黃酮類化合物的提取以及檢測方法的研究進(jìn)展

1、食品研究與開發(fā)2008年 1月 第 29卷第 1期基金項(xiàng)目 :科技部 “ 十一五 ” 國家科技支撐計(jì)劃 (2006BAD27B02 作者簡介 :張巖 (1981- , 女 (漢 , 在讀碩士 , 研究方向 :營養(yǎng)與食品 衛(wèi)生 。*通訊作者 :王碩 (1969- , 教授 , 博士生導(dǎo)師 , 研究方向 :食品安全和 免疫學(xué)檢測 。張巖 , 曹國杰 , 張燕 , 方國臻 , 王碩 *(天津市食品營養(yǎng)與安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 , 天津科技大學(xué) 食品工程與生物技術(shù)學(xué)院 , 天津 300457黃酮類化合物的提取以及檢測方法的研究進(jìn)展摘 要 :黃酮類化合物是一類具有廣泛開發(fā)前景的天然藥物 。 綜述近年來黃酮類化合

2、物提取方法以及測定方法的研究進(jìn)展 , 為開發(fā)利用黃酮類化合物提供一定的科學(xué)借鑒依據(jù) 。 關(guān)鍵詞 :黃酮類化合物 ; 提取方法 ; 測定方法RESEARCH ON THE EXTRACTION AND IDENTIFICATION OF FLAVONOIDS ZHANG Yan, CAO Guo-jie, ZHANG Yan, FANG Guo-zhen, WANG Shuo *(Tianjin Key Laboratory of Food Nutrition and Safety, College of Food Engineer and Biotechnology, Tianjin Univ

3、ersity ofScience and Technology, Tianjin 300457, China Abstract:Flavonoids is a kind of natural drug which has broad application future. In this paper, recent advances in extraction and identification of flavonoids are reviewed. And it provides scientific foundation for the develop-ment and utilizat

4、ion of flavonoids.Key words:flavonoids; extraction; identification黃酮類化合物是廣泛存在于自然界的一大類化合 物 , 在銀杏葉 、 山楂 、 杜仲 、 山香圓葉 、 水芹 、 竹葉 、 黃芪 、 丹參等植物中均有檢出 。 到 目 前 為 止 , 已 經(jīng) 發(fā) 現(xiàn) 有5000多種植物中含有黃酮類和異黃酮類化合物 1。 黃 酮類化合物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是具有 C 6-C 3-C 6的基本骨架 , 根據(jù)中間三碳鏈的氧化程度 、 B 環(huán) (苯基 連接位置 (2-或 3-位 以及三碳鏈?zhǔn)欠癯虱h(huán)狀等特點(diǎn) , 分為許多不 同類型 :包括黃酮 、 黃酮醇

5、 、 二氫黃酮 、 二氫黃酮醇 、 異 黃酮 、 二氫異黃酮 、 查爾酮等化合物 2。 現(xiàn)代研究證明黃 酮類化合物是重要的抗氧化劑 , 其生理作用是多種多 樣的 , 例如蘆丁 、 槲皮素等能夠增強(qiáng)心臟收縮 ; 杜鵑素 具有止咳祛痰作用 ; 黃芩苷具有抗菌消炎 、 抑制腫瘤細(xì) 胞作用 ; 水飛薊素具有保肝作用等 3; 此外 , 黃酮類化合 物還有降血脂 、 止血 、 抑制血小板聚集等多種藥理作 用 。 正是其上述生物活性引起了人們的廣泛重視 , 對(duì)該 類化合物的研究已成為國內(nèi)外醫(yī)藥 界 研 究 的 熱 門 課 題 , 是一類具有廣泛開發(fā)前景的天然藥物 4。 黃酮類化合物在人體不能直接合成 , 只

