土壤農(nóng)化分析實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

1、實(shí)驗(yàn)一 實(shí)驗(yàn)室須知及儀器清點(diǎn)洗滌和 不同類型分析天平的使用 學(xué)習(xí)土壤農(nóng)化分析首先要了解土壤農(nóng)化分析的基礎(chǔ)知識(shí)和安全知識(shí)；在實(shí)驗(yàn)中要了解實(shí)驗(yàn)室的一般規(guī)則；所用純水，試劑；器皿、儀器等等的選擇、洗滌和各種分析天平的使用。 思 考 題 1純水制備方法有哪幾種？ 2如何選擇洗滌器皿的洗滌劑？ 3使用分析天平的注意事項(xiàng)有哪些？ 參 考 書 1分析化學(xué)手冊(cè)第一冊(cè)基礎(chǔ)知識(shí)與安全知識(shí)，杭州大學(xué)化學(xué)系分析化學(xué)教研室編、化學(xué)工業(yè)出版社1 / 74實(shí)驗(yàn)二 土壤樣品的采集和處理 一、土壤樣品的采集 土壤樣品的采集是土壤分析工作中一個(gè)最重要最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，它是關(guān)系到分析結(jié)果是否正確的一個(gè)先決條件，特別是耕作土壤，由于差異

2、較大，若采樣不當(dāng)，所產(chǎn)生的誤差（采樣誤差）遠(yuǎn)比土壤稱樣分析發(fā)生的誤差大，因此，要使所取的少量土壤能代表一定土地面積土壤的實(shí)際情況，就得按一定的規(guī)定采集有代表性的土壤樣品。如何采樣？這要根據(jù)分析的目的，要求來(lái)決定采樣的方法。 （一）土壤樣品的采集方法、種類和注意事項(xiàng)： 1混合樣品的采集 由于土壤是一個(gè)不均勻的體系，為了要了解它的養(yǎng)分狀況，物理性、化學(xué)性，我們不能把整塊土都搬進(jìn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析，因此，就必須選取若干有代表性的點(diǎn)子取樣混合后成為混合樣品，混合樣品實(shí)際上就是一個(gè)平均樣品，這個(gè)平均樣品就要具有代表性。 要使樣品真正有代表性，首先要正確劃定采樣區(qū)，找出采樣點(diǎn)，劃采樣區(qū)（采樣單元或采樣單位）時(shí)

3、是根據(jù)土壤類別、地形部位、排水情況、耕作措施、種植栽培情況、施肥等等的不同來(lái)決定的。每一個(gè)采樣區(qū)內(nèi)，再根據(jù)田塊面積的大小及被測(cè)成分的變異系數(shù)，來(lái)確定采樣點(diǎn)的多少，當(dāng)然，取的點(diǎn)子越多，代表性越強(qiáng)，那就越好，但它會(huì)造成工作量的增多，因此一般人為的定為5-10，10-20點(diǎn)或根據(jù)計(jì)算應(yīng)取多少點(diǎn)。 （1）試驗(yàn)田土壤樣品的采集： 一般試驗(yàn)小區(qū)為一采樣區(qū)。 （2）大田（旱地）土壤樣品的采集：在進(jìn)行土壤養(yǎng)分狀況的調(diào)查時(shí)，一般是根據(jù)土壤類別、地形、排水、耕作、施肥等不同來(lái)劃分采樣區(qū)；也有的是根據(jù)土壤肥力情況按上、中、下來(lái)劃分采樣區(qū)。 （3）水田土壤樣品的采集。 它和大田土壤樣品的采集基本一致 （4）有采樣點(diǎn)的

4、布置（正確的） （不適當(dāng)?shù)模?（不適當(dāng)?shù)模?×代表樣點(diǎn)位置圖1 土壤采樣點(diǎn)的方式在采集多點(diǎn)組成的混合樣品時(shí)，采樣點(diǎn)的分布，要盡量做到均勻和隨機(jī)，均勻分布可以起到控制整個(gè)采樣范圍的作用：隨機(jī)定點(diǎn)可以避免主觀誤差，提高樣品的代表性，布點(diǎn)以鋸齒形或蛇形（S形）較好，直線布點(diǎn)或梅花形布點(diǎn)容易產(chǎn)生系統(tǒng)誤差（圖1），因?yàn)楦?，施肥等農(nóng)業(yè)技術(shù)措施一般都是順著一定方向進(jìn)行的，如果土壤采樣與農(nóng)業(yè)操作的方向一致，則采樣點(diǎn)落在同一條件的可能性很大，易使混合土樣的代表性降低。 （5）采樣方法和注意事項(xiàng)第一步 第二步 第三步圖2 土壤采樣圖采取的深度是根據(jù)我們的要求而決定。采取耕作層時(shí)，一般取015或020c

5、m，其具體方法是在布置好的取樣點(diǎn)上，先將表層0-3mm左右的表土刮去，然后再用土鏟斜向或垂直按要求深度切取一片片的土壤（圖2）。各點(diǎn)所取的深度、土鏟斜度，上下層厚度和數(shù)量都要求一致，大致相等。將各點(diǎn)所取的土壤在塑料布或木盤中混勻，同時(shí)去除枯枝落葉，草根、蟲殼、石礫等雜質(zhì)，然后按四分法（圖3）取其適量（1公斤 ）的土壤裝入布袋或塑料袋中，同時(shí)用鉛筆寫好標(biāo)簽，一式二張，一張放入袋內(nèi)，一張系于袋口，在標(biāo)簽上記好田號(hào)，采樣地點(diǎn)，深度、日期和采樣人，同時(shí)在記錄本上詳細(xì)記載前作，當(dāng)季作物、施肥及作物生長(zhǎng)等情況。圖3 四分法取樣步驟圖 在布置采樣點(diǎn)時(shí)，必須具有代表性。因此，就得避免在田邊、地角、路旁、堆肥等

6、沒(méi)有代表性的地方設(shè)點(diǎn)取樣。 （6）采樣時(shí)間 土壤的化學(xué)性質(zhì)，有效養(yǎng)分的含量，不僅隨土壤垂直方向和土壤表面延伸的方向有所不同，而且隨季節(jié)、時(shí)間也很大的變化，特別是溫度和水分的影響，如象冬季土壤中有效磷鉀往往增高，在一定程度上是由于溫度的降低，土壤有機(jī)酸有所積累，由于有機(jī)酸能與鐵、鋁、鈣等離子絡(luò)合，降低這些陽(yáng)離子的活性，而增加了磷的活性，同時(shí)也有部分非交換性鉀，轉(zhuǎn)變成交換性鉀，另外，由于一天當(dāng)中，早、中、晚太陽(yáng)幅射熱的影響的不同，土壤膠體活化強(qiáng)度有所不同，而導(dǎo)致土壤有效養(yǎng)分含量的變化。 因此，當(dāng)其了解土壤肥力，養(yǎng)分供應(yīng)情況時(shí)，一般都在早春采集土樣，若是研究作物生長(zhǎng)期中土壤養(yǎng)分的變化供應(yīng)情況，就必須

