腦立輕膠囊提取工藝的優(yōu)選

1、腦立輕膠囊提取工藝的優(yōu)選    作者： 張曉燕，肖雨清，梁曉霞，熊輝 【關(guān)鍵詞】  腦立輕膠囊 摘要: 目的: 優(yōu)選腦立輕膠囊提取工藝的最佳條件。 方法: 用正交設(shè)計法以方中君藥葛根藥材的主要成分葛根素的含量為指標(biāo)，對其乙醇滲漉工藝及醇沉工藝進(jìn)行篩選。 結(jié)果: 優(yōu)選出腦立輕膠囊乙醇滲漉及乙醇沉淀工藝，重復(fù)實驗結(jié)果滿意。 結(jié)論: 腦立輕膠囊乙醇滲漉工藝最佳工藝條件為A2B1，C1D3即:取藥材潤濕6h，用8倍量的70%乙醇，以1ml/min的流速滲漉;醇沉工藝最佳工藝條件 為A2B2C2，滲漉液濃縮11，調(diào)60%乙醇醇沉18h。 關(guān)鍵詞: 腦立輕

2、膠囊; 正交實驗; 葛根素; 高效液相色譜法    the Study of the extraction of Nao Li Qing capsules       Abstract: Objective:To select a best condition of the extraction of Nao Li Qing capsules.Methods:The processes alcohol-extracted and alcohol-settled was conducted and inve

3、stigated by testing the concentration of Puerarin as an index with the way of orthogonal design.Results:The best condition of The processes alcohol-extracted and alcohol-settled of Nao Li Qing capsules was acquired with a satisfactory result when it repeated.Conclusion:The seepage efficiency of A2B1

4、C1D3by alcohol is the best condition，Which the soaking time was6hours with the seepage speed at1ml per minute by8times amount of alcohol（70%）;the best alcohol-settled condition was A2B2C2，Which the seepage solution has been extracted at the level of11（solution:drug）for18hours by the method of60%alco

5、hol settling. Key words: Nao Li Qing capsules; Orthogonal design; Puerarin; HPLC    腦立輕膠囊為我院中醫(yī)科根據(jù)多年對腦血管病的臨床治療經(jīng)驗，結(jié)合中醫(yī)理論和現(xiàn)代藥理研究總結(jié)出來的協(xié)定處方，處方由葛根、銀杏葉、淡大云、山茱萸、三七等中藥組成。具有活血化瘀、擴(kuò)張血管、增加血流量、改善微循環(huán)的作用。本院用于治療血管性癡呆、慢性腦供血不足所致的頭暈頭痛，記憶力減退、高血脂等癥效果顯著。    藥理實驗研究證實，方中葛根藥材、銀杏葉藥材中的黃酮類成分1 有改善腦微

6、循環(huán)，使處于異常狀態(tài)的血管功能恢復(fù)2 ，改善學(xué)習(xí)記憶功能。因此，根據(jù)藥物有效成分化學(xué)特性，將處方中葛根、銀杏葉、山茱萸用乙醇滲漉提取工藝。采用可能影響提取效果的因數(shù):乙醇濃度、滲漉速度、濕潤時間、乙醇用量進(jìn)行條件篩選，用L9 （34 ）正交表安排實驗，在確定最佳乙醇滲漉工藝的基礎(chǔ)上，對提取液進(jìn)行醇沉處理。采用可能影響醇沉效果的因數(shù):濃縮比例、醇沉濃度、醇沉?xí)r間進(jìn)行條件篩選，為制備工藝的確立提供科學(xué)的實驗依據(jù)。 1 儀器與藥品     1.1 儀器 GilsonGAD-E型高效液相色譜儀，118UV/Vis型檢測器，712型數(shù)據(jù)分析儀;葛根素對照品（中國藥

7、品生物制品檢定所，批號:752-200108）;乙晴、甲醇色譜純;其余化學(xué)試劑均為分析純;水為純水。     1.2 試藥 葛根、銀杏葉、山茱萸、三七、肉蓯蓉均購自十堰市藥材公司。     2 實驗方法和結(jié)果 2.1 正交實驗設(shè)計 2.1.1 乙醇滲漉工藝 方中葛根、銀杏葉共為君藥起著發(fā)表解肌、活血化瘀的功效，葛根、銀杏葉的主要活性成份為黃酮類、異黃酮、雙黃酮等一類以黃酮為母核的化合物，一般多以苷的 形式存在，并且葛根富含淀粉。所以，以葛根素的含量為指標(biāo)，確定乙醇濃度、滲漉速度、濕潤時間、乙醇用量為實驗因素，每個因

8、素備選3個水平。見表1。表1 乙醇滲漉工藝因素水平表（略）     利用L9 （34 ）正交表安排實驗，實驗的方法為:按原方等比例稱取銀杏葉、葛根、山茱萸藥材粉碎成粗顆粒，將葛根分放，按各因素水平的要求分別進(jìn)行滲漉處理，收集滲漉 液，過濾。濾液回收乙醇至無醇味后濃縮，濃縮至稠膏狀后置于干燥箱中80干燥得干浸膏，稱重。刮取干浸膏，磨成細(xì)粉，置干燥箱中保存?zhèn)溆谩?2.1.2 醇沉工藝 以葛根素的含量為指標(biāo)，確定醇沉濃度、濃縮比例、醇沉?xí)r間為試驗因素，每個因素備選三水平。見表2。表2 醇沉工藝因素水平表（略） 利用L9 （34 ）正交表安排實驗，實驗的方法為:按原方等比