6、能從食品中獲得 。 主要是 作為食品添加劑或直接應(yīng)用于食品 中 增 加 其 保 健 作 用 。 例如茶多酚在功能食品中的應(yīng)用主要是以茶葉及 其提取物的形式添加到食品中 。 茶多酚具有抗疲勞 、 抗 輻射 、 抗衰老等功能特性 , 茶葉具有獨(dú)特的色 、 香 、 味 、 形 , 能使食品增香 、調(diào)味 、 著色 , 因此茶多酚以茶葉的形 式在食品中的應(yīng)用十分廣泛 。 近年來科學(xué)家都積極關(guān)注 從植物體中提取純度高 、 活性強(qiáng)的天然黃酮成分 , 并進(jìn) 一步將其加工成有特異功能的保健食品和藥品等產(chǎn)品 。1黃酮類化合物的提取方法 1.1有機(jī)溶劑提取法甲醇和乙醇是最常用的黃酮類化合物提取溶劑 , 高濃度的醇

7、(如 90%左右 適宜于提取苷元 , 60%左右 濃度的乙醇或甲醇水溶液適宜于提取苷類 。 田呈瑞 5采 用索氏提取法 , 利用乙醇提取銀杏葉黃酮 , 通過單因素 試驗(yàn)和正交試驗(yàn) , 確定乙醇提取銀杏葉總黃酮的最佳 條件為 :銀杏葉粉碎至 50目 60目 , 以 70%乙醇按照 液固比 6 1的比例 , 于 80 條件下提取 2次 , 每次 1h , 銀杏葉總黃酮提取率可達(dá) 87.6%。 此外 , 歐美國家采用 的主要溶劑法工藝有 :醇 (酮 浸提 -鹵代烴萃取 -酮 /銨 鹽萃取法 、 酮浸提 -氨水沉淀 -混合酮萃取法 、 酮浸提 -綜述154食品研究與開發(fā) 2008年 1月 第 29卷第

8、 1期鹵代烴萃取 -鉛化物沉淀法和醇 (酮 浸提 -甲苯 /丁醇萃 取樹脂法 6。 該工藝采用中等溫度 50 60 浸泡 , 雜 質(zhì)較少 , 經(jīng)濃縮 、 水析可除去烷基酚等脂溶性物質(zhì) , 用 CCl 4等非極性溶劑萃取除去蠟質(zhì) 、 葉綠素等脂溶性雜 質(zhì) ; 調(diào)節(jié) pH89或 Pb (OH 2沉降 , 可除去原花青素 、 蛋白質(zhì) 、 高分子單寧等雜質(zhì) , 加入 (NH42SO 4等鹽 , 增加相密度 , 有利于 C4-C 6酮和醇萃取有效成分和減少乳化 現(xiàn)象 , 改善分層 , 提高有效成分的萃取率 7。1.2微波提取法微波加熱是透入內(nèi)部的能量被物料吸收置換成熱 能對(duì)物料的加熱 , 形成獨(dú)特的物料

9、受熱方式 , 具有均勻 性的特點(diǎn) , 同時(shí)具有反應(yīng)高效性和強(qiáng)選擇性等特點(diǎn) , 而 且操作簡便 , 副產(chǎn)物少 , 提取率高及產(chǎn)物純度高等優(yōu) 點(diǎn) 。 本法多用在藥材的浸出 , 在黃酮類化合物的提取上 取得了良好的效果 。 段蕊 8等人對(duì)微波法提取銀杏葉中 黃酮類物質(zhì)進(jìn)行研究 , 用 175W 微波強(qiáng)度處理 5min 后 , 以體積分?jǐn)?shù) 80%的乙醇 , 在 70 提取 1h , 得到提 取物的黃酮 類物質(zhì)質(zhì)量濃度比未經(jīng)微波 處 理 的 高 出 18.8%。 此外李嶸與金美芳 9在以水為介質(zhì)的條件下 , 對(duì)銀杏葉進(jìn)行微波處理 , 提取效果與傳統(tǒng)方法對(duì)照 , 表 明此方法提取率高 , 省溶劑 , 大大