7、根據(jù)作物的不同生長(zhǎng)期，分期采集土壤樣品，總之，采樣必須注意時(shí)間因素，同一個(gè)季節(jié)時(shí)間內(nèi)，采的土壤分析結(jié)果才能相互進(jìn)行比較。 2、特殊樣品的采集 尋找作物生長(zhǎng)失常的原因，有的是營(yíng)養(yǎng)元素或微量元素的不足，有的是某種元素的過(guò)剩而產(chǎn)生中毒或造成生理機(jī)能的失調(diào)，有的是土壤過(guò)酸或過(guò)堿，或某些有毒物質(zhì)如還原性的S、H2S、低鐵等過(guò)多的存在，還有當(dāng)其土壤水分過(guò)多，也會(huì)引作物的受害；由于這些局部受害的現(xiàn)象，在采樣時(shí)，就得注意它的典型性。 當(dāng)其一整塊土壤都受害時(shí)，要了解有害物質(zhì)在土壤中的含量，也得進(jìn)行混合樣品的采集?？梢姡蓸臃椒ㄊ歉鶕?jù)我們的目的要求來(lái)確定的。在進(jìn)行典型樣品的分析工作中，一般也要和正常樣品進(jìn)行對(duì)照分

8、析。在尋求作物生長(zhǎng)與土壤關(guān)系時(shí)，在采集植株的同時(shí)，也要采集它的根際土壤同時(shí)進(jìn)行分析。 3、剖面樣品的采集 研究土壤的基本理化性能，土壤的分類，土壤的生存發(fā)育，必須按土壤的發(fā)生層次取樣，它是根據(jù)地形部位、成土母質(zhì)、植被類型和土類來(lái)確定取樣點(diǎn)，挖掘剖面(一般深為12米)，再根據(jù)土壤剖面的顏色、土壤結(jié)構(gòu)、質(zhì)地、松緊度、濕度、植物根系的分布情況等劃分層次，然后自下而上采集各發(fā)生層次中中部位置的土壤。 4、物理性質(zhì)樣品的采集 了解土壤的某些物理性質(zhì)如土壤容重，孔隙等等。得需用特制的取土器（如鋼環(huán)刀），采集能保持原田間自然狀況的土體來(lái)進(jìn)行分析測(cè)定。 5、鹽分動(dòng)態(tài)樣品的采集： 鹽分在土壤中的變化，以垂直方向

9、(上下變化)更為明顯，因此，不僅要了解土壤中鹽分的多少，而且還要了解鹽分的分布和變化情況。因此，我們不是按發(fā)生層次采樣，而是自地表每10cm或20cm采集樣品。 (二)采集養(yǎng)分土壤樣品的工具 進(jìn)行土壤養(yǎng)分分析時(shí)，一般常用以下三種取土工具： 1、小土鏟 利用小土鏟來(lái)根據(jù)采樣深度，采取上下一致均勻的土片，將各點(diǎn)相等的土片混合成一個(gè)混合樣品。它的適用性較強(qiáng)，除淹水土外，可適合任何條件下樣品的采集，特別是混合樣品的采集。 2、管形土鉆 下部為一園柱形開口鋼管，上部系柄架，將土鉆鉆入土中一定土層深度處，采得一個(gè)均勻的土柱。管形土鉆取土迅速。混雜少，但它不適用于鑠質(zhì)土壤，干硬的粘重土壤或砂性較重的砂土。

10、3、普通土鉆 使用方便，能取較深層的土壤，但需土壤較濕潤(rùn)，對(duì)較砂的土壤也不很適用。它取出的土壤易混雜，對(duì)有機(jī)質(zhì)和有效養(yǎng)分的分析結(jié)果，往往是低于用其它工具所取的土壤，其原因是表土易掉落。 二、土壤樣品的制備和保存 從田間取回的土壤樣品，首先進(jìn)行風(fēng)干、磨細(xì)、過(guò)篩、混勻、裝瓶等過(guò)程后，即成為分析測(cè)定樣品。 處理樣品的目的： 1、是挑選出非土壤部分，使樣品能代表土壤真正的組成部分； 2、是磨細(xì)混勻，使稱取少量樣品，也有較高的代表性，以減少稱樣誤差； 3、將土粒磨細(xì)，增大表面積，使測(cè)定成分便于溶解，浸提； 4、使樣品能較長(zhǎng)期保存，不致受微生物的作用而變質(zhì)； 5、便于工作使用。 (一)風(fēng)干 除了某些項(xiàng)目(

11、例如硝態(tài)氮、銨態(tài)氮、亞鐵，還原性硫等)需要新鮮樣品測(cè)定外，一般項(xiàng)目都用風(fēng)干樣品進(jìn)行分析。樣品的風(fēng)干，可在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，也可攤在木板或白紙、塑料布上，放在晾土架上風(fēng)干。在土樣半干時(shí)，須將大塊土壤分碎，以免完全干后，結(jié)成硬塊，難以打碎磨細(xì)，風(fēng)室內(nèi)要求干燥通風(fēng)嚴(yán)防SO2、NH3、H2S等各種酸、堿蒸氣和灰塵等其它東西的浸蝕和污染。 (二)磨細(xì)、過(guò)篩和保存 樣品風(fēng)干后，再次挑選出非土壤部分動(dòng)植物殘?bào)w(根、莖、葉蟲體)和石塊、結(jié)核(石灰、鐵、錳)，然后在木盤或硬橡膠板上壓碎、磨細(xì)(不能用鐵棒及礦物粉碎機(jī)磨細(xì)，以防壓碎石塊或樣品沾污鐵質(zhì))使之全部通過(guò)2mm孔徑的篩子，均勻后分成二分，一分用作機(jī)械分析和水溶

12、性鹽的測(cè)定，另一分再度進(jìn)行磨細(xì)，使之全部通過(guò)1mm的篩子，用作其它項(xiàng)目的化學(xué)分析。(近年來(lái)，由于很多分析項(xiàng)目采用半微量法，稱樣減少，則要求樣品的細(xì)度增加，采用0.5mm的土粒進(jìn)地分析)。 但是，在進(jìn)行土壤全量分析，測(cè)定Si、AL、Fe和有機(jī)質(zhì)，全氮、全磷、全鉀時(shí)，樣品又應(yīng)研得很細(xì)，便于處理樣品，分解完全，這時(shí)將全部1mm化學(xué)分析樣品倒出，鋪平成薄層，劃成許多小方格用角匙在每一小方格中取出大致相等的一定量樣品，共約20克左右，再度磨細(xì)，并全部通過(guò)100號(hào)篩（0.149mm篩孔）的篩子。在測(cè)定Si、Al、Fe時(shí)，樣品應(yīng)放在瑪瑙乳缽中研細(xì)，以免瓷乳缽影響Si的測(cè)定。 最后將以上磨細(xì)、過(guò)篩、混勻的土樣

