血液中多縮葡糖濃度的測(cè)定

1、血液中多縮葡糖濃度的測(cè)定 曾令發(fā)03088046方法理論方法邁卡基/匹克法新方法理論方法 根據(jù)去掉血漿中的蛋白以后，所獲得的堿性濾液中沉淀銅絡(luò)合物，隨后測(cè)定沉淀中沉積的銅返回Metkaji和Pycjio法 離心作用于含多縮葡糖的血液并用yehephh取出血漿，將與獲得的血漿體積相同的10%的三錄乙酸加到血漿內(nèi)；二次離心溶液，向離心液內(nèi)加入94%的乙醇，將溶液比色，并根據(jù)已知濃度的多縮葡萄糖溶液制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算。理論方法和邁卡基/匹克法的缺點(diǎn)n 理論方法 : 極費(fèi)時(shí)間而且不準(zhǔn)確，因?yàn)檠褐型泊嬖谂c銅形成絡(luò)合物的其他物質(zhì)n “邁”法 : 費(fèi)勞力并占用相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間（每一樣品需一小時(shí)）。此外

2、，方法不夠準(zhǔn)確，因?yàn)樵诩尤胍掖己笕芤旱墓饷芏炔荒鼙３趾愣?，而迅?改變。 返回推薦方法n目的：縮短測(cè)定時(shí)間并提高測(cè)定的準(zhǔn)確度n方法：離心或靜置含多縮葡糖的，用3.8%的檸檬酸鈉，以9：1的比例穩(wěn)定了的血液制劑。把0.1毫升預(yù)先制備的0.9%的NaCl溶液中的凝血酶溶液（活度為2.5單位/毫升）加到0.2毫升的被研究的血漿內(nèi)。在凝血酶的作用下測(cè)定血漿的凝固時(shí)間。原理n 按照測(cè)定血液中多縮葡糖濃度的方法，包括用化學(xué)試劑處理原血液或起血漿，將樣品用凝血酶溶液處理，測(cè)定凝血的時(shí)間并根據(jù)下式子測(cè)定多縮葡糖的濃度多縮葡糖=at+bt+c 式中t為凝血時(shí)間，a,b,及c 為考慮到多縮葡糖性質(zhì)是系數(shù)。好處：可

3、以縮短分析時(shí)間達(dá)數(shù)分鐘。此外，該方法減輕了勞力，因?yàn)樗灰蟮诙坞x心作用及制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。由于在引用公式時(shí)利用了從前已知方法測(cè)定的血液中多縮葡糖的平均值。故提高了方法的準(zhǔn)確度。測(cè)定血液中多縮葡糖濃度用的系數(shù)制劑 系 數(shù) abc 多聚甘氨酸 0.146 -5.57 53.13復(fù)多聚甘氨酸 0.234 -10.15 110.0血液樣品的取樣時(shí)間凝血時(shí)間 血液中制劑的濃度已知方法推薦方法 多聚甘氨酸6%制劑加入前 19.5 0.2 經(jīng)過10分鐘 10.3 0.1 11.34 1.03 11.242小時(shí) 12.4 0.2 6.28 1.5 6.514小時(shí) 15.1 0.1 2.47 0.6 2.31

4、復(fù)多聚甘氨酸10%制劑加入前 21.7 1.8 經(jīng)過10分鐘 11.5 1.05 24.9 0.2 24.222小時(shí) 14.0 0.8 13.2 1.35 13.764小時(shí) 19.0 1.0 2.83 0.35 1.62例題n例1. 取0.2毫升含有多聚甘氨酸的血漿，倒入0.1毫升的凝血酶溶液，用秒表測(cè)定時(shí)間，該時(shí)間為15.1秒。按公式計(jì)算血液中的多聚甘氨酸。n多聚甘氨酸=0.146*t-5.57*t+53.13 =0.146*228.01-5.57*15.1+53.13 =2.31所以，血液中多縮葡糖的濃度為2.31毫克/毫升n例2. 取0.4毫升含有復(fù)多聚甘氨酸的血漿，將其靜置，倒入0.1毫升的凝血酶溶液，用秒表測(cè)定時(shí)間t，該時(shí)間為15秒。按公式計(jì)算血液中的復(fù)多聚甘氨酸。 復(fù)多聚甘氨酸=0.