咳喘平片不同提取工藝對總黃酮影響

1、咳喘平片不同提取工藝對總黃酮影響    閆喜英王威曹海龍劉繼華王永奇 提要采用正交試驗(yàn)法對咳喘平片提取工藝進(jìn)行優(yōu)選， 以總黃酮含量為指標(biāo)，以加水量、提取時間、提取次數(shù)和醇沉濃度為因子進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果表 明，咳喘平片最佳提取工藝為藥材12倍量水提取3次，2 h/次，醇沉濃度為80%。 關(guān)鍵詞咳喘平片；正交試驗(yàn)；總黃酮 咳喘平片由射干、紫菀等12味中藥配伍組成。具有清熱化痰，止咳平喘之功能，用于慢性支 氣管炎急性發(fā)作的治療。為建立科學(xué)合理的提取工藝，我們采用正交試驗(yàn)考察了不同加水量 、提取時間、提取次數(shù)和醇沉濃度對總黃酮含量的影響，優(yōu)選出咳喘平片最佳提取工藝條

2、件 ?，F(xiàn)報告如下。 1儀器與材料 UV-3400 型紫外分光光度計(日本日立公司)；752型紫外光柵分光光度計(上海第三分析儀器 廠)。藥材購于吉林省醫(yī)藥物資供銷公司；蘆丁對照品由中國藥品生物制品檢定所提供；化 學(xué)試劑均為分析純。 2方法與結(jié)果 2.1實(shí)驗(yàn)條件的選擇 2.1.1最大吸收波長：精密量取樣品溶液和對照品 溶液各0.5 ml，分別置于10 ml刻度試管中，加30%乙醇稀釋至5 ml，加入5% NaNO2溶液0. 3 ml，搖勻，放置6 min，加入10% Al(NO3)3溶液0.3 ml，搖勻，放置6 min，加入1 mo l/L NaOH溶液4 ml，加水稀釋至10 ml，搖勻，放

3、置15 min。以60%乙醇代替對照品溶液作空 白，于紫外分光光度計上，在400700 nm 波長范圍內(nèi)繪制吸收曲線，結(jié)果表明樣品和對照 品均在(510±1)nm波長處有最大吸收。 2.1.2吸收度與濃度關(guān)系1：精密稱取10 5干燥至恒重的蘆丁對照品5.0 mg，置于50 ml容量瓶中，加60%乙醇適量使溶解并稀釋至 刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密量取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，分別置于10 ml刻 度試管中，加30%乙醇稀釋至5 ml，加入5% NaNO2溶液0.3 ml，搖勻，放置6 min，加入10 % Al(NO3)3溶液0.3 ml，搖勻，放置6 min

4、，加入1 mol/L NaOH 溶液4 ml，加水稀釋至 10 ml，搖勻，放置15 min。以60% 乙醇代替對照品溶液作空白，于510 nm 波長處測定吸收 度。以吸收度為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明蘆丁濃度在0.0 10.05mg/ml 范圍內(nèi)符合比耳定律，線性回歸方程為 C=0.9250 7 A-0.0925， =0.9996。 2.2樣品的提取與測定：稱取處方比例的咳喘平片 藥材，按表1條件進(jìn)行提取，醇沉，回收乙醇至盡，加水溶解定容于50 ml容量瓶中，搖勻。 精密量取5 ml，置于100 ml容量瓶中，加60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為樣品溶液。精密 量取樣品溶液0

5、.5 ml，置于10 ml刻度試管中，加30%乙醇稀釋至5 ml，加入5% NaNO2溶液 0.3 ml，搖勻，放置6 min，加入10% Al(NO3)3溶液0.3 ml，搖勻，放置6 min，加入1 mol/L NaOH 溶液4 ml，加水稀釋至10 ml，搖勻，放置15 min。以60%乙醇代替樣品溶液作 空白，于510 nm 波長處測定吸收度。 2.3正交試驗(yàn)與結(jié)果：根據(jù)預(yù)試結(jié)果，選出加水量 、提取時間、提取次數(shù)和醇沉濃度4個試驗(yàn)因素，每個因素3個水平進(jìn)行優(yōu)選，因素水平見表 1。 表1因素水平表 水平 因素 加水量 A (倍) 提取時間 B (h) 提取次數(shù) C (次) 醇沉濃度 D

6、(%) 1 8 3 1 90 2 10 2 2 80 3 12 1 3 70 以總黃酮含量為指標(biāo)，選用L9(34)正交試驗(yàn)表試驗(yàn)，結(jié)果見表2。 表2正交試驗(yàn)表 試驗(yàn)號 A B C D 吸收度 A×100 1 1 1 1 1 39.2 2 1 2 2 2 63.6 3 1 3 3 3 72.4 4 2 1 2 3 60.1 5 2 2 3 1 70.2 6 2 3 1 2 42.6 7 3 1 3 2 74.2 8 3 2 1 3 47.6 9 3 3 2 1 61.4 分別對有關(guān)數(shù)據(jù)作極差分析和方差分析，結(jié)果見表3和表4。從極差分析看 ，各因素對咳喘平片提取工藝的影響程度依次為CAD

7、B。從方差分析看，C 因素對其有 非常顯著性影響，而其它因素影響不顯著。因而優(yōu)選出咳喘平片理論最佳提取工藝為A3B 2C3D2，即藥材12倍量水提取3次，2 h/次，醇沉濃度為80%。 表3極差分析表 試驗(yàn)號 A B C D K1 175.2 173.5 129.4 170.8 K2 172.9 181.4 185.1 180.4 K3 183.2 176.4 216.8 180.1 1 58.4 57.8 43.1 56.9 2 57.6 60.5 61.7 60.1 3 61.1 58.8 72.3 60.0 R 3.5 2.7 29.2 3.2 表4方差分析表 方差來源 離差平方和 自由度 方差 F值 P 值 A 19.49 2 9.75 1.83 0.05 B 10.65 2 5.33 1 0.05 C 1305.13 2 652.57 122.43 0.01 D 19.86 2 9.93 1.86 0.05 誤差 10.65 2 5.33 3小結(jié) 采用咳喘平片藥材12倍量水提取3次，2 h/次，醇沉濃度為80%的最佳提取工藝所制樣品，臨床試驗(yàn)取得較為理想的療效。 作者單