13、，分別裝入磨口塞的廣口瓶中，寫好標(biāo)簽(一式兩張)，一張同土樣裝入瓶中，另一張貼于瓶壁；標(biāo)簽上注明田塊號(hào)(或樣號(hào))，土壤名稱，采取地點(diǎn)，采樣深度，日期和采樣人和孔徑(或篩號(hào))等。然后將樣品保存在樣品架或櫥柜中，應(yīng)壁免日光、高溫、潮濕和酸堿氣體的影響。 思 考 題 1采集土壤樣品應(yīng)注意些什么？ 2土壤化學(xué)分析的主要誤差來(lái)源？ 3采集一個(gè)代表性的混合樣品有哪些要求？ 4土壤在制備過(guò)程中應(yīng)該注意哪些事項(xiàng)？為什么磨細(xì)過(guò)篩時(shí)必須使土壤全部通過(guò)篩子，不得棄去未過(guò)篩部分？實(shí)驗(yàn)三 實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)及試劑的配制(以測(cè)定土壤有機(jī)質(zhì)為例) 一、實(shí)驗(yàn)要求 1、通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)，要求同學(xué)掌握有關(guān)測(cè)定方案的設(shè)計(jì)，即根據(jù)精度的要求

14、選擇何種測(cè)定方法；要本實(shí)驗(yàn)應(yīng)作幾次平行；需要哪些主要儀器及試劑等等。 2、熟悉試劑配制工作，即對(duì)各種試劑的純度要求；應(yīng)配制哪些試劑；根據(jù)測(cè)定的樣量和平行重復(fù)次數(shù)計(jì)算出試劑的配制數(shù)量及貯存方法等等。 3、進(jìn)一步熟悉分析天平的使用及維護(hù)。 二、主要儀器 分析天平和臺(tái)平；滴定管；燒杯；量筒；容量瓶；移液管，烘箱等。 三、主要試劑 1、FeSO4·7H2O(二級(jí)純)2、K2Cr2O7(一級(jí)純) 3、鄰啡羅啉指示劑(配制方法同實(shí)驗(yàn)五)4、濃H2SO4 四、實(shí)驗(yàn)操作 為下次實(shí)驗(yàn)土壤有機(jī)質(zhì)的測(cè)定(重鉻酸鉀容量外加熱法)，要求每個(gè)學(xué)生配制好以下兩種試劑：1、0.1N K2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液 稱取經(jīng)1

15、30烘23小時(shí)的K2Cr2O7(分析純)0.4903克，先用少量水溶解，然后無(wú)損地轉(zhuǎn)入100毫升量瓶中，加入7毫升濃H2SO4用水定容，即為0.1000N的K2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液。(其中含H2SO4的濃度約為2.5N)。為了稱量方便，也可稱取K2Cr2O7約0.5×××克，根據(jù)其準(zhǔn)確重量計(jì)算出該溶液的準(zhǔn)確濃度。 2、0.2N FeSO4溶液稱取FeSO4·H2O（二級(jí)純或三級(jí)純）14克溶于少量水中，加入濃H2SO41.25毫升，并用水稀釋至250毫升，此溶液易被空氣氧化，而致濃度不斷下降，故配好使用時(shí)須標(biāo)定其準(zhǔn)確濃度。 標(biāo)定方法：吸取0.1NK2Cr2O

16、7標(biāo)準(zhǔn)溶液20.00毫升于三角瓶中，加鄰啡羅啉指示劑23滴，用0.2NFeSO4溶液滴定至磚紅色為終點(diǎn)，根據(jù)FeSO4溶液的消耗量（毫升數(shù)）即可計(jì)算出FeSO4溶液的準(zhǔn)確當(dāng)量濃度（計(jì)算方法： N1V1N2V2）。 思 考 題 1.為什么硫酸低鐵濃度要經(jīng)常標(biāo)定？ 2.為什么K2Cr2O7試劑可作基準(zhǔn)物質(zhì)？實(shí)驗(yàn)四 風(fēng)干土樣吸濕水的測(cè)定（烘干法） 一、方法原理 將土壤樣品于105110的恒溫干燥箱中烘至恒重，所失去的重量即為水分重量。據(jù)此計(jì)算出失水重量占烘干土重的百分?jǐn)?shù)。 二、主要儀器 編有號(hào)碼的有蓋稱量皿（或鋁盒）；分析天平；恒溫干燥箱；干燥器（內(nèi)盛變色硅或無(wú)水CaCl2）。 三、操作步驟 取1m

17、m風(fēng)干土樣5克左右，放入已烘干稱重（W1）（用分析天平）的鋁盒中，在分析天平上稱重（W2），將鋁盒放入烘箱中，把蓋斜置，留一條縫，以便水汽逸出?；?qū)⑸w入于鋁盒的低部，在105110烘8小時(shí)，取出加蓋后，在干燥器內(nèi)冷卻至室溫（2030分鐘）取出稱重（W3）。必要時(shí)，重新放入烘箱中烘3小時(shí)，冷卻稱重，以驗(yàn)證是否恒重（前后二次重量之差不超過(guò)3mg即為恒重）。四、結(jié)果計(jì)算 水分系數(shù)1土壤水分 思 考 題 1.為什么計(jì)算土壤水分百分率時(shí)，要以烘干土為基礎(chǔ)？以樣品重為基礎(chǔ)進(jìn)行計(jì)算行否？為什么？ 2.用烘干法測(cè)定土壤水分時(shí)，有哪些因素會(huì)造成它的誤差？ 3.用下列公式計(jì)算土壤水分百分率時(shí)，是表示什么意思？實(shí)驗(yàn)

18、五 土壤有機(jī)質(zhì)的測(cè)定（重鉻酸鉀容量法外加熱法） 一、方法原理在加熱條件下，用過(guò)量的K2Cr2O7H2SO4溶液使土壤有機(jī)質(zhì)中的碳氧化成CO2，而等當(dāng)量地被還原成Cr3+，剩余的再用Fe2+標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。根據(jù)被氧化前后的數(shù)量變化，計(jì)算出有機(jī)碳的含量，再計(jì)算出有機(jī)質(zhì)的含量。 2K2Cr2O78H2SO43C2K2SO42Cr2（SO4）38H2O3CO2 K2Cr2O76Fe2SO47H2SO4K2SO4Cr2（SO4）3Fe2（SO4）37H2O 二、主要儀器 電爐（1000W）；溫度計(jì)（300）；硬質(zhì)玻璃試管（25×200mm或20×200mm）磷酸浴（或油浴鍋）；酸式滴定