10、提高了提取效率 。 實(shí) 驗(yàn)方法是稱取 100g 銀杏葉絲 , 加 160mL 蒸餾水 , 微波 解凍處理 5min 及 15min , 提取液以 440mL60%乙醇 , 55 回流提取 。 結(jié)果表明 , 微波處理后進(jìn)行乙醇水浸提 比同樣方法未用微波處理可以提高銀杏葉中有效成分 的提取率達(dá) 22.6%, 而且大大縮短了提取所需時(shí)間 。 1.3超臨界萃取法超臨界流體萃取是利用超臨界流體在臨界壓力和 臨界溫度附近具有的特殊性能作為溶劑進(jìn)行萃取的一門科學(xué) , 最常用的超臨界流體為 CO2。 應(yīng)用 CO 2-SPE 技 術(shù)提取分離黃酮類物質(zhì) , 具有萃取速度快 , 效率高 , 操 作簡單等特點(diǎn) , 產(chǎn)

11、品中沒有殘留有機(jī)溶劑 , 與傳統(tǒng)的萃取分離工藝相比優(yōu)勢是明顯的 。 此外 , 超臨界 CO 2萃取 較易與其它先進(jìn)技術(shù)聯(lián)用 , 成為新型而有效的分離分析技術(shù) 。 孫婷 10利用超臨界 CO2萃取法從銀杏葉中提取 黃酮類化合物 , 確定了超臨界流體萃取的最佳條件 :壓 力為 20MPa , 萃取罐的溫度為 40 , 流量為 14mL/min , 萃 取 時(shí) 間 為 2h , 在 此 條 件 下 測 得 總 黃 酮 的 含 量 為 29.1%, RSD 為 3.1%。 張玉祥 11通過正交試臉 , 確定 最優(yōu)化的提取工藝是 :20MPa 的壓力下 , 夾帶劑 15%, 50 萃取 40min ,

12、含量測定顯示 , CO 2超臨界流體萃取 法能有效萃取銀杏葉中的總黃酮和總內(nèi)酯 , 含量高于 歐洲 (EGb761 的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 。 游海等人 12在提取銀杏葉 中的黃酮類化合物藥用活性成分的實(shí)驗(yàn)中 , 確定了實(shí) 驗(yàn)最佳條件 :萃取壓力 12665.6kPa , 萃取溫度為 45 , 萃取時(shí)間為 30min45min , 分離壓力為 6586.1kPa , 其 中黃酮含量達(dá) 28%以上 。1.4酶浸漬萃取法最近幾年 , 隨著酶技術(shù)的快速發(fā)展 , 科學(xué)工作者充 分利用了酶的特性發(fā)展了新的提取方法 。 酶浸漬法是 指在黃酮提取過程中 , 通過加入恰當(dāng)?shù)拿赴l(fā)生轉(zhuǎn)糖反 應(yīng)和酶解反應(yīng)而使產(chǎn)品黃酮得率和含量

13、大大提高的新 興技術(shù) 。 傳統(tǒng)的水提取只能提取水溶性黃酮 , 致使類黃 酮得率和含量過低 ; 此時(shí)如選用恰當(dāng)?shù)拿讣尤?, 不僅可 以將油溶性的類黃酮轉(zhuǎn)化為易溶于水的糖苷類而利于 提取 , 而且還可通過酶反應(yīng)將植物組織分解 , 使提取傳 質(zhì)阻力減小 ; 另外也可使提取液中的雜質(zhì)分解去除 , 從 而簡化后續(xù)分離純化工序 。 并且其提取條件溫和 , 有利 于黃酮類活性保護(hù) , 且成本低 、 安全 4。1.5超聲波輔助提取法用超聲波法提取黃酮類物質(zhì) , 是目前比較新的方 法 。 其原理主要是利用超聲波在液體中的空化作用加 速植物有效成份的浸出提取 。 另外 , 還利用其次效應(yīng) , 如機(jī)械振動(dòng) , 擴(kuò)散

