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![小腸平滑肌實(shí)驗(yàn)報(bào)告_第3頁](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-2/17/deee5ddc-4515-40f8-a5a1-1fd95963c042/deee5ddc-4515-40f8-a5a1-1fd95963c0423.gif)
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1、實(shí)驗(yàn)十二消化實(shí)驗(yàn)家兔離體小腸平滑肌生理特性目的要求1、學(xué)習(xí)離體腸段平滑肌的實(shí)驗(yàn)方法。2、了解腸段平滑肌的生理特性?;驹聿溉閯?dòng)物消化管平滑肌與肌肉組織共有的特性, 如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性 等。但消化管平滑肌又有其特點(diǎn),即興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有 緊張性、自動(dòng)節(jié)律性,對(duì)化學(xué)、溫度和機(jī)械牽張刺激較敏感等。這些特性可維持 消化管內(nèi)一定壓力,保持胃腸等一定的形態(tài)和位置,適合于消化管內(nèi)容物的理化 變化,在體內(nèi)受中樞神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素的調(diào)節(jié)。 將離體組織器官置于摸擬體內(nèi) 環(huán)境的溶液中,可在一定時(shí)間內(nèi)保持其功能。本實(shí)驗(yàn)以臺(tái)式液作灌流液,在體外 觀察及記錄哺乳動(dòng)物離體腸段的一般生理特性。動(dòng)物
2、與器材兔、恒溫平滑肌槽、支架、燒杯、20ml注射器、張力傳感器、生物機(jī)能 實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、溫度計(jì)、臺(tái)式液、腎上腺素(1: 10000)、乙酰膽堿(1: 10000)、 阿托品針劑(1支)。方法與步驟1、裝好實(shí)驗(yàn)裝置,平滑肌槽恒溫調(diào)至 37 C。2、制備離體兔腸段用木槌猛擊兔后頭延髓部,致其昏迷后立即剖開腹腔,找到胃幽門與十 二指腸交界處。在十二指腸起始端扎一線,取出十二指腸、空腸、放入冷臺(tái)式液 內(nèi)。先用20ml注射器沖洗內(nèi)容物,沖洗干凈后剪成若干約1.5cm長(zhǎng)的小腸段(每 一實(shí)驗(yàn)小組一段)在其兩端結(jié)扎,一端做一短線環(huán)固定在通氣的浴皿內(nèi),另一端 扎線與張力傳感器相連。將腸段完全浸浴在調(diào)好溫度的平滑肌槽
3、中,并調(diào)整好臺(tái) 式液充氣量(小氣泡接連不斷)。3、開啟生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),接通與張力傳感器相連的通道。固定管并調(diào)節(jié)扎 線與張力傳感器,使腸段運(yùn)動(dòng)自如又能牽動(dòng)傳感器 (注意:扎線不可貼壁或過緊 過松)。調(diào)節(jié)增益與掃描速度,使腸段的運(yùn)動(dòng)曲線清晰地顯示在顯示器上并記錄 腸段活動(dòng)曲線。4、實(shí)驗(yàn)觀察(1)記錄對(duì)照腸段運(yùn)動(dòng)曲線后,停止供氣1分鐘并記錄曲線變化,同時(shí)觀察 腸段緊張度變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化后,立即恢復(fù)供氣。用新鮮 37C臺(tái)式液沖洗, 待恢復(fù)正常(注意作好標(biāo)記)。(2)記錄對(duì)照腸段運(yùn)動(dòng)曲線后,加入 25C臺(tái)式液,并記錄曲線變化,同時(shí) 觀察腸段緊張度變化。同法,當(dāng)出現(xiàn)明顯變化后,立即用 37 r臺(tái)式液