19、管（50ml）；三角瓶（250ml）。 三、主要試劑 （1） 0.4NK2Cr2O7 H2SO4溶液：稱取40.0gK2Cr2O7（三級(jí)）溶于600800毫升水中，然后加水至1000毫升。將些溶液轉(zhuǎn)移入3000毫升大燒杯中，另取1000毫升比重為1.84的濃H2SO4（三級(jí)），慢慢地倒入K2Cr2O7水溶液中，不斷攪拌。為避免急劇升溫，每加100毫升H2SO4后可稍停片刻；并把大燒杯放在盛有冷水的盆內(nèi)冷卻，當(dāng)溶液的溫度降至不燙手時(shí)再加另一份100毫升濃H2SO4，直到全部加完為止，此溶液極為穩(wěn)定，可長(zhǎng)期保存。（2） 0.1N K2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取在103烘23小時(shí)的K2Cr2O7（一級(jí)

20、）4.9032克，先用少量水溶解，然后無(wú)損地轉(zhuǎn)入1000毫升容量瓶?jī)?nèi)，加水定容，即為0.1000N K2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液。如為了稱取方便，也可稱取K2Cr2O7約5.0××g，根據(jù)準(zhǔn)確稱重計(jì)算出溶液的準(zhǔn)確濃度。（3）0.2NFe2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取分析純56g Fe2SO4·7H2O或80g （NH4）2SO4·Fe2SO4·6H2O溶于蒸餾水中，加6NH2SO4 30ml然后加水稀釋至1000毫升。此溶液的準(zhǔn)確濃度溶液用0.1000NK2Cr2O7的標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定。 0.2NFe2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定：吸取0.1000N K2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)

21、溶液20.00ml放入100ml三角瓶中，加鄰啡羅啉指示劑23滴，然后用Fe2SO4溶液滴定至終點(diǎn)（橙黃蘭綠磚紅）。根據(jù)Fe2SO4溶液的消耗量計(jì)算Fe2SO4溶液的準(zhǔn)確當(dāng)量濃度。此溶液易被空氣氧化，濃度不斷降低，故在使用時(shí)必須每天標(biāo)定一次準(zhǔn)確濃度。（4）鄰啡羅啉（鄰啡羅啉又稱啡羅啉或二氮雜啡，分子式為C12H8N2·H2O，E0為1.14V）指示劑：稱取鄰啡羅啉指示劑1.49g溶于含有0.7gFe2SO4·7H2O或1.0g(NH4)2FeSO4·6H2O的100ml水溶液中，此時(shí)試劑與Fe2SO4形成紅棕色絡(luò)合物，即Fe(C12H8N2)。指示劑易變質(zhì)，應(yīng)密閉

22、保存于棕色瓶中。（5）濃H2SO4，比重1.84，化學(xué)純。 （6）粗磷酸（磷酸浴用） 四、操作步驟 在分析天平上，準(zhǔn)確稱取通過(guò)100目篩(0.149mm)的風(fēng)干土0.1×××0.5×××克（根據(jù)土壤中所含有機(jī)質(zhì)的多少而定。一般在含有機(jī)質(zhì)在715時(shí)，可稱取0.1克；24時(shí)，可稱取0.3克；少于2時(shí)，可稱0.5克）各兩份，放入一干的已編號(hào)的硬質(zhì)玻璃試管中，用移液管（或滴定管）準(zhǔn)確加入0.4NK2Cr2O7 H2SO4溶液10.00ml（在加入23ml時(shí)，搖動(dòng)試管，使土壤分散），在試管口加一小漏斗，以冷凝水蒸氣。將試管放入加熱至185190

23、的磷酸浴中消煮（也可采用石蠟浴或其他油?。藭r(shí)溫度下降至170180，以后注意調(diào)節(jié)熱源，使油浴保持在170180，待試管內(nèi)溶液沸騰（或有較大的氣泡發(fā)生）時(shí)，開始計(jì)算時(shí)間，保持沸騰5分鐘，取出試管放入空燒杯中，稍冷后擦去試管外壁磷酸（或油液），冷卻后，將管內(nèi)土壤傾入250ml三角瓶中，用5060ml蒸餾水分幾次洗凈試管內(nèi)部和小漏斗，將洗液全部無(wú)損地倒入三角瓶中，最后留在試管內(nèi)的土樣和石英砂不必轉(zhuǎn)移入三角瓶中，此時(shí)，三角瓶?jī)?nèi)溶液的總體積約為6070ml，以保持混合液中硫酸濃度在23N，然后加入3滴鄰啡羅啉指示劑，用0.2N硫酸亞鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至由橙黃色到蘭綠色直至出現(xiàn)磚紅色即為終點(diǎn)。 測(cè)樣品的同

24、時(shí)，用石英砂或灼燒過(guò)的土壤，代替樣品作空白實(shí)驗(yàn)。五、結(jié)果計(jì)算 式中 V0空白測(cè)定時(shí)所消耗Fe2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(ml)； V 土壤樣品測(cè)定時(shí)所消耗Fe2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(ml)； N Fe2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度； 0.003C的毫克當(dāng)量(g)； 1.724由有機(jī)C換算成有機(jī)質(zhì)的系數(shù)(按土壤有機(jī)質(zhì)平均含C58計(jì))； 1.1氧化校正系數(shù)(按平均回收率90.0計(jì)算)； W烘干土樣重(g)。 思 考 題 1.重鉻酸鉀容量法測(cè)定土壤有機(jī)質(zhì)的原理是什么？ 2.在計(jì)算土壤有機(jī)質(zhì)百分率時(shí)，為什么有時(shí)乘1.1？有時(shí)又是1.04的氧化校正系數(shù)呢？ 3.為何有的稱土壤活性有機(jī)質(zhì)？ 4.用二苯胺作指示劑時(shí)

25、，應(yīng)注意哪些問(wèn)題？為什么？實(shí)驗(yàn)六 土壤水解氮的測(cè)定（堿解擴(kuò)散法） 一、方法原理 用稀堿水解土壤樣品，使土壤中易水解的有機(jī)含氮化合物和土壤中溶有的一起堿解轉(zhuǎn)化為氨氣狀態(tài)，并不斷擴(kuò)散逸出，由硼酸溶液吸收，再用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，然后計(jì)算出水解性氮的含量。在測(cè)定過(guò)程中，堿的種類和濃度，土液比例，水解的溫度和時(shí)間等因素，對(duì)測(cè)定值的高低，都有一定和影響，為了要得到可靠的，相互能比較的結(jié)果，就必須嚴(yán)格按照所規(guī)定的條件進(jìn)行測(cè)定。 二、主要儀器 擴(kuò)散皿；半微量滴定管（5ml）；恒溫箱。 三、主要試劑 （1）1.0NNaOH溶液：稱40gNaOH（三級(jí)）溶于水，冷卻后，稀釋至1000ml； （2）2H3BO3指示劑溶液