14、 , 擊碎等 , 使其加速被提取成份的擴(kuò) 散 , 釋放 。 超聲波提取法大大縮短了提取時(shí)間 , 提高了 有效成分的提取率 、 原料的利用率 。 吳傳茂 13等用超聲 波振蕩法提取大豆和豆豉中的大豆異黃酮苷元 , 其提 取方法最佳方案是 :樣品中加入 100%乙醇 300mL , 超 聲振蕩 30min , 通過檢測得出大豆中大豆黃素的含量 為 106.5g/g , 染料木黃酮的含量為 155.1g/g ; 豆豉中 大豆黃素的含量為 312.8g/g , 染料木黃酮的含量為 555.6g/g 。 王延峰 14等人研究了銀杏葉黃酮的超聲提 取法 , 并與連續(xù)熱回流中的索氏提取作了比較研究 , 最

15、佳操作條作為 超聲波頻率 40kHz , 處理時(shí)間 10min , 靜置時(shí)間 12h , 結(jié)果表明超聲波法優(yōu)于索式提取法 。2黃酮類物質(zhì)的測定方法2.1分光光度法黃酮類化合物多采用硝酸鋁比色法測定 。 其基本 原理是以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品 , Al (NO33絡(luò)合體系顯色 , 全波 段掃描在 510nm 處有最大吸收峰 , 測定其吸光度 , 以 此來計(jì)算含量 。 羅憲堂 15等人利用該法測定了山香圓 葉中的黃酮類成分的含量 , 但硝酸鋁比色法專一性較 差 , 測定受處理過程顏色變化的影響 。 研究人員對(duì)此法 進(jìn)行了多項(xiàng)改進(jìn)以提高其準(zhǔn)確度 。 尉芹 16等人在測定 杜仲總黃酮的實(shí)驗(yàn)中認(rèn)為綠原酸是主要干擾

16、因素 , 他 們采用紙層析法將樣品中的黃酮與綠原酸分離后 , 再 進(jìn)行測定 , 從而提高了測定的準(zhǔn)確度 。 劉佳佳 17等用硼綜述155食品研究與開發(fā)2008年 1月 第 29卷第 1期酸 -檸檬酸比色法測定了銀杏葉黃酮的含量 。 徐燕 18以 黃芩苷為對(duì)照品 , 采用雙波長分光光度法測定黃芩總 黃酮含量 。 另外 , 周榮琪 19將過濾法應(yīng)用于竹葉黃酮測 定中 , 并對(duì)濾紙對(duì)于黃酮類物質(zhì)的吸附進(jìn)行了校對(duì) , 發(fā) 現(xiàn)濾紙對(duì)黃酮類物質(zhì)吸附甚微 , 此方法應(yīng)用于竹葉黃 酮體系大大提高了測定穩(wěn)定性 , 且準(zhǔn)確度較高 , 重現(xiàn)性 良好 。2.2紙色譜法紙色譜用于黃酮類分析選擇性和重現(xiàn)性較差 , 一 般

17、作為定性檢測 。 余戟 20采用高于臨界膠束濃度 (CMC 的十二烷基硫酸鈉 (SDS , 溴化十二烷基甲基卞胺水溶 液作展開劑 , 通過紙色譜法分離和檢測桑色素 、 楊梅黃 素等 8種黃酮苷和苷元 , 發(fā)現(xiàn)了適宜于分離其黃酮苷 類的展開體系 。 2.3薄層色譜法(TLC 薄層色譜又叫薄板層析 , 是色譜法中的一種 , 是快 速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很 重 要 的 實(shí) 驗(yàn) 技 術(shù) , 屬固 -液吸附色譜 , 它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu) 點(diǎn) , 一方面適用于少量 樣品 (1g , 甚至 0.01g 的分 離 ; 另一方面在制作薄層板時(shí) , 把吸附層加厚加大 , 因 此 , 又可用來精制樣品

