體外診斷試劑分析性能評估(準(zhǔn)確度-方法學(xué)比對)指導(dǎo)原則

1、體外診斷試劑分析性能評估（準(zhǔn)確度-方法學(xué)比對）指導(dǎo)原則一、前言準(zhǔn)確度評估資料是評價擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)， 也是產(chǎn)品注冊所需的重要申報資料之一。定量檢測方法的方 法學(xué)比對試驗是評估準(zhǔn)確度的方法之一，可以與參考方法或 臨床公認(rèn)質(zhì)量較好的已上市產(chǎn)品進(jìn)行比對。本指導(dǎo)原則基于國家食品藥品監(jiān)督管理局體外診斷試 劑注冊管理辦法（試行）的有關(guān)要求，參考CLSI有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)， 對采用方法學(xué)比對進(jìn)行準(zhǔn)確度評估的實驗方法和數(shù)據(jù)處理 方法進(jìn)行了原則性要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)采用方法學(xué)比 對進(jìn)行準(zhǔn)確度評估并準(zhǔn)備準(zhǔn)確度評估資料提供原則性指導(dǎo)， 也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估資料提供技術(shù)由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速

2、度快、專業(yè)跨度大，國家 食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時 對本指導(dǎo)原則進(jìn)行修訂。二、適用范圍本指導(dǎo)原則適用于首次申請注冊、申請許可事項變更的 用于定量檢測的體外診斷產(chǎn)品。因體外診斷產(chǎn)品評價是將儀 器、試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品等作為一個系統(tǒng)進(jìn)行評價，因此 方法學(xué)比對的評價采用系統(tǒng)的概念進(jìn)行描述。如特殊產(chǎn)品不 適用于本指導(dǎo)原則，可進(jìn)行詳細(xì)說明并采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行 準(zhǔn)確度評價。三、基本要求（一）方法學(xué)比對實驗的基本要求1. 操作者應(yīng)熟悉待評價系統(tǒng)和比對系統(tǒng)的操作。2. 編寫系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，其中包括校準(zhǔn)程序和室內(nèi)質(zhì) 控程序，采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀3. 比對系統(tǒng)的

3、選擇比對系統(tǒng)應(yīng)具有以下條件：（1 ）具有比待評價系統(tǒng)更好的精密度。（2）同待評價系統(tǒng)檢測結(jié)果具有相同的單位。（3）如有參考方法應(yīng)具有與參考方法已知的偏差。比對系統(tǒng)應(yīng)該選擇正確性經(jīng)過驗證的系統(tǒng)，根據(jù)實際條 件，選擇的順序如下：參考方法、原裝系統(tǒng)、配套系統(tǒng)、經(jīng) 過驗證的非配套系統(tǒng)。4. 待評價系統(tǒng)的處理進(jìn)行方法學(xué)對比實驗前，應(yīng)該對待評價系統(tǒng)進(jìn)行初步評 價，并且對待評價系統(tǒng)進(jìn)行精密度及線性的評價（參考相關(guān) 標(biāo)準(zhǔn)），只有在以上評價完成并且符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求后，才 可進(jìn)行方法學(xué)對比實驗。（二）方法學(xué)比對實驗的評估及數(shù)據(jù)處理方法1. 實驗樣本的基本要求（1）按照實驗對樣本的要求收集處理病人樣本，樣本 貯存時

4、間及條件由被測組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用 貯存的樣本。（2 ）樣本應(yīng)來自于不同患者，并且此患者所患疾病對 于被測組分的影響應(yīng)該是已知的，樣本不應(yīng)含有干擾此方法 的組分。（3）樣本濃度應(yīng)在方法的線性范圍內(nèi)，并覆蓋醫(yī)學(xué)決 定水平。通?；緩木€性范圍的低限到線性范圍的高限（應(yīng) 至少有50 %的樣本在參考范圍以外，但在線性范圍內(nèi)）。分析樣本的濃度應(yīng)盡可能在線性范圍內(nèi)均勻分布。商品質(zhì)控物 或者校準(zhǔn)物可能存在基質(zhì)效應(yīng)，應(yīng)避免使用。2. 實驗過程（1 ）每天選擇8個臨床患者樣本，按1到8的順序編 號。用兩種方法同時進(jìn)行實驗，按照 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 8 ,