26、：同“土壤全氮的測(cè)定”（4）； （3）0.005N或0.01N H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液：參照“土壤全氮的測(cè)定”（5）； （4）堿性甘油：最簡(jiǎn)單的配制法是在甘油中溶解幾小粒固體NaOH即成，粘性較好的堿性甘油可用下法配制：稱40g阿拉伯膠和50ml水在燒杯中，溫?zé)嶂?080攪拌促溶，放冷約1小時(shí)。加入20ml甘油和飽和碳酸鉀水溶液20ml，攪勻，冷卻。離心除去泡沫和不溶物，將清液貯于玻璃瓶中備用。 四、操作步驟稱取1mm風(fēng)干土樣2g（精確至0.001g），均勻地鋪在擴(kuò)散皿外室（見下圖），水平地、輕輕地旋轉(zhuǎn)擴(kuò)散皿，使土樣鋪平。毛玻璃蓋毛玻璃蓋 外內(nèi) 室室外外外室內(nèi)室室 在擴(kuò)散皿的內(nèi)室中，加入2ml 2

27、的含指示劑硼酸溶液，然后，在擴(kuò)散皿的外室邊緣涂上堿性甘油，蓋上毛玻璃，并旋轉(zhuǎn)之，以使毛玻璃與擴(kuò)散皿邊緣完全粘合，然后，再慢慢轉(zhuǎn)開毛玻璃的一邊，使擴(kuò)散皿露出一條狹縫，并迅速加入10ml 1N的氫氧化鈉溶液于擴(kuò)散皿的外室中，立即將毛玻璃旋轉(zhuǎn)蓋嚴(yán)，然后，在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上水平地輕輕地旋轉(zhuǎn)擴(kuò)散皿，使溶液與土壤充分混勻，并用橡皮筋固定，隨后小心地放入40±1的恒溫箱中，24小時(shí)后取出，用微量滴定管以0.005N或0.01N H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定擴(kuò)散皿內(nèi)室硼酸溶液吸收的氨量，并用玻棒不斷拌攪，其終點(diǎn)為紫紅色，同時(shí)作空白實(shí)驗(yàn)。 五、結(jié)果計(jì)算 式中 V0空白滴定時(shí)消耗H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積數(shù)(ml)；

28、V 土壤樣品消耗H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積數(shù)(ml)； N H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度； W 烘干土壤重量(g)； 14每毫克當(dāng)量氮重14mg； 100換算成100g土重； 103改換為ppm的系數(shù)。 思 考 題 1、什么叫水解性氮？如何進(jìn)行水解？一般水解有幾種方法？ 2、測(cè)定水解性氮的意義是什么？ 3、測(cè)定水解性氮能同時(shí)把土壤中的N和NON測(cè)定出來(lái)嗎？實(shí)驗(yàn)七 土壤全氮的測(cè)定（凱 氏 法） 一、方法原理 樣品中的含氮有機(jī)化合物在加速劑的參與下，經(jīng)濃H2SO4消煮分解，有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為氨與H2SO4結(jié)合生成硫酸銨，加入濃堿NaOH使之堿化，將氨蒸留出來(lái)，用硼酸吸收，再用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，求出全氮含量。 二

29、、主要儀器 凱氏瓶（50ml）或150ml消化管和快速消化器； 半微量定氮蒸留器或凱氏定氮快速自動(dòng)蒸留器；半微量滴定管（5ml）。 三、主要試劑 （1）濃H2SO4：比重1.84（三級(jí)）； （2）混合加速劑：（K2SO4：CuSO4：Se100：10：1）以100克K2SO4，10克CuSO4·H2O和1克硒粉，混合磨碎，通過(guò)80目的篩子，貯于棕色瓶中。 （3）40NaOH（約10N）：稱取工業(yè)用固體NaOH 420克，于硬質(zhì)玻璃燒杯中，加400ml蒸餾水溶解并不斷攪拌，以防止燒杯底部固結(jié)，冷卻后倒入細(xì)頸玻璃瓶或塑料瓶中，加塞防止吸收空氣中的CO2，放置幾天，待NaCO3沉淀后吸出清

30、液，以除去CO2的蒸餾水稀釋至1000ml，用橡皮塞或木塞塞緊。 （4）硼酸指示劑溶劑：稱硼酸（三級(jí)）（H3BO3）20克加水900ml，稍稍加熱，冷卻后，加入混合指示劑（0.099克溴甲酚綠和0.066克甲基紅溶于100ml乙醇中）20ml，然后以0.1N NaOH調(diào)節(jié)溶液呈紅紫色（pH約4.85.0），最后加水稀釋至1000ml，混合均勻貯于瓶中，指示劑宜于用前與硼酸混合鮮配。（5）0.02N H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液：量取濃H2SO4（三級(jí)、無(wú)氮、比重1.84）2.83ml加蒸餾水5000ml,然后用標(biāo)準(zhǔn)堿或硼砂（Na2B4O7·10H2O）標(biāo)定之。 四、操作步驟1、準(zhǔn)確稱取通過(guò)10

31、0目孔篩的風(fēng)干土樣0.51g（精確至0.0001g，一般要求樣品中含氮量為2mg左右，如土壤含氮量在0.2以下，應(yīng)稱土樣1g，含氮量在0.20.4時(shí)，應(yīng)稱土樣0.51g；含氮量在0.4以上者，應(yīng)稱土樣0.5g），小心地將土樣放入50ml的凱氏瓶或消化管中，加幾滴蒸餾水濕潤(rùn)土樣（對(duì)于粘質(zhì)土壤樣品，在消化前先加水濕潤(rùn)，能使土粒和有機(jī)質(zhì)分散，能提高氮的測(cè)定效果），再加入1.85g混合加速劑，（每毫升H2SO4加混合加速劑0.37g），濃硫酸5ml，搖勻，并將小漏斗插入凱氏瓶口，將凱氏瓶斜置于6001000瓦的電爐上加熱至溶液微沸，并繼續(xù)加熱至溶液呈清徹的淡藍(lán)色，然后再繼續(xù)消煮3060分鐘，總共消煮約

32、需時(shí)間11.5小時(shí)。消煮時(shí)H2SO4在瓶?jī)?nèi)回流程度以高達(dá)凱氏瓶1/3為好，否則，以示溫度過(guò)高或過(guò)低，消煮好后，取下凱氏瓶，稍冷，以20ml水溶解，轉(zhuǎn)移入50ml容量瓶中，并以少量蒸餾水沖洗凱氏瓶35次，一并轉(zhuǎn)入50ml容量瓶中，最后定容并充分搖勻。在土樣消煮的同時(shí)，并作空白實(shí)驗(yàn)，以校正滴定、試劑和其它所引起的誤差。若使用消化管進(jìn)行消煮時(shí)，則應(yīng)將消煮管插入快速消化器中進(jìn)行消煮。 2、吸取消煮定容溶液20.00ml，置于半微量蒸餾瓶中。（另取150ml三角瓶，內(nèi)裝2的混合指示劑的H3BO3溶液5ml，然后將此三角瓶置于冷凝管下端，使冷凝管口離H3BO3液面上23cm）此后，從小漏斗中加入40NaO

