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文檔簡(jiǎn)介

1、2009動(dòng)物生物化學(xué)試題、簡(jiǎn)單題(1) 以下試劑或技術(shù)常見(jiàn)于蛋白質(zhì)研究,請(qǐng)簡(jiǎn)要說(shuō)明其用途。1. Trypsin2. 6mol/HCl3. MALDI-TOF4. ?-Mercaptoethanol:?-巰基乙醇,可作為保護(hù)劑加入到蛋白質(zhì)的抽提液中,可防止或延緩疏基氧化作用發(fā)生。另外,在SDS-PAG鹿泳中,加入疏基乙醇進(jìn)行熱變性可以使蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵還原.5. Coomassieblue:種染料,(2) 解釋以下酶學(xué)動(dòng)力學(xué)的概念6. Kcat:催化常數(shù),在單底物反應(yīng)中,且反應(yīng)過(guò)程只產(chǎn)生一個(gè)活性中間產(chǎn)物時(shí),單位時(shí)間內(nèi)每個(gè)酶分子或每一活性部位催化的反應(yīng)次數(shù)。7. Km:米氏常數(shù),物理含義是指E

2、S復(fù)合物消失速度與形成速度之比,其數(shù)值為酶促反應(yīng)達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度,即當(dāng)V=1/2Vmax時(shí),【S】=Km8. Vo:酶促反應(yīng)初速度,指在反應(yīng)初始階段,底物濃度基本維持不變時(shí)的反應(yīng)速度。9. Ki:10. OptimumpH:最適pH(3) 以下試劑或技術(shù)常見(jiàn)于核酸和基因分析,請(qǐng)簡(jiǎn)要說(shuō)明其用途11. DNAchips:DNA芯片12. Northernblotting:RNA雜交13. Restrictionendonuclease:限制性內(nèi)切酶,一類能識(shí)別雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列,限于切割其序列之間的鍵的核酸內(nèi)切酶。14. EB:澳化乙咤15. GMSA、問(wèn)答題1 .研究

3、人員觀察到,肌肉中70kD的原肌球蛋白(Tropomyosin)的離心沉降速度反而比65kD的血紅蛋白(Hemoglobin)慢,它們的沉降系數(shù)分別是2.6s和4.31s。請(qǐng)給出你對(duì)此現(xiàn)象的解釋。沉降系數(shù):?jiǎn)挝浑x心力的作用下顆粒沉降的速度,以Svedberg表示,簡(jiǎn)稱S,單位為秒(s),1S單位等于1x10-13s。沉降速度基本上由分子大小和形狀決定。血紅蛋白分子是由四個(gè)亞基構(gòu)成四聚體,2 .你不會(huì)不知道Meselson和Stahl關(guān)于DNA半保留復(fù)制的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)吧?如果復(fù)制時(shí)全保留的,那么實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)是怎樣呢?(圖)實(shí)驗(yàn):大腸桿菌在以15NH4Cl為唯一氮源的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),經(jīng)過(guò)連續(xù)培養(yǎng)使所有DN

4、A分子上都標(biāo)記15N。15N-DNA比普通的14N-DNA的密度大,在氯化葩密度梯度離心時(shí),這兩種DNA分子將形成位置不同的區(qū)帶。如果將15N標(biāo)記的大腸桿菌轉(zhuǎn)移到普通培養(yǎng)基(14N的氮源)培養(yǎng),經(jīng)過(guò)一代后,所有DNA的密度介于15N-DNA,14N-DNA之間,形成了一半含14N,一半含15N雜合子。兩代后,14N和14N-15N雜合分子等量出現(xiàn)。在繼續(xù)培養(yǎng)可以看到14N-DNA分子增多,證明了DNA分子復(fù)制時(shí)原來(lái)的DNA分子均可被分成兩個(gè)單位,分別構(gòu)成子代分子的一半,從而證明了半保留復(fù)制。若是全保留復(fù)制的,15N標(biāo)記的大腸桿菌轉(zhuǎn)移到普通培養(yǎng)基經(jīng)一代培養(yǎng)后,子代均為14N-DNA。3. 簡(jiǎn)述信

