從干預(yù)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)探討咳喘寧防治病毒誘發(fā)小兒哮喘的新思路

1、從干預(yù)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)探討咳喘寧防治病毒誘發(fā)小兒哮喘的新思路         11-05-22 11:10:00     作者：羅銀河，王孟清    編輯：studa20【摘要】  以哮喘發(fā)生、發(fā)展的始動(dòng)環(huán)節(jié)為突破點(diǎn)，以防止伏痰的形成為主要目的，首次將信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑作為咳喘寧防治病毒誘發(fā)哮喘機(jī)理研究的新靶點(diǎn)進(jìn)行探索性研究，為中醫(yī)藥防治本病開辟一條新的途徑，為探索中醫(yī)化痰法及中醫(yī)藥防治兒童哮喘研究提供新的思路。 【關(guān)鍵詞】  咳

2、喘寧;小兒哮喘;信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)支氣管哮喘(Asthma，簡(jiǎn)稱哮喘)是小兒時(shí)期常見的呼吸道變應(yīng)性炎癥疾病，其全球范圍的發(fā)病率和病死率均有逐年增加的趨勢(shì)1。病毒感染是誘發(fā)兒童哮喘最常見的原因，有研究顯示，85 %的兒童哮喘急性發(fā)作與病毒感染有關(guān)2，呼吸道合胞病毒(RSV)感染所致者可高達(dá)78.49 %，是兒童哮喘急性發(fā)作時(shí)的主要病原體3。病毒也是引起哮喘急性加重與惡化的重要因素，且參與所有年齡哮喘的加重4。中醫(yī)藥防治本病具有明顯優(yōu)勢(shì)，但其機(jī)理研究尚不深入。本文擬從中醫(yī)藥對(duì)本病信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響，探討咳喘寧防治病毒誘發(fā)小兒哮喘的新思路。1 干預(yù)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是防治病毒誘發(fā)哮喘的理想選擇大量的研究證實(shí)，RSV

3、感染后，機(jī)體Thl/Th2平衡紊亂，Th2免疫應(yīng)答優(yōu)勢(shì)，導(dǎo)致IL|2和IFN|等明顯減少，IL|4、IL|5、IL|10等增多，刺激嗜酸性粒細(xì)胞生長(zhǎng)和分化，產(chǎn)生RSV特異性IgE和RSV 特異性細(xì)胞毒，是兒童哮喘發(fā)生和加重的重要因素5。Th2細(xì)胞過度地增殖分化是Th2型應(yīng)答優(yōu)勢(shì)的病理基礎(chǔ)，有效地干預(yù)Th2細(xì)胞過度增殖分化，對(duì)糾正Th2型優(yōu)勢(shì)應(yīng)答、減輕哮喘氣道炎癥具有重要的作用6。然而，細(xì)胞的一切生命活動(dòng)都與信號(hào)有關(guān)。信號(hào)是細(xì)胞一切活動(dòng)的始動(dòng)因素，細(xì)胞的增殖和分化就是細(xì)胞對(duì)細(xì)胞分裂分化信號(hào)的反應(yīng)，一旦正常的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受到侵?jǐn)_，必然引起細(xì)胞增殖分化的失衡，最終引起人體功能紊亂。目前已知，Th2細(xì)胞增

4、殖分化主要通過刺激分子結(jié)合T細(xì)胞受體(T cell receptor, TCR)所介導(dǎo)的信號(hào)途徑及白細(xì)胞介素4(IL|4) 受體介導(dǎo)的信號(hào)途徑來(lái)完成8，但兩者在增殖分化過程中起作用的時(shí)相不同，涉及到的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑也有區(qū)別。刺激分子結(jié)合TCR所介導(dǎo)的信號(hào)途徑主要在抗原初次與CD4+T、CD8+T細(xì)胞結(jié)合時(shí)發(fā)揮作用，起到激活T細(xì)胞的作用，而一旦CD4+T、CD8+T細(xì)胞被初步激活，IL|4受體介導(dǎo)的信號(hào)途徑則發(fā)揮主要作用。因此，IL|4受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑是Th2細(xì)胞增殖分化的最重要信號(hào)途徑9。有研究表明，磷脂酰肌醇-3-激酶途徑(PI3|K)、Janus家族酪氨酸激酶1/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子

5、6通路(JAK1|STAT6)途徑是IL|4受體介導(dǎo)信號(hào)途徑下游的2條重要通路，它們介導(dǎo)了生理情況下IL|4所誘導(dǎo)的T淋巴細(xì)胞增殖10，在哮喘發(fā)作時(shí)存在明顯異常11。磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)催化4-磷酸磷脂酰肌醇(Phosphoinositide4|phosphate,PI4|P)和4,5-磷脂酰肌醇二磷酸(Phosphatidylinositol 4,5 bisphosphate,PI4,5|P2)生成相應(yīng)的3，4-磷脂酰肌醇二磷酸(Phosphatidylinositol|3,4|bisphosphate,PI|3,4|P2)和3,4,5-磷脂酰肌醇三磷酸(Phosphatidyli

6、nositol|3,4,5|trisphosphate,PI|3,4,5|P3)，而后兩者是與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)的脂類第二信使。正常情況下，PI|3,4|P2和PI|3,4, 5|P3不存在于未受刺激的細(xì)胞中，一旦接觸到細(xì)胞外的刺激，則大量產(chǎn)生。許多研究表明，PI3K具有促進(jìn)細(xì)胞增殖分化等功能，是細(xì)胞內(nèi)一種重要的分子12。PI3K主要由1個(gè)催化亞基P110(110kd)和1個(gè)調(diào)節(jié)亞基P85(85kd)組成。P110亞基(PI3K|110)除具有磷脂酰肌醇激酶活性外，還具有絲氨酸/蘇氨酸激酶的活性，可催化自身和其他接頭蛋白磷酸化，是PI3K中的關(guān)鍵組成部分。通過測(cè)定亞基PI3K|110水平可反映細(xì)