33、H溶液10ml，立即關(guān)緊活塞，并使燒瓶的蒸汽通入蒸餾瓶中，蒸餾約需15分鐘左右，以蒸餾液體積和硼酸吸收液體積總達(dá)60ml左右，即可停止蒸餾，取下三角瓶，（若需檢查是否蒸餾完畢，可用表面皿取5滴蒸出液，加納氏試劑一滴，無(wú)黃色生成表示蒸餾完畢，否則繼續(xù)蒸餾，直至無(wú)NH為止）。用氣壓差原理，即倒吸的方法，洗去蒸餾瓶中的廢液，以備再度使用。 3、另取0.02NH2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液移入微量滴定管中，滴定硼酸溶液中吸收的氨，滴定過(guò)程中，顏色的變化是由藍(lán)綠色藍(lán)紫色紫紅色為滴定終點(diǎn)。 五、結(jié)果計(jì)算式中 N硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度； V樣品分析所用去的硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù)； V0空白實(shí)驗(yàn)所用去的硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù)

34、； 0.014每毫克當(dāng)量氮 的重量（克）； W烘干土樣重（g）風(fēng)干土樣重（g）× 思考題 1土壤中的氮有哪些形態(tài)存在？相互關(guān)系如何？ 2加速劑的作用是什么？ 3在土樣消化時(shí)，為什么當(dāng)消煮液都已經(jīng)清徹后，還要繼續(xù)消煮一段時(shí)間。 4蒸餾出氨氣的接收瓶中，假設(shè)土壤樣品為10克，含氮量為0.2，計(jì)算一下3ml 2的硼酸溶液是否夠用？實(shí)驗(yàn)八 有 機(jī) 肥 料 全 氮 的 測(cè) 定H2SO4水揚(yáng)酸消煮法一、方法原理樣品用H2SO4和水揚(yáng)酸一同消煮，堆肥或廄肥中的NON轉(zhuǎn)化為硝基酚，再用Na2S2O3把硝基酚還原為氨基酚，最后經(jīng)H2SO4消煮成為銨鹽。消煮液中的NH用蒸餾法測(cè)定。 二、主要儀器 電爐（

35、8001000W）；半微量定氮蒸餾裝置或凱氏定氮快速自動(dòng)蒸餾器；微量滴定管（5ml）；凱氏瓶（25ml）或150ml消化管和快速消化器。 三、主要試劑 （1）H2SO4水揚(yáng)酸溶液：每升濃H2SO4（三級(jí)）中加入32g水揚(yáng)酸（三級(jí)）； （2）硫代硫酸鈉（Na2S2O3·5H2O）（三級(jí)）； （3）K2SO4CuSO4Se混合加速劑（100:10:1）； （4）2H3BO3指示劑溶液； （5）10N NaOH溶液； （6）0.02N H2SO4標(biāo)準(zhǔn)溶液。 （3）（6）試劑與“土壤全氮測(cè)定”相同。 四、操作步驟 （1）在分析天平是用長(zhǎng)方形稱樣紙稱取鮮樣品2.5克（風(fēng)干樣品0.5-1.0克）

36、，投入250ml凱氏瓶或消化管中，加速劑3.5克，再加水揚(yáng)酸硫酸溶液10ml，小心搖勻，放置20分鐘后，加1.5克硫代硫酸鈉（或少量鋅粉）及10ml蒸餾水，瓶口上放一小漏斗，置于電爐上，先低溫加熱，待泡沫減少后或放置過(guò)夜，再小心搖動(dòng)燒瓶或消化管使內(nèi)容物變?yōu)闊o(wú)色或淺藍(lán)色時(shí)，再繼續(xù)加熱半小時(shí)，待冷卻后以20ml水溶解，將凱氏瓶口上的小漏斗移至100ml容量瓶上，把消煮溶液轉(zhuǎn)入量瓶?jī)?nèi)，用少量水，分次洗凱氏瓶，洗液同樣傾入量瓶?jī)?nèi)，洗至體積約為60ml時(shí)，用水定容。 （2）蒸餾：量取10ml 2硼酸指示劑溶液于100ml三角瓶中，把三角瓶放在冷凝管下端，排氣管口需離液面約35cm，吸取待測(cè)液20.00m

37、l于蒸餾瓶?jī)?nèi)，加10N（或40）NaOH 10ml，進(jìn)行蒸餾，蒸餾約15分鐘左右蒸出液體積達(dá)40ml，即可停止蒸餾，取下三角瓶，另應(yīng)用氣壓差原理，用倒吸的方法，洗去蒸餾瓶中廢液，以備再度使用。 （3）滴定：用0.02N標(biāo)準(zhǔn)H2SO4溶液滴定至吸收瓶的溶液由藍(lán)綠色變?yōu)樽霞t色即為終點(diǎn)，記下標(biāo)準(zhǔn)H2SO4用量。 （4）同時(shí)作空白實(shí)驗(yàn)。 五、結(jié)果計(jì)算 V 樣品所用標(biāo)準(zhǔn)H2SO4體積（ml） V?？瞻姿脴?biāo)準(zhǔn)H2SO4體積（ml） 0.014N的克當(dāng)量（） W 樣品重（g） 分取倍數(shù)： =5 思 考 題 1、廄肥全氮的測(cè)定用鮮樣品和干樣品的結(jié)果是否相同？ 2、消煮前如何固定硝態(tài)氮？ 3、消煮液呈無(wú)色或藍(lán)

38、色后為何還要繼續(xù)消煮一段時(shí)間？實(shí)驗(yàn)九 尿素化肥中氮的測(cè)定 （H2SO4消煮甲醛法） 一、方法原理 尿素用濃H2SO4加熱分解，生成（NH4）2SO4 。 （NH2）2COH2SO4H2O （NH4）2SO4 多余的H2SO4用堿中和，溶液中的NH與甲醛反應(yīng)生成六次甲基四胺和等當(dāng)量的酸。 4NH46HCHO（CH2）6N44H+6H2O 反應(yīng)生成的酸，用標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液滴定，間接計(jì)算樣品中N的含量。 二、主要試劑 （1）濃H2SO4（二級(jí)）； （2）0.1N NaOH溶液； （3）0.5N NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液：溶解10g化學(xué)純NaOH于500ml蒸餾水中，搖勻，貯于塑料瓶中，靜置，如有沉淀則過(guò)濾后