5、號(hào)肽與信號(hào)肽學(xué)說(shuō)4. 依賴cAMP的蛋白激酶介導(dǎo)了大多數(shù)由cAMP產(chǎn)生的生理效應(yīng),不僅有瞬時(shí)的信號(hào)傳遞,如腎上腺素引導(dǎo)肌糖原快速分解(幾秒鐘),還有較長(zhǎng)時(shí)間的傳遞(數(shù)小時(shí)),如引起促生長(zhǎng)素抑制素(somatostatin)基因的表達(dá)就是其中之一。請(qǐng)簡(jiǎn)要描述后一種情況可能的生化機(jī)制。(圖解)PKA:依賴cAMP蛋白激酶,由兩類不同亞基構(gòu)成的四聚體,R2c2,R為調(diào)節(jié)亞基,C為催化亞基,全酶沒(méi)有活性,只有cAMP結(jié)合至R亞基時(shí),導(dǎo)致R與C解離,才形成有蛋白激酶活性的c亞基。cAMP由ATP在腺甘酸環(huán)化酶(AC)作用下轉(zhuǎn)變生成,并可被磷酸二酯酶(PDE)分解成5-AMP失活。AC由五部分組成,興奮性

6、激素受體(Rs)、抑制性激素受體(Ri)、催化亞單位(C),Gs(鳥(niǎo)甘酸調(diào)節(jié)蛋白)蛋白、Gi蛋白。G蛋白起核心作用,活化受體通過(guò)G蛋白偶聯(lián)到AC,由G引起AC的興奮或抑制,從而決定cAMP的濃度的升降以制約細(xì)胞內(nèi)各種生理效應(yīng)。G蛋白由a、?、丫三亞基組成的多聚體,a是功能亞基,有GTP或,GDP的結(jié)合位點(diǎn)及受體結(jié)合位點(diǎn)并有潛在的GTP酶活性。在激活前以三聚體中的。亞基與GDP結(jié)合的方式存在,無(wú)活性。一旦配體與相應(yīng)受體結(jié)合后GDP就解離,G蛋白構(gòu)型改變,GTP結(jié)合形成a?yGTP,然后再鎂離子參與下,。亞基被激活,G蛋白阿迷分解成有活性的。-GTP和?丫二聚體,游離的a-GTP和?丫二聚體參與調(diào)

7、節(jié)相應(yīng)的效應(yīng)酶或離子通道。隨后a亞基發(fā)揮GTP酶作用,是與之偶聯(lián)的GTP水解成GDP,重新形成與?丫二聚體高親和力的a-GDP復(fù)合物,重聚形成三聚體失活。興奮性激素與Rs結(jié)合,形成復(fù)合物后引起Gs蛋白a亞基構(gòu)象改變,GTP結(jié)合到a亞基引起a亞基與?丫二聚體解離。然后GsgGTP與無(wú)活性的C單位結(jié)合,使之活化,催化ATP生成cAMP。同理抑制性激素與Ri結(jié)合,形成復(fù)合物后引起Gi蛋白a亞基構(gòu)象改變,GTP結(jié)合至Ua亞基引起a亞基與?丫二聚體解離。然后GisGTP與無(wú)活性的C單位結(jié)合,使之活化,催化ATP生成cAMP。5. 以原核生物為例,請(qǐng)列舉有哪些蛋白因子參與了蛋白質(zhì)的生物合成過(guò)程(翻譯),它

8、們有什么功能和共性(原核生物翻譯過(guò)程圖解,核糖體結(jié)構(gòu)圖解)三種起始因子IF1,IF2,IF3參與起始復(fù)合物與70s核糖體的形成。IF3促進(jìn)70s亞基的解離,并與30s亞基結(jié)合,結(jié)合有IF3的30s亞基與mRNA結(jié)合,正好是30s亞基的p位對(duì)準(zhǔn)起始密碼子AUG是起始tRNA進(jìn)入p位。IF2結(jié)合起始tRNA,然后再與30s亞基結(jié)合,使起始tRNA進(jìn)入30s亞基p位,同時(shí)結(jié)合GTP,50s亞基結(jié)合,GTP水解,釋放能量改變30s和50s亞基的構(gòu)象,促進(jìn)70s核糖體形成,同時(shí)釋放IF1和IF2,這時(shí)A,P位都處于正確構(gòu)象,A位空著準(zhǔn)備肽鏈延伸。延伸需要延伸因子EF-Tu和EF-T吸GTP參與。EF-T