5、7 , 6 , 5 , 4 , 3 , 2 , 1的樣本順序進(jìn)行測定。（2）以上實驗至少重復(fù) 5天，即至少分析40個不同的 臨床患者樣本。每天實驗必須進(jìn)行校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控，只有在 室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下，當(dāng)天的實驗室數(shù)據(jù)才有效。3數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報告（1 ）記錄測定結(jié)果（Xij和Yij）,Xij為比對系統(tǒng)測定值Yj為待評價系統(tǒng)測定值i為測定樣本的序號（1、2、340 ）j為同一樣本同一天測定的次序（1、2）（2）計算每個樣本測定的均值（X；和/），樣本重復(fù)測 定間差值的絕對值（DXi和DYi）及兩種方法測定結(jié)果間的 均值差值（T-X；）。相關(guān)實驗記錄見表 1表1比對系統(tǒng)待評價系統(tǒng)樣本編號iXi1Xi

6、2DXiYi1Yi2YiDYi123411140注：i= 1、240。Yi =DXi=DYi= | J：-一一(3) 以*對X；作散點圖。(4) 以(X；)對X；做偏倚圖。(5) 以(Yj-Xij)對斤做偏倚圖。(6) 檢查批內(nèi)離群點：計算樣本重復(fù)測定間差值(DXi 和DYi)的平均數(shù)，V=DX1+DX2-DX4Q40-_ =40樣本重復(fù)測定間差值超出該平均數(shù)4倍時，則判斷為離群點，如離群點超過1個時，整組數(shù)據(jù)應(yīng)舍棄，尋找原因后 重新進(jìn)行評價。如離群點為 1個，可以補(bǔ)充數(shù)據(jù)后重新進(jìn)行 統(tǒng)計。(7) 檢查批間離群點：計算兩種方法測定結(jié)果間均值 差值(I Yi - Xi丨)的平均數(shù)，如兩種方法測定

7、結(jié)果間均值差值超 出該平均數(shù)4倍時，則判斷該樣本為離群點，如離群點超過1個時，整組數(shù)據(jù)應(yīng)舍棄，尋找原因后重新進(jìn)行評價。如離 群點為1個，可以補(bǔ)充數(shù)據(jù)后重新進(jìn)行統(tǒng)計。(8) 相關(guān)系數(shù)計算：利用所有樣本雙份測定值進(jìn)行相 關(guān)系數(shù)計算，如果r >0.975(或r 2 >0.95),則認(rèn)為選擇的數(shù)據(jù) 范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。該分析的誤差可以由數(shù)據(jù)范圍給 以適當(dāng)補(bǔ)償，并且可以采用簡單的線性回歸來評價斜率和截 距。如果r2 0.95，那么必須通過分析另外一些樣品以擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍，然后再檢查全部數(shù)據(jù)系列，如仍然r2 0.95，則應(yīng)尋找待評價方法存在的缺陷，糾正后重新進(jìn)行試驗。對于某些免疫項目， 可適

8、當(dāng)放寬標(biāo)準(zhǔn)，原則上r2 >0.90 , 則認(rèn)為數(shù)據(jù)范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。(9) 回歸計算：利用所有樣本雙份測定的有效數(shù)據(jù)， 計算兩個方法間的線性回歸方程：丫= bX + a.(10 )偏差估計：在醫(yī)學(xué)決定水平，利用回歸方程計算預(yù)期偏差，預(yù)期偏差Bx=a+(b-1)X,相對偏差=Bx/X(11 )結(jié)果評估：結(jié)果至少應(yīng)滿足相關(guān)國際及國家標(biāo)準(zhǔn)， 同時滿足臨床需求。四、其它應(yīng)注意的問題(一) 采用的患者樣本對于被測組分的影響應(yīng)該是已知 的，樣本不應(yīng)含有干擾此檢測方法的組分。(二) 樣本貯存時間及條件由被測組分的穩(wěn)定性而定， 盡可能避免使用貯存的樣本。(三) 實驗前必須對待評價系統(tǒng)進(jìn)行精密度及線性的評 價，評價合格后方可進(jìn)行實驗。五、名詞解釋(一)待評價系統(tǒng)：擬進(jìn)行性能評估的產(chǎn)品。（二）比對系統(tǒng)：參考方法（