮脲試劑。 在堿性溶液在堿性溶液NaOHNaOH中，雙縮脲中，雙縮脲（H H2 2NOC-NH-CONHNOC-NH-CONH2 2）能與）能與CuCu2+2+ 作用，作用，形成紫色或紫色的絡(luò)合物，這個反應(yīng)叫形成紫色或紫色的絡(luò)合物，這個反應(yīng)叫雙雙縮脲反應(yīng)縮脲反應(yīng)。 由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此，蛋白質(zhì)都可與雙縮構(gòu)相似的肽鍵，因此，蛋白質(zhì)都可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反

7、應(yīng)，從而用來鑒定蛋白脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)，從而用來鑒定蛋白質(zhì)的存在。質(zhì)的存在。檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)實驗用具實驗用具推薦器材推薦器材 刀片，試管，試管架，試管夾，大刀片，試管，試管架，試管夾，大小燒杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，小燒杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，等。等。實驗材料實驗材料 雞卵清蛋白，牛奶，豆?jié){等富含蛋雞卵清蛋白，牛奶，豆?jié){等富含蛋白質(zhì)的材料。白質(zhì)的材料。檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)方法步驟方法步驟1. 1.取取2 2支潔凈的試管，編號備用。支潔凈的試管，編號備用。2.2.分別配制分別配制0.1g/mL0.1g/mL的的NaOHNaOH溶液和溶液和0.01g/mL0.01g/

8、mL的的CuSOCuSO4 4溶液，在試劑瓶上標明溶液，在試劑瓶上標明試劑名稱備用。雙縮脲試劑由這兩種溶液試劑名稱備用。雙縮脲試劑由這兩種溶液配制而成。配制而成。3.3.將實驗材料和生物組織研磨液等稀釋后，將實驗材料和生物組織研磨液等稀釋后，各取各取2mL 2mL 加入編號的試管中。加入編號的試管中。檢測生物組織中糖類脂肪和蛋白質(zhì)方法步驟方法步驟4.4.向各試管中加入向各試管中加入 NaOHNaOH溶液，輕輕振蕩試溶液，輕輕振蕩試管，搖勻。觀察試管中物質(zhì)的顏色變化。管，搖勻。觀察試管中物質(zhì)的顏色變化。5.5.再向各試管中加入再向各試管中加入3 34 4滴滴CuSOCuSO4 4溶液，輕溶液，輕輕振蕩，搖勻。觀察試管中物質(zhì)的顏色變