9、u首先與GTP結(jié)合,再與氨基酰-tRNA形成三元復(fù)合物,進(jìn)入A位,進(jìn)入后GTP水解成GDP,EF-Tu.GDPT元復(fù)合物解離下來(lái)。此時(shí)的EF-Tu不能直接與GTP或氨基酰-tRNA結(jié)合,而是EF-TsW換下GDP再形成EF-Tu.GT網(wǎng)而引入下一個(gè)氨基酰-tRNA。然后轉(zhuǎn)肽酶將p位上的甲酰蛋氨?;D(zhuǎn)移到A位形成肽鍵。肽鍵形成后,EF-G和GTP結(jié)合上來(lái),EF-G具有GTP酶活T將GTP水解,在A位形成的肽基-tRNA轉(zhuǎn)移到P位,同時(shí)將P位上的空載體tRNA逐出核糖體,mRNA向前移動(dòng)一個(gè)密碼子。終止需釋放因子促成終止作用,RF1識(shí)別UAA,UAG,RF2識(shí)別UGA,UAA.RF3能刺激RF1和

10、RF2的活性,發(fā)揮終止作用。釋放因子均作用于A位,且需P位被肽基-tRNA所占據(jù)。沒(méi)有tRNA能識(shí)別終止密碼子。6. 對(duì)于“脂類能否在動(dòng)物機(jī)體中轉(zhuǎn)變成葡萄糖”這個(gè)問(wèn)題,答案不是簡(jiǎn)單的是與否,為什么?2008年動(dòng)物生物化學(xué)試題、名詞解釋1. Intein2. Apolipoprotein3. Telomere:端粒(端粒酶,Telomerase:一種核糖核蛋白酶,是一種特殊的DNA聚合酶,屬于一種反轉(zhuǎn)錄酶,是由RNA和蛋白質(zhì)組份構(gòu)成,以脫氧核糖核甘酸為產(chǎn)物,以酶分子中的RNA亞單位中的一段序列為模板,延伸染色體3端,解決通常DNA復(fù)制時(shí)引起的末端隱縮。)4. SDSequence:SD序列,mR

11、NA起初密碼子AUG上游方向4-13個(gè)核甘酸之前有一段富含喋吟的序列,其一致序列為AGGAGG稱SD序歹U,能夠與16SrRNA3端的富含嘧啶的序列相結(jié)合。不同基因的SD序列不完全相同,從而控制單位時(shí)間內(nèi)起始復(fù)合物形成的數(shù)目,最終控制翻譯產(chǎn)物的數(shù)量。5. G-protein:鳥(niǎo)喋吟核甘酸(GTP)結(jié)合蛋白,以前稱鳥(niǎo)甘酸調(diào)節(jié)蛋白,G蛋白根據(jù)種類不同結(jié)構(gòu)稍有不同,都是有a、?和丫三個(gè)亞基組成的多聚體,。亞基時(shí)功能亞基,不同的。亞基構(gòu)成了不同的G蛋白,其上有GTP或GDP結(jié)合位點(diǎn)及受體結(jié)合位點(diǎn),并有潛在的GTP酶活性、問(wèn)答題1.除了氧分子本身,還有哪些化學(xué)因子對(duì)血紅蛋白的氧結(jié)合能力發(fā)生影響?怎樣影響

12、血紅蛋白與氧的結(jié)合受許多因素的影響,尤其是組織和紅細(xì)胞重大H+,CO2,BPG等,并具有一定的生理意義。增加的CO2壓力或H+濃度都能降低血紅蛋白對(duì)氧的親和力,使血紅蛋白的氧合曲線右移,促進(jìn)氧的釋放,而高濃度的氧可促使血紅蛋白分子釋放H+和CO2這種現(xiàn)象稱波爾效應(yīng)。生理效應(yīng):當(dāng)血液流經(jīng)組織時(shí),組織中較高的H+和CQ濃度有利于血紅蛋白釋放更多的氧,并結(jié)合起到緩沖血液pH和CO2運(yùn)輸?shù)碾p重作用。當(dāng)血液流經(jīng)肺部時(shí),由于氧分壓增高,促進(jìn)H+和CO2釋放并有利于血紅蛋白與氧結(jié)合。BPG由于在血紅蛋白分子中形成鹽鍵,是血紅蛋白分子構(gòu)象穩(wěn)定,與氧的親和力下降,氧合曲線右移。BPG是紅細(xì)胞中大量存在的糖代謝的

