銀耳的菌種分離技術(shù)

1、本文格式為Word版，下載可任意編輯銀耳的菌種分離技術(shù) 與其它蘑菇不同，銀耳各級菌種的生產(chǎn)是雙菌培育，即不管制作母種、原種或種植種，在每支試管、每個(gè)菌種瓶、每個(gè)種植袋(甚至每個(gè)接種穴)中都必需讓銀耳菌絲(雙核菌絲，又稱白毛團(tuán)或芽孢狀菌種)和伴生菌香灰菌絲在培育基(料)中按比例、協(xié)調(diào)地生長，才能培育出有有用價(jià)值的，可以用于實(shí)際種植的有效菌種。 為了保證銀耳生產(chǎn)上用的菌種之質(zhì)量，科研人員首先把銀耳雙核菌絲“白毛團(tuán)”、酵母狀分生孢子芽孢、香灰菌絲(又稱羽毛狀菌絲、耳友菌絲)分別單獨(dú)分開培育，分開保藏。只有到了制種季節(jié)才把兩種純菌種搭配起來，進(jìn)行混合培育，制成生產(chǎn)上用的各級母種、原種或種植種供各地菌種

2、場或種植者使用。由此可以知道，討論單位保藏的銀耳菌種和生產(chǎn)單位使用的菌種是不同的。討論所用的銀耳菌種，可以說是一種始祖菌種，是社會上一切生產(chǎn)種的老祖宗，育種學(xué)家們稱之原原種，是單一菌種的純培育物。這些純菌種供育種、討論專用，一般不對外供應(yīng)。而社會生產(chǎn)用的銀耳母種、原種和種植種則是雙菌培育物，即把銀耳菌絲或芽孢與香灰菌絲(子囊菌)同時(shí)接種在培育基中進(jìn)行混合培育。這樣的菌種一般只使用一次。否則在轉(zhuǎn)管時(shí)簡單人為地把雙菌分開，使培育物中銀耳菌絲漸漸削減，絕大部分剩下香灰菌絲而致使銀耳種植失敗。下面介紹銀耳菌種的分別、制備及保藏技術(shù)： 分別技術(shù) 獲得銀耳菌種的方法主要有擔(dān)孢子彈射分別法、組織分別法和耳木

3、分別法。 1.孢子彈射法 這是利用新奇的、成熟的子實(shí)體自動(dòng)彈射出擔(dān)孢子來獲得純菌種的方法。取朵大、色白、無病蟲害的新奇銀耳作為種耳。 用無菌水漂洗銀耳數(shù)次，再用無菌紗布或吸水紙，把銀耳表面 的水分吸干。由于耳片表面若有薄水層，便會影響銀耳擔(dān)孢子的彈射，并簡單污染上雜菌。再把種耳切一小塊，以放入三角瓶或放入試管中不會遇到瓶壁或管壁為度，隨后用不銹鋼小鉤鉤住小耳片，快速懸掛在三角瓶或試管內(nèi)，同時(shí)留意勿使種耳遇到培育基表面，以防污染雜菌，塞上棉塞，然后放在20-25條件下，經(jīng)24小時(shí)，從耳片上彈射出來的擔(dān)孢子，落在光滑的培育基表面上形成一個(gè)霧狀的孢子印。此時(shí)，在無菌箱或無菌室中，將懸于瓶內(nèi)的耳片取出

4、，再塞上棉塞，移到20-25的室中培育，經(jīng)2-3天，培育基表面就會消失很多乳白色、糊狀的小菌落。此系銀耳的酵母狀分生孢子。當(dāng)培育基上消失酵母狀分生孢子的菌落時(shí)，為了防止和削減污染，應(yīng)盡快地進(jìn)行提純，即挑取少許沒有雜菌的銀耳酵母狀分生孢子，移入新的試管中進(jìn)行培育。不管銀耳擔(dān)孢子或酵母狀分生孢子都不簡單萌發(fā)成菌絲，所以直接用于生產(chǎn)時(shí)有困難，目前已較少采納。不過，為了獲得銀耳有性繁殖的后代，必需采納擔(dān)孢子分別法，并使之萌發(fā)成單核菌絲，然后進(jìn)行配對試驗(yàn)。 2.組織分別法 和香菇、平菇不同，銀耳組織分別法比較難操作，有用意義也不大。由于耳片一旦膠質(zhì)化之后，就不簡單再長出菌 絲，況且段木種植的或野生的銀耳