9、例稱取銀杏葉、葛根、山茱萸藥材粉碎成粗顆粒，將葛根分放，以最佳滲漉工藝滲漉處理后，按醇沉工藝正交實驗各 因素的要求分別濃縮至適當(dāng)?shù)谋壤?，另置。棄去葛根藥渣，余藥渣與淡大云同煎二遍（2h，1.5h），煎煮液過濾，濃縮，按醇沉工藝正交實驗各因素的要求與 上述滲漉濃縮液醇沉規(guī)定的時間，過濾。濾液回收乙醇至無醇味后濃縮，濃縮至稠膏狀后置于干燥箱中80干得干浸膏，稱重。刮取干浸膏，磨成細(xì)粉，置干燥箱 中保存?zhèn)溆谩?2.2 腦立輕膠囊中葛根素含量的高效液相色譜法測定    2.2.1 HPLC色譜條件 流動相為甲醇-pH6.8磷酸鹽緩沖液（2377）;檢測波長250nm;靈敏

10、度為0.06AuFS;流速為0.9mlmin-1 ;進(jìn)樣量為20l。在該條件下葛根素的保留時間為7.9min左右。     2.2.2 樣品溶液的配制 精密稱取各工藝下的干浸膏粉0.5g，置50ml容量瓶中，加甲醇至刻度。超聲提取20min，放冷至室溫，加甲醇補(bǔ)足刻度，離心，取上清液1ml于10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，的樣品溶液。    2.2.3 樣品液的含量測定    精密取上述各工藝所制樣品液20l進(jìn)樣，在上述色譜條件下分別測定葛根素的含量，再計算各工藝所

11、制備的干浸膏粉中葛根素的總量。     2.3 實驗結(jié)果及分析 按原方等比例稱取銀杏葉、葛根、山茱萸藥材粉碎成粗顆粒，將葛根分放，按乙醇滲漉工藝正交實驗中各因素水平要求分別進(jìn)行實驗。結(jié)果見表3，表4。表3 乙醇滲漉工藝葛根素總量分析（略）表4 醇沉工藝葛根素總含量分析（略）     綜上所述，在以葛根素總量為指標(biāo)的乙醇滲漉工藝實驗中，各因素的影響程 度為:A>D>C>B，最佳工藝條件為A2 B 1C1 D3 。在以葛根素總量為指標(biāo)的醇沉工藝實驗中，各因素的影響程度為:A>B>C，最佳工藝條件為A

12、2 B2 C2 。綜合兩方面實驗結(jié)果提取醇沉工藝應(yīng)定為:取藥材潤濕6h，用8倍量的70%乙醇以1ml/min的流速滲漉，滲漉液回收乙醇，濃縮至11，調(diào)60%乙 醇含量醇沉18h，過濾，取上清液，即可。     2.4 最佳工藝條件驗證 按原方等比例稱取銀杏葉、葛根、山茱萸藥材粉碎成粗顆粒，將葛根分放，按最佳乙醇滲漉工藝，醇沉工藝的要求做驗證。實驗結(jié)果見表5。表5 驗證實驗（略）      實驗結(jié)果證實該工藝穩(wěn)定可行。通過以上實驗?zāi)X立輕膠囊提取工藝最后擬定為:按原方等比例稱取銀杏葉、80%葛根、山茱萸藥材粉碎成粗顆粒

13、，將葛根分放， 取藥材潤濕6h，用8倍量的70%乙醇以1ml/min的流速滲漉滲，漉液回收乙醇，濃縮至11，另置。棄去葛根藥渣，余藥渣與淡大云同煎二遍 （2h，1.5h），煎煮液過濾，濃縮一定比例與上述滲漉濃縮液調(diào)含60%乙醇量醇沉18h，過濾。濾液回收乙醇至無醇味后濃縮，濃縮至稠膏狀后于過 100目篩的三七、20%葛根粉混合，置于干燥箱中80干燥，充分干燥后磨成細(xì)粉，制粒滅菌，充填，即得腦立輕膠囊。     3 討論     本實驗將乙醇滲漉與沉淀分開進(jìn)行正交實驗考察，并且設(shè)計了驗證實驗，使得到的結(jié)果更加可靠。從

14、表3得知，在乙醇滲漉工藝中以葛根素的總量為綜合評定指標(biāo)時，A因素影響較D、C因素顯著，B因素最小（RA>RD>RC>RB）。    從表得知，在醇沉工藝中以葛根素的總量為綜合評定指標(biāo)時，A因素影響較B因素顯著，C因素最?。≧A>RB>RC）。    曾試用2000年版部中國藥典“葛根”項下的流動相甲醇-水（2575）3 ，結(jié)果峰型不對稱，分離不完全，且理論塔板數(shù)低。    經(jīng)過查閱資料4，5 、多次實驗，本實驗選用甲醇-pH6.8的磷酸鹽緩沖液（2773）為流動相，檢測結(jié)果均達(dá)到要求。樣品處理中采用了簡單的甲醇超生提取操作過程。本法與目前報道的同類方法相比，具有試劑用量小，效率高，操作簡便快捷，周期短等優(yōu)點，適合批量樣品的含量測定。 參考文獻(xiàn):     1 鄭俊華.生藥學(xué)，第3版M.北京:人民衛(wèi)生出版社，2001:159-159.     2 鄭虎占，董澤宏，佘 靖.中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用M.北京:學(xué)苑出版社，1998:578-1588，4319-