39、用鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)定。 （4）1酚酞指示劑；1克酚酞溶于100ml 95的酒精中； （5）0.2甲基紅指示劑；0.2克甲基紅溶于100ml 95的酒精； （6）5N NaOH；200g NaOH溶于水中，然后稀釋至1升； （7）18中性甲醛溶液；加等量的蒸餾水于3637的甲醛（二級(jí)，甲醇含量不大于1）溶液中，用0.05N NaOH溶液滴至酚酞指示劑呈微紅色。 三、操作步驟稱取試樣0.5×××克，放在250ml三角瓶中，用少量水洗下粘在三角瓶口上的細(xì)粒后，加濃H2SO4 3ml搖勻，瓶口上插一短頸小漏斗，在通風(fēng)柜內(nèi)，于電爐上（放石棉網(wǎng)）慢慢加熱至無(wú)劇烈的CO2氣泡逸

40、出，加熱煮沸，用30ml水沖洗漏斗和瓶壁，再加甲基紅指示劑2滴，用5N NaOH溶液中和剩余的酸，等中和至接近中點(diǎn)時(shí)，改用0.1N NaOH中和，直到溶液為金黃色。然后加入中性甲酸溶液15ml，水20ml和酚酞指示劑34滴，搖勻，放置5分鐘后，用0.5N NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液最后為淡紅色，經(jīng)3分鐘不消失為終點(diǎn)。記下所用0.5N NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù)。 四、結(jié)果計(jì)算 尿素 N NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液當(dāng)量濃度 V NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（ml） 0.014N的毫克當(dāng)量（g） W 試樣重量（g） 思 考 題 1、此法所測(cè)的N，是否全為尿素中的N？ 2、甲醛法測(cè)NH，待測(cè)液中為什么應(yīng)是中性？用什么

41、指示劑來(lái)中和試液中的酸或堿？ 3、甲醛放置過(guò)久為什么呈酸性？中和時(shí)用什么作指示劑？ 4、甲醛法測(cè)NH應(yīng)選用什么指示劑？ 5、甲醛用量為什么要高出理論值幾倍？滴定前為何要稀釋？實(shí)驗(yàn)十 土 壤 全 磷 的 測(cè) 定（酸溶鉬銻抗比色法） 一、方法原理 土壤中的含磷礦物及有機(jī)磷化合物，在高溫下與高沸點(diǎn)的H2SO4和強(qiáng)氧化劑HClO4作用，使之轉(zhuǎn)化為正磷酸鹽而進(jìn)入溶液，其中的磷加入鉬銻抗試劑，在適宜的酸度下，還原為鉬蘭，顏色的深淺在一定含磷范圍內(nèi)符合比爾定律。 二、主要儀器 凱氏瓶；可控溫電爐（8001000W）；分光光度計(jì)。 三、主要試劑 （1）濃H2SO4（二級(jí)）； （2）HClO4（二級(jí)7072）；

42、 （3）4N NaOH溶液：溶解16克NaOH于100ml水中； （4）2N H2SO4溶液：取6ml濃H2SO4，徐徐加入80ml水中，邊加邊攪拌，冷卻后加水至100ml； （5）2.6二硝基酚或2.4二硝基酚指示劑溶解：溶解0.25克二硝基酚于100ml水中，此試劑的變色點(diǎn)約為pH3酸性時(shí)無(wú)色，堿性時(shí)呈黃色； （6）鉬銻抗試劑：稱取酒石酸氧銻鉀K（SbO）C4H4O60.5克，溶于100ml水中，制成0.5的溶液； 另稱取鉬酸銨（NH4）6Mo7O244H2O10克，溶于450ml水中，徐徐加入150ml濃H2SO4邊加邊攪拌，再將0.5的酒石氧銻鉀溶液100 ml加入到鉬酸銨溶液中，最后

43、加水至1升，充分搖勻，貯于棕色瓶中，此為鉬銻混合液。臨用前（當(dāng)天）稱取1.5克左旋抗壞血酸（即維生素C，三級(jí)）溶于100ml鉬銻混合液中，混勻，此即鉬銻抗試劑，有效期24小時(shí)，如藏于冰箱中則有效期較長(zhǎng)。此試劑中的H2SO4為5.5N，鉬酸銨為1，酒石酸氧銻鉀為0.05，抗壞血酸為1.5。 （7）磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.4390克KH2PO4（二級(jí)，105烘2小時(shí)）溶于200ml水中，加入5ml濃H2SO4，轉(zhuǎn)入1升量瓶中，用水定溶。此為100PPm P標(biāo)準(zhǔn)溶液，可較長(zhǎng)時(shí)期保存，取此溶液準(zhǔn)確稀釋20倍，即為5PPm P標(biāo)準(zhǔn)溶液，此溶液不宜久存。 四、操作步驟 （1）樣品的分解 準(zhǔn)確稱取通過(guò)100目篩的風(fēng)

44、干土樣0.51克（精確到0.0001克），置于50ml凱氏瓶中，以幾滴蒸餾水濕潤(rùn)后，加濃硫酸3ml，搖勻后，再加7072HClO410滴，搖勻，瓶口插一小漏斗，置于電爐上加熱消煮至溶液開始轉(zhuǎn)為乳白色，再繼續(xù)消煮20分鐘，全部消煮時(shí)間約為3040分鐘。同時(shí)，作空白試驗(yàn)（除不加樣品外，其它各步相同）。 將冷卻后的消煮液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中（容量瓶中事先盛水約3040ml），用蒸餾水沖洗，洗液一并轉(zhuǎn)入容量瓶中，直至沖冼干凈后，冷卻定容，然后用干的無(wú)磷濾紙和干器皿過(guò)濾，將濾液收集在100ml三角瓶中待用。 （2）測(cè)定 吸取濾液5ml注入到100ml容量瓶中，加水至30ml左右，再加二硝基酚指示劑1滴

45、，搖勻，滴加4N NaOH溶液，直至溶液轉(zhuǎn)為黃色剛剛退去，調(diào)好酸度后，然后再 加鉬銻抗試劑5.00ml顯色，并用蒸餾水定容，搖勻，在室溫高于15條件下放置30分鐘后，用660nm或700nm波長(zhǎng)進(jìn)行比色，以空白溶液的透光率為100（即吸收值為0），調(diào)零，讀出測(cè)定液的吸收值（A）。 （3）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 吸取含磷（P）5PPm的標(biāo)準(zhǔn)溶液0，1，2，3，4，6ml，分別加入到50ml容量瓶中，加水約至30ml，再加空白試驗(yàn)定容后的消煮液5.00ml，接上測(cè)定步驟調(diào)節(jié)酸度，使溶液pH=3左右，然后加鉬銻抗試劑5.00ml，用水定容，30分鐘后，進(jìn)行比色，此時(shí)比色溶液磷（P）的濃度分別為0，0.1，0