18、 。 此法具有設(shè)備簡單 、 操作方便 、 分離速度快等特點(diǎn) , 但離線操作使分辯率和重現(xiàn)性等 不如高效液相色譜法和氣相色譜法 , 常被作為定性和 半定量的手段 。 固定相一次性使用 , 樣品無需復(fù)雜處 理 , 分離物的性質(zhì)不受限制 , 應(yīng)用廣泛 ; 可同時(shí)平行分 離多個(gè)樣品 , 測試速度快 , 所需溶劑量少 , 選擇范圍寬 , 并有不同展開方式 , 有利于不同性質(zhì)的物質(zhì)分離 ; 此方 法可以在同一色譜板上可根據(jù)組分性質(zhì)選擇不同顯色 劑或檢測方法進(jìn)行定性或定量 ; 薄層色譜圖像可提供原 始彩色圖像 , 不僅便于保存原始圖像 , 而且可以提供較 多信息 , 直觀性 、可比性均較好都是此法的獨(dú)特之處

19、 4。 2.4極譜法極譜分析是在特殊條件下進(jìn)行電解分析 , 其特殊 性在于采用了一個(gè)面積很大的參比電極和一個(gè)面積很 小的滴汞電極進(jìn)行電解 。 孫仕萍 21等為了測定保健食 品中的黃酮含量 , 探討用單掃示波極譜法測定總黃酮 含量的快速方法 , 以蘆丁為對(duì)照品 , 建立了良好的直線 關(guān)系 。2.5氣相色譜法氣相色譜法 (GC 具有進(jìn)樣量少 、 高靈敏度 、 高選 擇性 、 高特異性等優(yōu)點(diǎn) ; 但需樣品需要衍生 , 步驟較為 復(fù)雜 , 耗時(shí)長 , 且儀器較為昂貴 , 從而限制該法推廣應(yīng) 用 。 Liggins 等 22采用毛細(xì)管 -質(zhì)聯(lián)法測定 80余種蔬菜 和堅(jiān)果中大豆黃素和染料木素 , 其中 3

20、6種含有被測物質(zhì) , 而大豆中大豆黃素和染料木素總含量達(dá) 2g/kg 。 孫 艷梅 23選取 SE-30毛細(xì)管柱 , 在柱溫為恒溫 260 時(shí) , 利用氣相色譜法 , 進(jìn)行了大豆 -葡萄糖苷酶水解大豆 異黃酮糖苷的研究 , 確定黃豆苷元含量工作曲線方程為 Y=71519X-85913, X 為黃豆苷元的含量 (g/L , 相關(guān)系 數(shù) R 2=0.9937。2.6高效液相色譜法(HPLC HPLC 分析黃酮類化合物 , 正相系統(tǒng)一般采用乙 烷或異辛烷等體系為流動(dòng)相 , 以極性較大的乙醇 、 丙 醇 、 乙腈等有機(jī)溶劑調(diào)節(jié) 。 反相體系則一般優(yōu)先選擇甲 醇 /水及乙腈 /水體系為流動(dòng)相 , 還需要

21、加入酸調(diào)節(jié) pH , 抑制解離 , 克服拖尾現(xiàn)象 。 為了提高分離度需要梯度洗 脫 , 多用 C 18柱分離 。 胡芳弟 24以甲醇 -水為流動(dòng)相 , 梯 度洗脫 , 在 254nm 檢測波長下測定黃芪中黃芪甲苷和2個(gè)黃酮類化合物含量 。 劉斌 25建立了苦參湯有效部位 中 4種黃酮類成分的 HPLC 含量測定方法 。 此外鄭瑩 26等人使用反相高效液相色譜法對(duì)三七葉中的黃酮類化 合物進(jìn)行了含量測定 。 其方法為 :使用 ZORBAX Extend C 8柱 (250mm ×4.6mm , 5m , 流動(dòng)相為甲醇 -0.15%乙酸水溶液 (35 65 , 流速 1.2mL/min ,