13、中間產(chǎn)物,它能與血紅蛋白形成Hb-BPG復(fù)合物。當(dāng)氧與血紅蛋白結(jié)合時(shí),BPG即被排出。在肺部由于氧分壓較高,BPG的存在不會(huì)對(duì)血紅蛋白結(jié)合氧的飽和度產(chǎn)生顯著的影響,在組織中氧分壓較低,紅細(xì)胞中的BPG則有助于氧從血紅蛋白中釋放出來(lái)。2. 基于RNA新功能,認(rèn)為也將它看作反式作用因子。你認(rèn)為與蛋白質(zhì)反式作用因子有何不同?3. 某個(gè)酶符合米氏動(dòng)力學(xué)。在反應(yīng)體系中加入抑制劑后,最大反應(yīng)速度下降了75%,而Km沒(méi)有改變。問(wèn):這是何種形式的抑制作用?抑制抑制劑濃度為2.0x10-4mol/L,求Ki。這是非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用。速度方程V=VmaxS/(1+I/Ki)(Km+S),沒(méi)加抑制劑的速度方程V=Vm

14、axS/Km+S在非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑存在條件下,相對(duì)活性a=Vi/Vo。抑制強(qiáng)度:i=1-a=1-1/1+I/Ki=75%,得Ki=6.6X10-5mol/L4. 某種類固醇激素提升了細(xì)胞cAMP水平,請(qǐng)推測(cè)其可能的作用機(jī)制。三、論述題1. 回憶你所學(xué)過(guò)的生物化學(xué)知識(shí),請(qǐng)歸納“核苷酸”的生物學(xué)作用。2. 你如何理解“Fatsburnintheflameofcarbohydrates”這句話的生物化學(xué)含義尤指動(dòng)物體內(nèi)3. “組學(xué)”在現(xiàn)代生物學(xué)、農(nóng)業(yè)和醫(yī)學(xué)研究中正日益顯示出巨大的生命力合應(yīng)用前景。舉三種組學(xué)并介紹它們的研究?jī)?nèi)容?;蚪M學(xué)蛋白組學(xué)糖組學(xué)代謝組學(xué)2007動(dòng)物生物化學(xué)試題、名詞解釋1. 結(jié)構(gòu)

15、域:在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中,一條多肽鏈上常常存在一些緊密的,相對(duì)對(duì)立的區(qū)域稱結(jié)構(gòu)域(Domain)是在二級(jí)結(jié)構(gòu)或超二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上形成的特定的區(qū)域,參與蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的裝配,并與蛋白質(zhì)的許多功能有密切關(guān)系。2. 蛋白質(zhì)的分子締合蛋白質(zhì)分子常常在各層次上結(jié)合,從而成為復(fù)雜的,更具功能的分子結(jié)構(gòu)形式。這種現(xiàn)象為蛋白質(zhì)分子締合(Association)。包括亞基締合,相同分子的締合,不同分子締合,及分子自裝配。3. 酶反應(yīng)的初速度指在反應(yīng)初始階段,底物濃度基本維持不變時(shí)的反應(yīng)速度。4. 生物膜的協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)在一些哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,葡萄糖及中性氨基酸等物質(zhì)的逆濃度梯度轉(zhuǎn)運(yùn),經(jīng)常伴有Na+順濃度梯度轉(zhuǎn)運(yùn)。這種有另一種

16、物質(zhì)伴隨轉(zhuǎn)運(yùn)稱協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)(cotransport),這種轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)不直接以ATP為能源,而以間接方式利用ATP在協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)運(yùn)中,兩種物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)方向相同稱同向協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)(symport),相反稱反向協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)(Antiport)。(Na+-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng):一個(gè)Na+結(jié)合在對(duì)外開(kāi)放的載體蛋白上;Na+結(jié)合大大增加了載體對(duì)所轉(zhuǎn)運(yùn)物質(zhì)的親和力,促進(jìn)了葡萄糖分子的結(jié)合,載體發(fā)生構(gòu)象改變;載體向內(nèi)開(kāi)放;Na化學(xué)梯度進(jìn)入細(xì)胞,進(jìn)入細(xì)胞的Na+被Na+-K+泵泵出,Na+梯度得以維持;失去Na+后,葡萄糖分子釋放進(jìn)入細(xì)胞;失去葡糖糖分子的載體恢復(fù)到原來(lái)的構(gòu)象)5. 干擾RNA、問(wèn)答題1. 現(xiàn)代生物化學(xué)認(rèn)為,蛋白質(zhì)是一個(gè)