46、.2，0.3，0.4，0.6PPm以吸收值為縱座標(biāo)，濃度PPm為橫座標(biāo)，在方格紙上作圖。 五、結(jié)果計(jì)算 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得持測(cè)液磷（P）含量后，可按下式進(jìn)行計(jì)算： 土壤全磷（P）比色液含磷（P）量PPm10-4 V 樣品制備溶液的總毫升數(shù) V1吸取濾液的毫升數(shù) V2 顯色的體積（ml）W 烘干土樣重（克）風(fēng)干土樣重（克）× 10-4將PPm數(shù)換算成百分?jǐn)?shù)的乘數(shù) P2 O5P×2.291 2.291將P換算成P2O5的乘數(shù)，即換算因素。 思 考 題 1、試述影響土壤全磷含量的測(cè)定因素 2、在磷的測(cè)定中，如何克服硅的干擾？ 3、在不同比色中測(cè)定磷時(shí)，它的工作范圍，試劑的最終濃度和

47、溶液中的最終酸度各是多少？ 實(shí)驗(yàn)十一 土壤有效磷的測(cè)定（） 0.5M NaHCO3浸提鉬銻抗比色法 一、方法原理 中性土壤中磷主要是以CaP、AlP（磷酸鋁鹽）、FeP（磷酸鐵鹽）的形態(tài)存在，石灰性土壤中主要以CaP（磷酸鈣鹽）的形態(tài)存在。0.5M NaHCO3可以抑制Ca2+的活性，使某些活性較大的CaP浸提出來(lái)；同時(shí)也可使比較活性的FeP和AlP起水解作用而浸出。浸出液中的磷用鉬銻抗比色法測(cè)定。 二、主要儀器 復(fù)式振蕩機(jī)；分光光度計(jì)或光電比色計(jì)。 三、主要試劑 0.5M NaHCO3（pH8.5）浸提劑：42.0g NaHCO3（三級(jí)）溶于800ml水中，稀釋至990ml，用0.5N Na

48、OH溶液調(diào)節(jié)pH至8.5（用pH計(jì)測(cè)定），最后稀釋至1升，保存于塑料瓶中，如超過(guò)一個(gè)月，使用前應(yīng)重新校正pH值。 無(wú)磷活性碳粉：先檢驗(yàn)是否有磷存在，如含磷較多，將活性碳粉先用2N HCl浸泡過(guò)夜，然后在平布漏斗上抽氣過(guò)濾。用蒸餾水沖洗多次后，再用0.5M NaHCO3溶液浸泡過(guò)夜，在平布漏斗上抽氣過(guò)濾，用蒸餾水洗盡NaHCO3，最后檢查到無(wú)磷為止，烘干備用。若含磷較少，可直接用NaHCO3處理。 其余試劑同全磷測(cè)定試劑。 四、操作步驟 稱取通過(guò)1mm篩孔的風(fēng)干土壤樣品2.50克，置于50毫升塑料離心管中，加入一小匙無(wú)磷活性碳粉和0.5M NaHCO3浸提劑50.00ml，蓋好蓋子，在2025條

49、件下振蕩30分鐘（振蕩機(jī)速率每分鐘150180次），取出用干燥漏斗和干的無(wú)磷濾紙過(guò)濾于三角瓶中，同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。 準(zhǔn)確吸取浸出液1020ml（含525微克P）于50ml量瓶中，加二硝基酚指示劑2滴，用6N H2SO4和2N NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至溶液剛呈微黃色（小心慢加，邊加邊搖，防止產(chǎn)生的CO2使溶液噴出瓶口），等CO2充分放出后，用鉬銻抗比色法測(cè)定同“土壤全磷的測(cè)定”中“操作步驟”、。 五、結(jié)果計(jì)算 式中： 顯色液（P）PPm從工作曲線上查得顯色液的P PPm數(shù) 顯色液體積50ml 分取倍數(shù)浸出液總體積50ml/吸取ml W 烘干土樣重（g） （） 0.5M NaHCO3浸提鉬銻抗比色

50、法 一、方法原理 中性土壤中磷主要是以CaP、AlP（磷酸鋁鹽）、FeP（磷酸鐵鹽）的形態(tài)存在，石灰性土壤中主要以CaP（磷酸鈣鹽）的形態(tài)存在。0.5M NaHCO3可以抑制Ca2+的活性，使某些活性較大的CaP浸提出來(lái)；同時(shí)也可使比較活性的FeP和AlP起水解作用而浸出。浸出液中的磷用鉬銻抗比色法測(cè)定。 二、主要儀器 復(fù)式振蕩機(jī)；分光光度計(jì)或光電比色計(jì)。 三、主要試劑 0.5M NaHCO3（pH8.5）浸提劑：42.0g NaHCO3（三級(jí)）溶于800ml水中，稀釋至990ml，用0.5N NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至8.5（用pH計(jì)測(cè)定），最后稀釋至1升，保存于塑料瓶中，如超過(guò)一個(gè)月，使用前應(yīng)

51、重新校正pH。 無(wú)磷活性碳粉：先檢驗(yàn)是否有磷存在，如含磷較多，將活性碳粉先用2N HCl浸泡過(guò)夜，然后在平布漏斗上抽氣過(guò)濾。用蒸餾水沖洗多次后，再用0.5M NaHCO3溶液浸泡過(guò)夜，在平布漏斗上抽氣過(guò)濾，用蒸餾水洗盡NaHCO3，最后檢查到無(wú)磷為止，烘干備用。若含磷較少，可直接用NaHCO3處理。 7.5N硫酸鉬銻貯存液：取蒸餾水約400ml，緩緩加入二級(jí)純濃硫酸208.3毫升，邊加邊攪拌，放置冷卻。 另稱取二級(jí)純鉬酸銨20克溶于200ml熱蒸餾水中，放置冷卻。 然后將上述硫酸稀溶液緩緩倒入鉬酸銨溶液中，并不斷攪拌，最后加入100毫升0.5的酒石酸銻鉀溶液，用蒸餾水稀釋至1升，搖勻，貯存于試

52、劑瓶中待用。 鉬銻抗混合顯色劑：臨用前（當(dāng)天），稱取1.5克左旋的抗壞血酸溶于100ml 7.5N硫酸鉬銻貯存液中，攪拌均勻后，貯于棕色瓶中，此試劑有效期為24小時(shí)，如貯藏于冰箱中則有效期可增加。 磷標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：吸取濃度為5PPm磷的標(biāo)準(zhǔn)貯存液0，1，3，4，6ml，分別溶于50ml量瓶中，然后每瓶加入空白浸提液10ml，鉬銻抗混合顯色劑5ml，同待測(cè)液一并顯色，則每瓶磷的濃度分別為0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.6PPm，以吸取值為縱座標(biāo)，濃度PPm為橫座標(biāo)，在方格紙上繪制曲線。 四、操作步驟稱取通過(guò)1nm篩孔的風(fēng)干土樣2.50克，置于50ml塑料離心管中，加入一小匙無(wú)磷活性碳和0.5M NaHC