22、 檢測波長268nm , 柱溫 25 。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下 :山柰酚 -3-O-B-D-半乳糖葡萄糖苷與槲皮素 -3-O-B-D-半乳糖葡萄 糖苷在進(jìn)樣量 0.5g20g 范 圍 內(nèi) 均 有 良 好 的 線 性 關(guān)系 , 相關(guān)系數(shù) r 2皆為 0.9999。池靜端 27等人用反相高 效液相色譜法測定了銀杏葉中 6種 黃 酮 成 分 即 槲 皮 素 、 異鼠李素 、 山萘酚 、 白果黃素 、 銀杏黃銀杏黃素 、 西 阿多黃素 。 色譜柱為 ZORBAX ODS 柱 , 流動(dòng)相 :甲 醇 以 及 THF-H 2O-HCOOH (34 65 1 , 梯 度 洗 脫 , 流 速 :1.0mL/min ,

23、檢測波長 :350nm , 線性范圍 0.10g2.57g ,相關(guān)系數(shù) 2=0.99940.9998, 回收率 98.0%102.0%。2.7液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法液相色譜 -質(zhì)譜 (LC-MS 成為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室一種確 定的分析工具 , 是由于它相對(duì)于通常的檢測方式 , 能提 供更優(yōu)越的選擇性和更低的檢測限 , 對(duì)混合物的分析 有很高的靈敏度和選擇性以及廣泛的適用性 , 可大大 縮短分析時(shí)間 , 減少原料的浪費(fèi) 。 馬強(qiáng) 28等人采用高效 液相色譜與電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)研究了紅車軸草中的 異黃酮類化合物 。 實(shí)驗(yàn)采用反相 C 18色譜柱 , 二元線性 梯度洗脫 , 分離并檢測了紅車軸草中的 14種異

24、黃酮類 化合物 ; 通過與電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用獲得了相應(yīng)化合物的 分子量信息 , 并利用質(zhì)譜的源內(nèi)碰撞誘導(dǎo)解離技術(shù)鑒 定這些化合物的可能結(jié)構(gòu) 。 董淮海 29等人應(yīng)用高效液 相色譜 -電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用法 , 直接對(duì)大豆胚芽的 70%乙醇室溫提取液進(jìn)行檢測 。 根據(jù)各色譜峰的質(zhì)譜特征 ,綜述156食品研究與開發(fā) 2008年 1月 第 29卷第 1期在室溫提取液中 鑒 定 出 9種 異 黃 酮 , 7種 A 組 皂 苷 , 4種 B 組 皂 苷 和 2種 E 組 皂 苷 。 肖 貽 菘 30等 人 使 用 液 相 色 譜 -質(zhì) 譜 聯(lián) 用 技 術(shù) 對(duì) 苦 竹 葉 中 的 黃 酮 類 化 合 物 進(jìn) 行 了

25、 分 析 。 結(jié) 果 證 明 對(duì) 于復(fù)雜天然產(chǎn)物的定性 定量分析 , 高效液相色譜 -電噴霧質(zhì)譜 (HPLC/ESI-MS 聯(lián)用分析法是一種方便快捷有效的方法 。2.8毛細(xì)管電泳法毛細(xì)管電泳以高效 、 快速 、 進(jìn)樣量少 、 重現(xiàn)性好 、 不 易污染等優(yōu)點(diǎn) , 近幾年用于分析天然產(chǎn)物得到較大的 發(fā)展 。 陳剛 31等人用毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測法測定了 葛根和葛藤中葛根素 、 大豆甙元和蘆丁含量 。 以碳圓 盤電極為檢測電極 , 電極電位為 0.90V (VS.SCE , 在 50mmol/L 硼酸鹽緩沖液 (pH=9.0 中 , 使用長 40cm 熔 融石英毛細(xì)管 。 當(dāng)分 離電壓為 9kV ,

