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文檔簡介
1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上 附 錄 一 顯微鑒定及顯微化學反應(yīng)常用試液的配制方法 1水合氯醛試液:取水合氯醛50 g,加蒸餾水l 5m1與甘油10m1使溶解,即得。此為常用的透化劑,能使細胞組織透明清晰,能溶解淀粉粒,蛋白質(zhì)。揮發(fā)油、樹脂、葉綠素等,但不溶解草酸鈣或碳酸鈣晶體等它亦有使皺縮的細胞膨脹而恢復原狀的作用。2稀甘油試液:取甘油33ml,加蒸餾水10ml,再加樟腦少許或液化苯酚1滴,即得。 本品為臨時切片的常用封藏液之一。經(jīng)水合氯醛透化的顯微標本滴加稀甘油封藏,可防止水合氯醛結(jié)晶析出而避免干擾觀察。3甘油醋酸試液 (斯氏溶液):取甘油、50醋酸、蒸餾水各
2、等分,混合,即得。此為常用的一種封藏劑,能在較長時間內(nèi)保持淀粉粒的形狀、大小,防止淀粉粒崩解,以便于顯微觀察和測量大小4間苯三酚試液: 取間苯三酚1g,加95乙解100ml使溶解,即得。置棕色瓶內(nèi),在暗處保存。樣品加本試液23分鐘后,再加濃鹽酸或濃硫酸1滴,木質(zhì)化細胞壁顯紅色,紅色的深度與木質(zhì)化的程度有關(guān)。5.蘇丹試液: 取蘇丹0.01g加90乙醇5m1,溶解后,加甘油5m1,搖勻,即得。 應(yīng)置棕色瓶中保存,在2個月內(nèi)應(yīng)用。 此液能使木栓化或角質(zhì)化的細胞壁及脂肪油樹脂等染成紅色或桔紅色。6氯化鋅碘試液: 取碘化鉀8g,加水8.5ml使溶解,再加無水氯化鋅2.
3、5g溶解后,加適量碘使達飽和狀態(tài),即得。 本試液置棕色玻璃瓶內(nèi)保存。 用于鑒別纖維素細胞壁和木化細胞壁,前者顯藍色或藍紫色,后者呈黃色或棕色。 7銅氨試液:取硫酸銅0.5g,加蒸餾水適量,置乳缽中研磨,再加濃氨水10ml使溶解,即得。本試液在使用時配制,貯存時間一般不得超過2個月。能使纖維素細胞壁染成淺藍色,并逐漸膨脹而溶解:半纖維素細胞壁與纖維素細胞壁反應(yīng)同,但前者遇水強烈膨脹。8稀碘液:取碘化鉀0.5g溶少量蒸餾水中,加碘lg,溶解后加水至100ml,即得,使用時,通常還要稀釋至談棕色或淡棕黃色。置棕色玻璃瓶內(nèi)保存。 用于淀粉粒及糊粉粒之檢查。
4、直鏈淀粉遇此液呈藍色;支鏈淀粉則顯紫紅色。與糊粉粒作用顯暗黃色或黃棕色。 9氯化汞溴酚藍試液:取氯化汞10g,溴酚藍0.001g,加蒸餾水100ml溶解,即得。 此試液用于檢識糊酚粒將含糊粉粒之切片加此溶液中5分鐘后,依次用0.5醋酸沖洗除去多余的試劑,再用水洗3分鐘,用稀甘油裝片鏡撿,糊粉粒顯藍色。 10亞甲藍試液: (1)醇溶液: 取亞甲藍0.1g,溶于95乙醇25ml中; (2)甘油溶液: 取亞甲藍0.1g,溶于95乙醇5m1及甘油25m1。
5、160; 鏡檢粘液時,先前加(1)液12滴于材料,加蓋玻片,過12分鐘之后再從蓋玻片邊緣滴加(2)液,粘液顯天藍色;果膠質(zhì)里紫色。 11釕紅試液:取10%醋酸納溶液12ml,家釕紅適量使呈酒紅色,即,應(yīng)臨用時配制。12稀鹽酸:取鹽酸234ml,加蒸餾水釋至100ml,即得。本液含HCl應(yīng)為9.5%105%。與小檗堿反應(yīng)形成黃色針簇狀鹽酸小檗堿結(jié)晶。能溶解草酸鈣結(jié)晶而不產(chǎn)生氣泡,溶解碳酸鈣結(jié)晶(鐘乳體)而產(chǎn)生氣泡;不溶解硅質(zhì)塊。13稀醋酸: 取冰醋酸6ml,加蒸餾水至100ml,即得。此為較常用試液。不溶解草酸鈣晶體,但能溶解碳酸鈣晶體(鐘乳體)而產(chǎn)生氣泡,故常以此作顯微化學反應(yīng)。14
