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文檔簡(jiǎn)介
1、濾器和超濾管濾器和超濾管趙慧彬趙慧彬2015年年6月月3日日 針頭式過濾器采用透明級(jí)高分子材料丙烯腈丁二烯苯乙烯(ABS)或聚丙烯(PP)制成,與一次性注射器配套使用,為實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的快速、方便、可靠的小體積樣品的過濾處理裝置, 主要應(yīng)用: 樣品的預(yù)濾, 實(shí)驗(yàn)室生物流體(血液、尿液等)、培養(yǎng)基和媒介添加劑的除菌過濾 2種直徑規(guī)格可選:13和30cm 5種膜類型:MCE、NYLON 、PVDF、PES 、PTFE 混纖膜(MCE) 由硝酸纖維素和醋酸纖維素混合而成由硝酸纖維素和醋酸纖維素混合而成,親水性親水性,化學(xué)兼容性強(qiáng),蛋化學(xué)兼容性強(qiáng),蛋白吸附量高。白吸附量高。用于顆粒分析,顆粒去處,生化
2、分析,HPLC樣品制備和溶劑過濾尼龍膜(NYLON) 化學(xué)相容性好,能在化學(xué)相容性好,能在PH值值112的條件下使用的條件下使用,適用于生物制品、培養(yǎng)基、溶液的除菌過濾。聚偏氟乙烯膜(PVDF) 親水性親水性PVDF膜結(jié)合的蛋白遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于硝酸纖維素膜結(jié)合的蛋白遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于硝酸纖維素,尼龍和尼龍和PTFE過過濾膜濾膜,可與水溶液和多種有機(jī)溶劑兼容,適用性廣泛,耐氧化性和耐熱性好,極適用于HPLC、GC的制備。聚醚砜膜(PES) 低蛋白吸附,高流速,低蛋白吸附,高流速,PH值范圍廣,化學(xué)相容性好,值范圍廣,化學(xué)相容性好,適用于樣品的制備 、水溶劑過濾 、微生物研究 、環(huán)境分析 、 生物分析 、HPLC
3、流動(dòng)相過濾等。聚四氟乙烯(PTFE) 化學(xué)穩(wěn)定性和惰性,化學(xué)穩(wěn)定性和惰性,適用于化學(xué)腐蝕性較強(qiáng)的有機(jī)溶劑、水溶液和氣體,對(duì)大多的酸性、堿性和溶液都有耐受性 黃色的是PVDF Durapore 膜的,是又一款hero產(chǎn)品,其親水型PVDF膜是所有膜中蛋白吸附最低的,如果是含有蛋白成分的樣品,用黃色的Millex ,樣品活性成分損失最?。?綠色的是PES膜的,Millipore Express PLUS商品名代表的是“最快流速”,這個(gè)得益于密理博對(duì)PES膜的特別工藝改造,漏斗形的膜孔結(jié)構(gòu)帶來業(yè)界標(biāo)桿性的使用效果既快又好。200mL的樣品輕松搞定! 藍(lán)色的MCE、紫色的Nylon、白色的PTFE膜等
4、在化學(xué)兼容性方面更為寬泛,適合含有特殊(有機(jī))化學(xué)成分和酸堿性較強(qiáng)的樣品。 白色的有PES膜,也有PTFE膜,具體規(guī)格根據(jù)客戶需要。 處理量分別是15ml 、4ml,、2ml、 0.5ml 再生纖維素膜具有一系列截留分子量,有3KD,10KD,30KD,50KD,100KD。 使用超濾管的優(yōu)勢(shì) 高回收率 90% 垂直結(jié)構(gòu)的膜減少了濃差極化,加快離心速度,快達(dá) 5 分鐘 熱密封膜將下游溶出物污染可能性降到最低 100% 完整性檢測(cè)確保性能可靠 透明外殼和體積刻度方便樣品察看 直接吸取樣品減少處理步驟 高濃縮倍數(shù):80100 倍應(yīng)用 生物樣品濃縮:包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物 組織培養(yǎng)提取物或
5、細(xì)胞裂解液中大分子組分的純化 對(duì)稀釋或從柱洗脫液預(yù)先純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮 脫鹽和緩沖液更換換濃縮蛋白時(shí)超濾管的處理換濃縮蛋白時(shí)超濾管的處理 超濾管可以重復(fù)使用,用0.1M的NaOH浸泡12h,用水清洗,再在離心機(jī)上用相關(guān)溶液(滅菌水或PBS)清洗3次,即可用于濃縮新的蛋白;長(zhǎng)時(shí)間放置超濾管的處理長(zhǎng)時(shí)間放置超濾管的處理 較長(zhǎng)時(shí)間不使用的超濾管,在用0.1M的NaOH浸泡12h,用水清洗,用20的乙醇浸泡保存,務(wù)必保持濾膜潤濕,不能長(zhǎng)菌;超濾管使用的離心轉(zhuǎn)速超濾管使用的離心轉(zhuǎn)速 離心轉(zhuǎn)速一般采用4000rpm(一般建議為3000g,最大不能超過4000g)離心58分鐘,即可將4ml樣品濃縮至1ml
6、以下至幾十微升;速度過高,目的蛋白會(huì)離下,導(dǎo)致目的蛋白丟失;速度過低,耗時(shí),工效低;槍頭伸入超濾管中時(shí)注意事項(xiàng)槍頭伸入超濾管中時(shí)注意事項(xiàng) 加蛋白液或Buffer到超濾管時(shí),可以用藍(lán)槍頭;但從超濾管底吸取濃縮好的目的蛋白時(shí),必須用黃槍頭;用槍頭伸入超濾管中時(shí),必須防止碰到濾膜,以免戳破濾膜;減少超濾管對(duì)蛋白的吸附損失減少超濾管對(duì)蛋白的吸附損失 超濾管的濾膜能吸附蛋白,會(huì)導(dǎo)致目的蛋白減少可達(dá)30左右;為減少蛋白損失,在吸盡目的蛋白液后,再用蛋白Buffer吹洗超濾管的管底,可以將濾膜吸附的蛋白洗下大部分而減少目的蛋白的損失;如純化的蛋白較濃時(shí),注意濃縮的體積不可過??;一般無論如何離心,底部會(huì)保留有200 l左右的蛋
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