26、 上述三組分在 12min 內(nèi)完全分離 。 此外 , 吳婷 32等人用毛細(xì)管電泳 -電 化 學(xué) 檢 測 (CE-ED 法 同 時(shí) 測 定 了 益 母草及 3種益 母草沖劑中的根皮苷 、 橙皮素 、 蘆丁 、 山奈酚 、 洋芹 素 和槲皮素 6種黃酮類化合物的含量 。 采用 300m 碳 圓盤電極為工作電極 , 檢測電位為 +0.95V (VS.SCE , 在 80mmol/L 的 Na2B 4O 7-H 3BO 3(pH=8.7 的 運(yùn) 行 緩 沖 液中 , 上述各組分在 20min 內(nèi)能完全分離 。3結(jié)語黃酮類化合 物 的 主 要 提 取 方 法 是 有 機(jī) 溶 劑 提 取法 、 超聲波輔助

27、提取法 、 微波提取法 、 超臨界 CO 2萃取 法 、 酶浸漬萃取法 。 超臨界萃取法速度快 、 操作簡單 , 產(chǎn) 品無溶劑殘留 ; 超聲波輔助提取無需加熱 , 對(duì)有效成分 具有保護(hù)作用 。 在提取某些中草藥黃酮類成分時(shí) , 可以 將二者合理地結(jié)合利用 。 測定方法有比色法 、 薄層色譜 法 、 高效液相色譜法 、 高效液相色譜 -質(zhì)譜聯(lián)用法 、 以及 毛細(xì)管電泳法 。 比色法適于測定總黃酮 , 但不適用于單 一成分的測定 。 高效液相色譜是測定黃酮類化合物的 有效方法 。 它克服了傳統(tǒng)定量方法繁瑣 、 費(fèi)時(shí) 、 分離度 欠佳以及 GC 法的拖尾現(xiàn)象或制成相應(yīng)衍生物操作繁 瑣等缺點(diǎn) , 分離

28、效率高 , 在該類化合物中的應(yīng)用日趨增 多 。 高效液相色譜 -質(zhì)譜聯(lián)用法為黃酮類化合物的指紋 圖譜的建立提供了高效準(zhǔn)確的方法 。 毛細(xì)管電泳以高 效 、 快速 、 進(jìn)樣量少 、 節(jié)省溶劑 、 重現(xiàn)性好 、 不易污染等 優(yōu)點(diǎn) , 近幾年在黃酮類化合物的分析中得到了較大的 發(fā)展 。由于黃酮類化合物具有降壓 、 降血脂 、 鎮(zhèn)痛 、 抑制 血小板聚集 、 抗骨質(zhì)舒松 、 抗心律失常 、 抗過敏及抗缺 氧等多種藥理及保健作用 , 而且黃酮類化合物在人體 不能直接合成 , 只能從食品中獲得 , 所以近年來科學(xué)家 都積極關(guān)注從植物體中提取純度高 、 活性強(qiáng)的天然黃 酮成分 。 因此 , 對(duì)黃酮類化合物的

29、提取以及測定方法的 研究具有廣泛的前景 。參考文獻(xiàn) :1蔡健 , 華景清 . 黃酮提取工 藝 進(jìn) 展 J. 淮 陰 工 學(xué) 院 學(xué) 報(bào) , 2003, 12 (5 82-852葉文峰 . 天然黃酮類化合物以及在食品中的應(yīng)用 J. 宜春師專學(xué) 報(bào) , 2000, 22(5 9-123肖常厚 . 中藥化學(xué) M. 上海 上?？茖W(xué)技術(shù)出版社 , 1997:265 4李莉 , 劉成梅 , 田建文 , 等 . 現(xiàn)代提取分析技術(shù)在黃酮類化合物中 的應(yīng)用 J. 江西食品工業(yè) , 2006(4 42-445田呈瑞 , 李昀 . 銀杏葉黃酮的乙醇提取方法研究 J. 西北植物學(xué) 報(bào) , 2001, 21(3 556