6、稀硫酸:取蒸餾水約50m1,加濃硫酸57ml,攪拌,再加蒸餾水稀釋至100ml,即得。本液含H2S04應(yīng)為9.5%105。能溶解草酸鈣晶體,并析出針狀硫酸鈣結(jié)晶。15稀硝酸:取硝酸105m1,加蒸餾水稀釋至100ml,即得。本液合HNO3。應(yīng)為95。105;30硝酸與小檗堿反應(yīng)形成黃色硝酸小檗堿針晶簇結(jié)晶。16.氫氧化鈉(氫氧化鉀)試液:取氫氧化鈉5g,加蒸餾水溶解成100ml,即得。17擦鏡液 : 取乙醚70m1,加無水乙醇30ml,混合搖勻,即得。 用于擦拭顯微鏡的鏡頭等光學部分。附 錄 二 制作生藥顯微標本片常用試液配制 1.福爾
7、馬林醋酸酒精混合液(FAA固定液): 取福爾馬林5ml,冰醋酸5mml,50或70酒精90ml,混合即得。此為較常用的固定液和保存液,能固定一般植物組織(單細胞體及絲狀藻類除外),也適合昆蟲、甲殼類的固定,但不適于作細胞學研究的固定。固定時間最短需十幾小時,可作無限期保存,久置對制片并無影響。柔軟的材料用50%酒精為好,堅硬的材料用70% 酒精為好。易于收縮的材料可稍增加冰醋酸。2脫水劑 :為50、70、 80、90%、95、100乙醇。 用法:生藥制片中的脫水劑用量為材料的23倍,各級224小時,但材料在無水酒精中不能放
8、置過長,否則組織過硬、過脆,造成切片困難。在95%酒精及無水酒精中時,最好多換一次新液,更有利于脫水。3透明劑: 分四級。二甲苯:純酒精(1:2;1:1;2:1;純二甲苯)。用于生藥制片中脫水后材料的透明,各級約30分鐘。純二甲苯中應(yīng)更換2次。4滲蠟劑: 分四級。二甲苯;石蠟(3:1;1:1;1:3;純石蠟)。用于生藥石制片中的滲蠟,每級23小時。5.染色劑:(1)番紅染色劑取番紅1g,溶于100ml50%酒精中,即得。可使木質(zhì)化細胞壁染成紅色。(2)固綠染色劑取固綠0.5g,溶于100ml95%酒精中,即得。與番紅染色液配合用作生藥切片的二重染色,可使纖維化細胞壁染成綠色
9、。6封藏劑:(1)加拿大樹脂封藏劑取加拿大樹脂適量,溶于適量的二甲苯中,配成適當濃度(以玻璃棒一端形成小滴滴下,而不成絲狀物為度),加入幾粒豆粒大小的大理石(中和樹膠因放置產(chǎn)生的酸性,以免使切片褪色),即得。使用時注意: (1)溶液宜現(xiàn)配現(xiàn)用。 (2)此液放置時因溶劑揮發(fā)會逐漸變稠,用時需用二甲苯稀釋,否則不僅浪費樹脂,而且易混進氣泡;稀釋時不可加熱,以免樹脂變質(zhì)發(fā)黑。 (3)用特制的樹脂瓶盛樹脂溶液。如無特制的樹脂瓶,可用普通玻璃瓶代替,但不可用軟木塞塞,而要另外罩上適當大小的玻璃試管。以免塞子打不開。(2)品紅甘油明膠溶液取粉末狀明膠1g,加水6ml,浸16小時,使溶解,加甘油7ml,輕輕攪勻,用紗布過濾,加入適量的堿性品紅溶液,即得。用于半永久制片的封藏。堿性品紅溶液的配制:堿性品紅0.01g,加入無水乙醇60ml、樟油8m,溶解即得。 7組織解離液: (1)
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