5、，暴露在外界的 生長時(shí)間很長，耳片上必定會附著各種雜菌，組織分別時(shí)既不簡單把附著的雜菌洗掉，又不簡單用藥品進(jìn)行表面的滅菌處理，且簡單導(dǎo)致銀耳和條菌同歸于盡。只有位于樹皮和木質(zhì)部之間的肥厚的耳基比較簡單進(jìn)行組織分別，可以獲得銀耳的純菌絲。不過用耳基分別來的銀耳純菌絲常是鵝黃色的或橙黃色的，不是純白的，菌絲生長的速度也比較慢，效果也不太抱負(fù)。 3.耳木分別法 利用長了銀耳子實(shí)體的段木(簡稱耳木)來進(jìn)行分別，是目前獲得有有用價(jià)值的銀耳菌種最主要的方法。 耳木分別法的主要技術(shù)是排解耳木中雜菌的干擾，防止分別時(shí)污染雜菌，必需把銀耳菌絲和香灰菌絲單獨(dú)分別出來。對初學(xué)者來說，耳木分別法是不簡單把握的，必需反

6、復(fù)練習(xí)，直到把握分別的要領(lǐng)。耳木分別法的主要步驟如下: (1)耳木選擇 在長第一、二批銀耳時(shí)，取長耳最多，質(zhì)量最好(尤其是片寬、色白)，雜菌最少的耳木一小段，作為分別材料。分別材料經(jīng)風(fēng)干，并用熏蒸劑驅(qū)蟲(特殊是螨)后，移入無菌箱或無菌室中進(jìn)行分別。 (2)耳木滅菌 先把耳木鋸成2-4cm厚的木輪，然后去掉樹皮、耳基，放入接種箱(室)中，耳木表面用0.1%升汞水或70%酒精揩擦滅菌。技術(shù)嫻熟者也可以不經(jīng)表面滅菌，就進(jìn)行分別。 (3)耳木取種 通過耳基著生處把耳木縱切成兩瓣。然后，在耳基著生處的正下方木材內(nèi)部剃取微小的木屑粉末(不能用小木片，接種塊越小，得到銀耳純菌種的機(jī)會越大，接種塊越大得到香灰

7、菌絲，或香灰菌絲夾雜一點(diǎn)銀耳菌絲的機(jī)會越多)，接種在試管中的培育基表面。接種后，把試管放在20-28的室溫下培育，數(shù)天之后接種塊的四周就開頭長出菌絲來。 (4)分別結(jié)果 由于分別的技巧不同，分別的結(jié)果也不一樣。大致可以得到如下幾種結(jié)果: 只得到銀耳菌絲;只得到香灰菌絲;同時(shí)得到銀耳菌絲和香灰菌絲，但香灰菌絲占肯定多數(shù);得到銀耳酵母狀分生孢子和香灰菌絲。假如有雜菌干擾，分別的結(jié)果就更簡單了。 為了獲得有生產(chǎn)價(jià)值的銀耳菌種，在分別后的第3-7天內(nèi)要每天觀看，把銀耳菌絲和香灰菌絲單獨(dú)分別出來。 銀耳菌絲的特征: 白色、淡黃白色以及由白色至黃色之間的各種中間色，氣生菌絲直立、斜立或平貼于培育基表面，基

8、內(nèi)菌絲生于培育基里面。菌絲直徑l.5-3微米，有橫隔膜，有明顯的(但不是每個(gè)橫隔膜上都有)鎖狀聯(lián)合，生長速度比一般蘑菇緩慢。在某些狀況下，在培育基表面會消失纏結(jié)的菌絲團(tuán)，并漸漸膠質(zhì)化，變成小原基，長出小耳片。當(dāng)雙核菌絲開頭膠質(zhì)化時(shí)，在菌絲頂端可以發(fā)覺有若干擔(dān)子樣的膨大細(xì)胞，這意味著雙核菌絲已進(jìn)入牢固階段。雙核菌絲繼代(移植)后或連續(xù)長出新的菌絲，或快速膠質(zhì)化，長出耳片，也可以變成粘糊糊的酵母狀分生孢子(取決于菌株的菌齡、發(fā)育程度、培育基表面的水層，接種針熱或冷，接種時(shí)手勢輕或重等刺激)。由雙核菌絲斷裂成的酵母狀分生孢子在相宜條件下變成銀耳菌絲。 香灰菌絲的特征: 菌絲初無色，大量生長時(shí)白色，羽毛狀, 常有特殊瘦長的主干和側(cè)生的略呈羽毛狀的分枝，老菌絲變淡黃色，淡棕色，培育基漸漸由淡褐色變?yōu)楹谏蚝趲ЬG色。培育基表面的氣生菌絲灰白色，細(xì)絨狀，有時(shí)有碳漬的黑疤，分生孢子梗近掃帚狀，分生孢子少見。若用