蔬菜水果中多農(nóng)殘檢測樣品前處理方法與分析

1、ANALYSIS & TEST 分析與檢測26 食品安全導刊 2010年4月刊2010年1月以來,海南豇豆在全國多個地區(qū)連續(xù)多次被檢測出水胺硫磷、甲胺磷、克百威等禁用農(nóng)藥,由此,農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留問題又一次進入了人們的視線,而農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)殘檢測技術也經(jīng)受了再次考驗。瓦里安公司可以為廣大食品安全檢測實驗室提供從樣品制備(SPE 凈化產(chǎn)品和裝置到消耗品(色譜柱等、儀器分析、方法開發(fā)、數(shù)據(jù)處理及技術支持等一整套的技術解決方案,目前公司已經(jīng)開發(fā)了眾多分析方法和常見農(nóng)藥、獸藥及抗生素化合物數(shù)據(jù)庫,覆蓋600多種農(nóng)藥及蔬菜、水果、飲用水或有機廢棄物等多種復雜基質。瓦里安公司基于國標GB/T 19648-200

2、5方法和歐盟EN 15662方法,開發(fā)了用于蔬菜和水果中多農(nóng)殘檢測樣品前處理方案,包括固相支持液液萃取法(SSLLE 法、QuEChERS方法和Carbon/NH 2凈化法。將該前處理方案與設計獨特、功能強大的瓦里安320-MS GC-MS/MS三重四極桿質譜儀配合使用,可組成強大的高毒農(nóng)藥殘留分析解決方案。以下是我們通過試驗,得到的蔬菜、水果中多農(nóng)殘檢測樣品前處理及檢測方案。樣品前處理方法固相支持液液萃取法(SSLLE法(1稱樣。稱取20g已勻漿過的蔬菜和水果樣品。(2過濾。加入70mL丙酮勻漿3min,抽吸過濾,收集萃取液。過濾后的殘渣再用30mL丙酮洗滌并過濾,然后合并萃取液。(3濃縮凈

3、化。35旋轉蒸發(fā)至殘留體積達18mL左右,過ChemElut柱(20g,20mL,Varian Part No.12198008凈化。(4上樣。將凈化后的萃取液載入ChemElut柱,平衡10min。(5洗脫。用420mL乙酸乙酯分次進行洗脫。(6再次濃縮。旋轉蒸發(fā)濃縮近干,用5mL丙酮重新溶解,定容。(7檢測。取1mL制好的樣作為測試樣,直接進樣12L,用GC-PFPD或GC-MS/MS進行檢測。QuEChERS方法(1稱樣。稱取5g粉碎蔬菜或水果樣品,放入50mL特氟龍離心管中。(2提取。向離心管中加入10mL水、15mL乙腈和100L內標(20g/mL滅蟻靈丙酮溶液,充分振搖1min;再

4、加入4g MgSO 4、1g NaCl、1g無水檸檬酸三鈉和0.5g檸檬酸氫二鈉,充分振搖1min。(3離心。在6000r/min離心5min。(4混合。另取離心管加入25mg Bondesil PSA吸附劑(BondeSil PSA10g,Varian Part No.12213023、230mg無水MgSO 4和2mL萃取液。(5再次離心。充分振搖30s,6000r/min離心1min。(6檢測。取1mL作為測試樣,取上清液濃縮或直接轉入樣品瓶,直接進樣12 L ,用GC-PFPD或GC-MS/MS檢測。Carbon/NH 2凈化法(GB /T 19648-2005(1稱樣。稱取10g水果

5、、蔬菜樣品,加入50mL乙腈。(2抽濾、定容。勻漿、抽濾,用20mL乙腈淋洗濾紙上的殘留物,合并濾液,最后用乙腈定容至100mL。(3靜置。量取20mL濾液,加入10g NaCl和20mL 0.5mol/L的磷酸緩沖液(pH7.0,充分振搖10min,靜置使溶液分層,棄去水相層。(4脫水。將乙腈層溶液過裝有無水硫酸鈉的漏斗,并用適量乙腈淋洗漏斗,收集全部濾液。(5濃縮。在低于40溫度條件下,濃縮近干,用2mL的乙腈/甲苯(3:1重新溶解,待凈化。(6SPE凈化過程?；罨?用10mL乙腈/甲苯(3:1將固相萃取小柱進行活化;上樣:將2mL樣品待測液載入Carbon/NH 2(300mg/500m

6、g 6mL,Varian Part No.2264265032;洗脫:用20mL乙腈/甲苯(3:1進行洗脫;濃縮:40濃縮近干,定容至1mL。(7檢測:直接進樣12L,用GC-PFPD或GC-MS/MS進行檢測。以上三種方法均可以用于毒豇豆中甲胺磷和水胺硫磷的檢測。但SSLLE 方法和QuEChERS方法的凈化效果略遜于國標GB/T 19648-2005 Carbon/NH 2凈化法,前兩種方法與一般的氣相色譜檢測器聯(lián)用,可能會出現(xiàn)一些基質干擾,建議選用氣相色譜與選擇性蔬菜水果中多農(nóng)殘檢測樣品前處理方法與分析殷曉燕 吳翠玲 美國瓦里安科技中國有限公司【儀器與方法】 Apr 2010 CHINA

7、 FOOD SAFETY27以看出,該四種農(nóng)藥殘留的回收率在80120%以內,完全滿足國標要求;結合G B/T 19648-2005 Ca rbo n/N H 2凈化法,以及瓦里安320-M S GC-M S/M S儀通過惰性離子源和二級質譜多反應監(jiān)測(MRM技術,可有效去除基質干擾,增加對復雜基質中待測目標物檢測的選擇性,從而保證了復雜基質中農(nóng)殘定性定量分析的準確性,頂級的檢測靈敏度,可使政府、蔬菜集散地更有效的實施對蔬菜和水果等農(nóng)殘監(jiān)測與管理,指導菜農(nóng)科學合理用藥。更強的脈沖式火焰光度檢測器PFPD或三重四極桿質譜儀GC-MS/MS配合使用,從而保證最佳檢測效果,有效消除假陽性和假陰性結果

8、。常規(guī)高靈敏度GC-MS/MS分析方法以下是結合GB /T 19648-2005 Carbon/NH 2凈化法和瓦里安320 GC-MS /MS 色譜質譜的二級質譜多反應監(jiān)測(MRM技術的一般分析方法,可用于食品安全實驗室進行高靈敏度的農(nóng)殘檢測。色譜條件色譜柱:V F -5m s,0.25 m,30m x 0.25m m (Va r i a n P a r t N o. C P 8944;進樣口條件:260不分流進樣;進樣體積:1.0 L;柱流速:1.0m L /m i n ;柱溫條件:80保持2mi n,30/mi n 升至150,25/min升至200,4/min升至220,30/min升至290,保持8min;離子化方式:EI;碰撞氣:2.0mTorr氬氣;掃描時間:0.1s;檢測器電壓:1420V。儀器自動優(yōu)化掃描參數(shù)見表1。結果與結論該分析方法的樣品前處理方法采用國標GB/T 19648-2005 Carbon/N H 2凈化法,可同時檢測近百種農(nóng)藥殘留樣品,圖1是受關注度比較高的