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32、,2002,23(8 166-16715羅憲堂 , 熊友香 , 余世平 .UV 法測定山香圓葉總黃酮類成分含量 J. 中醫(yī)藥研究 ,2002,18(5 48-4916尉芹 , 馬希漢 . 杜仲葉黃酮含量測定方法研究 J. 西北農(nóng)林科技大 學(xué) :自然科學(xué)版 ,2001,29(5 199-12217劉佳佳 . 硼酸 -檸檬酸比色法測銀杏葉中黃酮苷含量 J. 食品與 發(fā)酵工業(yè) ,1999,25(6 42-4418徐燕 , 邵家德 . 雙波長分光光度法測定積芩合劑中黃芩總黃酮的 含量 J. 中國藥事 ,1997,11(4 250-25119周榮琪 . 竹 葉 提 取 物 總 黃 酮 含 量 測 定 方

33、 法 的 改 進(jìn) J. 食 品 科 技 , 2005(7 76-7920余戟 , 陳杰 . 膠束紙色譜法分離和鑒定黃酮類化合物 J. 廣東醫(yī)學(xué) 院學(xué)報(bào) ,1999,l7(2 102-10421孫仕萍 , 張文德 , 馬志東 , 等 . 單掃示波極譜法測定保健食品中總 黃酮的研究 J. 中國食品衛(wèi)生雜志 , 2002, 14(6 15-1622LiggJns J B.Deidzein and genistein content of fruits and nutsJ.Jour-nal of Nutritional Biochemistry,2000,11(6 326-33123孫艷梅 . 大豆

34、-葡萄糖苷酶水解大豆異黃酮糖苷的研究 J. 中國綜述157食品研究與開發(fā)2008年 1月 第 29卷第 1期作者簡介 :張杰 (1975- , 女 (漢 , 講師 , 碩士研究生 , 研究方向 :表面 活性劑的應(yīng)用及天然產(chǎn)物的開發(fā) 。糧油學(xué)報(bào) , 2006, 21(2 86-8924胡芳弟 , 封士蘭 , 張勇 , 等 .HPLC 法測定黃芪中黃酮類成分和黃芪甲苷的含量 J. 分析測試技術(shù)與儀器 , 2003, 9(3 173-17725劉斌 , 石任兵 , 姜艷艷 , 等 .HPLC 法測定苦參湯有效部位中 4種黃酮類成分含量 J. 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào) , 2005, 28(6 59-622

35、6鄭瑩 , 李緒文 , 金永日 .RP-HPLC 法測定三七葉中黃酮類成分的含量 J. 藥物分析雜志 , 2005, 25(9 1089-109127池靜端 , 何秀峰 , 劉愛茹 , 等 .HPLC 法測定銀杏葉中 6種黃酮成分的含量 J. 藥學(xué)學(xué)報(bào) , 1997, 32(8 625-62828馬強(qiáng) , 張金蘭 , 周玉新 , 等 . 高效液相色譜 -電噴霧質(zhì)譜法測定紅車軸草中異黃酮類化合物 J. 分析化學(xué)研究簡報(bào) , 2006(9 247-25029董淮海 , 陶冠軍 , 王林祥 , 等 . 高效液相色譜 -電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用法檢測大豆異黃酮和皂苷 J. 無錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào) ,2002,21(4

36、 415-41930肖貽崧 , 張廷志 , 侯鏡德 . 苦竹葉中黃酮類化合物的液相色譜 -質(zhì)譜聯(lián)用分析 J. 寧波高等?？茖W(xué)校學(xué)報(bào) , 2001, 13(3 123-12531陳剛 , 章慧琴 , 吳性良 , 等 . 毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測葛根和葛藤中幾種黃酮類化合物 J. 復(fù)旦學(xué)報(bào) :自然科學(xué)版 , 2004, 43(4 672-67532吳婷 , 管月清 , 鄭雙杰 . 毛細(xì)管電泳 -電化學(xué)檢測益母草及其沖劑中的黃酮類化合物 J. 分析科學(xué)學(xué)報(bào) , 2006, 22(4 406-408收稿日期 :2007-06-05大蒜 (Allium sativum L. 為百合科蔥屬植物的地下 鱗莖 , 自古就被當(dāng)作天然殺菌劑 , 有天然抗生素之稱 。 早在 2000多年前我國就開始種植 , 明代李時(shí)珍在 本 草綱目 中記載 :“ 大蒜