7、胞內(nèi)PI3K的水平，達(dá)到研究PI3|K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的目的。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子(signal transducers and activators of transcription，STATs)是一類能與靶基因調(diào)控區(qū)DNA結(jié)合的胞漿蛋白家族，是JAK(一種蛋白酪氨酸激酶)-STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中JAK的底物，在細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起著關(guān)鍵性的作用。哺乳動(dòng)物中現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的STAT家庭成員包括STAT1 (P),STAT2,STAT3 (PP),STAT4,STAT5 (Pb),STAT6。其中STAT6與哮喘T細(xì)胞的分化增殖密切相關(guān)。IL|4與IL|13共用IL|4受體鏈，通過JAKl|STAT

8、6信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑激活STAT6，引發(fā)下游的系列反應(yīng)?？傊?yàn)镻I3|K、JAK1|STAT6信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在Th2細(xì)胞增殖分化引起Th2型優(yōu)勢(shì)應(yīng)答，從而在病毒誘發(fā)兒童哮喘中起著重要的作用，干預(yù)這些信號(hào)通路就成為哮喘防治的理想選擇。目前治療哮喘的傳統(tǒng)藥物首推糖皮質(zhì)激素和2受體激動(dòng)劑，但他們并未能阻止哮喘發(fā)病率和死亡率上升的趨勢(shì)，并存在許多限制臨床應(yīng)用的并發(fā)癥，尋求新的哮喘治療靶點(diǎn)和藥物已成為哮喘研究的重要課題，而開發(fā)對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑具有高度選擇性的抑制劑是今后的主要方向。2 糾正紊亂的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，可減少伏痰產(chǎn)生中醫(yī)藥防治哮喘歷史悠久，其療效肯定。中藥藥源豐富、價(jià)格低廉、毒副作用小。中醫(yī)認(rèn)為，哮喘的發(fā)生

9、機(jī)理與外邪觸發(fā)體內(nèi)伏痰有關(guān)。歷代治喘名家都很重視伏痰在哮喘中的作用，將哮喘的發(fā)病機(jī)理概括為“外因誘發(fā)，觸動(dòng)伏痰，痰隨氣升，氣因痰阻，相互搏結(jié)于氣道”。我們認(rèn)為，病毒是兒童哮喘外邪的主要成分，而伏痰則與Th2類細(xì)胞因子分泌過多有關(guān)。病毒誘發(fā)兒童哮喘的機(jī)理，中西醫(yī)雖闡述不同，但其理則一，即：外邪(病毒)入侵，觸發(fā)伏痰(Th2類細(xì)胞因子)，肺失宣肅，痰氣搏結(jié)于氣道(IgE產(chǎn)生過量，誘導(dǎo)EOS產(chǎn)生并聚集到支氣管肺組織，形成炎癥，導(dǎo)致氣道高反應(yīng)性和氣道阻塞)。PI3K和STAT6信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑因與哮喘患者Th2細(xì)胞增殖分化紊亂密切相關(guān)，可能在病毒觸發(fā)伏痰的過程中發(fā)揮了重要作用。我們?cè)O(shè)想，若能糾正PI3K和

10、STAT6紊亂的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，即可通過糾正哮喘中Th2細(xì)胞的過度增殖分化，影響Th2免疫應(yīng)答優(yōu)勢(shì)，從而減少伏痰的產(chǎn)生，而達(dá)到治療哮喘的目的。3 咳喘寧為清化伏痰的有效方劑病毒多屬熱邪，抗病毒中藥多為清熱解毒藥13。臨床所見，病毒誘發(fā)的兒童哮喘多為熱性哮喘。根據(jù)病毒誘發(fā)兒童哮喘的機(jī)理，我們提出清熱化痰法治療本病，以清熱化痰平喘的傳統(tǒng)古方五虎湯為基本方，研制成咳喘寧口服液。方中麻黃乃“喘家圣藥”，味苦辛，性溫，能宣肺氣，平咳喘，其主要含麻黃堿，具有抗炎、平喘和抗過敏效應(yīng);杏仁味苦性微溫，能降肺氣、平喘止咳，藥性論謂之“主咳逆上氣喘促”，杏仁助麻黃止咳平喘、疏肺利氣。二藥有宣有降，可祛除外邪，暢通氣道，從而降低氣道反應(yīng)性，共為本方君藥。石膏味辛、甘，性大寒，功在清泄肺熱;大青葉清熱抗炎，具有抗病毒作用;黃芪扶正祛邪，藥理研究表明，黃芪能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)病毒誘生干擾素的能力，抑制病毒，并具有類似激素樣作用，三藥合用,可清除哮喘的激發(fā)因素，共為本方臣藥。桃仁活血化瘀以改善微循環(huán)，改善炎癥病灶，尚可止咳平喘;細(xì)茶葉味苦甘，性寒，功在清神化痰;甘草鎮(zhèn)咳平喘，具有抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)作用，共為本方佐使。諸藥合用，共奏發(fā)表清熱、化痰平喘、清除哮喘激發(fā)因素、降低氣道反應(yīng)性等功效。前期研