4、沖洗,待 恢復(fù)正常。(3)同法加入45C臺(tái)式液并記錄曲線變化,同時(shí)觀察腸段緊張度變化。當(dāng) 出現(xiàn)明顯變化后,立即用新鮮 37r臺(tái)式液沖洗并待恢復(fù)。由于以上流出液中未加入藥物,可以回收使用。以下加入藥物的流出也 不可再用。(4)同法,加入2滴腎上腺素(1: 10000),觀察并記錄曲線變化。(5)同法加入12滴乙酰膽堿(1: 10000),觀察并記錄曲線變化。(6)加入3滴阿托品后立即加入于(5)同樣劑量的乙酰膽堿,記錄并觀察 曲線變化。同(5)比較曲線有何不同。注意:1加藥前必須準(zhǔn)備好更換用的37E臺(tái)式液。上述藥物劑量只是參 考,效果不明顯可補(bǔ)加,每次加藥出現(xiàn)效果后,必須立即更換浴槽內(nèi)的臺(tái)式液并
5、 沖洗3次,待腸肌恢復(fù)正常后在觀察下一項(xiàng)目。浴槽內(nèi)臺(tái)式液要保持一定溫度。2游離及取出腸段時(shí),動(dòng)作要快,取兔腸及兔腸穿線時(shí)盡可能不用金 屬及手指觸及。為保持離體腸段的活性,可先預(yù)冷充氧的營(yíng)養(yǎng)液,游離腸段 及穿線在預(yù)冷的營(yíng)養(yǎng)液中進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)中始終通氣。思考題1、本實(shí)驗(yàn)是否可用麻醉動(dòng)物的腸段?為什么?麻醉狀態(tài)影響腸段細(xì)胞的反應(yīng)性以及對(duì)藥物的敏感度2、進(jìn)行哺乳動(dòng)物離體組織器官實(shí)驗(yàn)時(shí),需控制哪些條件? 溫度:本實(shí)驗(yàn)控制恒定溫度 37度濕度:要時(shí)刻記住用相應(yīng)的潤(rùn)濕液潤(rùn)濕,本次試驗(yàn)用哺乳 動(dòng)物的臺(tái)氏液PH:要與哺乳動(dòng)物體液相似避免不必要的刺激:不要用手或者是金屬觸碰離 子成分與濃度:要與相關(guān)的動(dòng)物體液相似,本
6、實(shí)驗(yàn)是臺(tái)氏液3、為什么加入各種藥物會(huì)引起離體腸段活動(dòng)的變化?其機(jī)理是什么?dr對(duì)其是抑制作用可見離體腸管活動(dòng)減弱,描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變慢, 幅度減小以及基線下移ach是促進(jìn)作用,可見離體腸管活動(dòng)增強(qiáng),描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變快, 幅度增加。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機(jī)理,與消化道平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生動(dòng)作電位的離子基礎(chǔ) 是Ca2+的內(nèi)流有關(guān)。阿托品是ach的阻斷劑。所以兩者加入個(gè)觀察到曲線無明顯變化。阻斷乙酰膽堿與肌膜上的M受體結(jié)合。HCL離體腸管活動(dòng)減弱,描記曲線出現(xiàn)收縮幅度降低,頻率變慢。 H+升高 能干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程: H+能與Ca2+競(jìng)爭(zhēng)鈣調(diào)蛋白的結(jié)合位 點(diǎn)而使肌球蛋白ATP酶活性降低;使肌原纖維對(duì)Ca2+的敏感性和Ca2+從肌質(zhì)網(wǎng) 的釋放量減少。加了 NAO腸管活動(dòng)增強(qiáng)。中和了 H離子改變了細(xì)胞 外液的PH值所以恢復(fù)正常4、加入阿托品后再加入乙酰膽堿,腸段活動(dòng)受到抑制,為什么?這兩種藥對(duì)腸道平滑肌的作用正好相反, 乙酰膽堿能促進(jìn)腸道平滑肌蠕動(dòng),阿托 品是膽堿能神經(jīng)阻斷劑,能抑制腸道平滑肌蠕動(dòng)。兩藥同時(shí)使用,阿托品阻斷了 乙酰膽堿的作用,所以表現(xiàn)出腸道活動(dòng)受到抑制。5、根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,說明平滑肌的生理特性消化管平滑肌又有其特點(diǎn),即興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性、 自動(dòng)節(jié)律性,對(duì)化學(xué)、溫度和機(jī)械牽張刺激較敏感等。 這些特性可維持消化管內(nèi) 一定壓力
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