17、動(dòng)態(tài)系統(tǒng),構(gòu)象運(yùn)動(dòng)時(shí)蛋白質(zhì)的重要性質(zhì)之一。請(qǐng)解釋什么是蛋白質(zhì)的構(gòu)象運(yùn)動(dòng)。與其功能有什么關(guān)系(結(jié)合實(shí)例說(shuō)明)蛋白質(zhì)分子在執(zhí)行生物功能時(shí),整體分都是處在主動(dòng)的不斷運(yùn)動(dòng)中,這種運(yùn)動(dòng)在10-12s至1s以上的一個(gè)很寬的時(shí)間范圍內(nèi)都存在。蛋白質(zhì)是一個(gè)動(dòng)態(tài)系統(tǒng),除了分子中的原子圍繞它們的平衡位置的波幅很小的熱振動(dòng)外,其構(gòu)象運(yùn)動(dòng)主要包括氨基酸殘基側(cè)鏈,肽鏈片段,結(jié)構(gòu)域或亞基三種水平上的運(yùn)動(dòng),其中最后一種運(yùn)動(dòng)屬于大范圍的,速度較慢的分子構(gòu)象運(yùn)動(dòng)。蛋白質(zhì)發(fā)揮特定的生物學(xué)功能,是由于它具有一個(gè)獨(dú)特的,精巧的空間構(gòu)象,既能保持相對(duì)穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),又能隨不同程度的環(huán)境變化發(fā)生構(gòu)象運(yùn)動(dòng)。結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和可變性是具有生物活性的

18、蛋白質(zhì)分子發(fā)揮功能必要的兩個(gè)方面。例如:血紅蛋白是由四個(gè)亞基構(gòu)成的四聚體,四聚體與氧開(kāi)始結(jié)合時(shí)親和力遠(yuǎn)低與肌紅蛋白,分子中的。亞基對(duì)氧的親和力比?亞基大,能首先與第一個(gè)氧分子結(jié)合,這可導(dǎo)致。亞基構(gòu)象發(fā)生變化,并進(jìn)而是相鄰的?亞基構(gòu)象發(fā)生改變,增加了?亞基對(duì)氧的親和力,呈現(xiàn)S形結(jié)合曲線,而肌紅蛋白僅有一條肽鏈,沒(méi)有其他亞基的影響,與氧的親和力較大,能迅速與氧結(jié)合,在很低的氧分壓下即接近飽和。這種變構(gòu)作用有重要的生理意義:它與氧協(xié)同結(jié)合,與它的氧輸送功能十分適應(yīng)。在肺部氧分壓較高時(shí),血紅蛋白與氧結(jié)合迅速接近飽和,在組織氧分壓較低時(shí),可迅速釋放出近一半的氧,同樣條件下肌紅蛋白僅能釋放10%的結(jié)合氧,

19、因此,血紅蛋白比肌紅蛋白更有效的運(yùn)輸氧氣進(jìn)入組織中。2. 實(shí)驗(yàn)者從動(dòng)物的組織中提取到了某種酶,并且發(fā)現(xiàn):將酶溶液進(jìn)行透析或者將酶溶液加熱都會(huì)使酶的活性降低甚至喪失,試解釋這些現(xiàn)象。加熱由于溫度升高使分子內(nèi)振動(dòng)增強(qiáng),破壞維持空間構(gòu)象的次級(jí)鍵,有時(shí)是蛋白質(zhì)中的二硫鍵斷裂并發(fā)生二硫鍵交換反應(yīng),使得酶的活性中心遭到破壞,使活性降低。透析溶液的pH,離子濃度,等不合適可能導(dǎo)致酶分子變性,引起活性降低甚至喪失。3. 有三種物質(zhì):丙氨酸、乙酸和丙酸。(1)其中哪些能在動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)變成葡萄糖(2)分別說(shuō)明其生理意義(3)寫(xiě)出其中一種物質(zhì)轉(zhuǎn)變成葡萄糖或糖原的大致代謝途徑。丙氨酸,4. 關(guān)于核糖體。(1)圖示核糖體

20、的功能位點(diǎn)。(2)分別說(shuō)明他們的作用(3)你怎樣使試驗(yàn)證明核糖體中的核酸與蛋白因子之間存在的相互作用mRNA結(jié)合位點(diǎn):位于30s亞基頭部,在S1蛋白的彳用下30s亞基與mRNA,S1蛋白可防止mRNA形成鏈內(nèi)堿基對(duì)。此位點(diǎn)同時(shí)也是IF3的結(jié)合位點(diǎn)。P位點(diǎn):大部分位于30s亞基,小部分位于50s亞基,能夠與起始tRNA復(fù)合物結(jié)合。A位點(diǎn):靠近P位點(diǎn),主要位于50s亞基上,轉(zhuǎn)肽酶活性位點(diǎn):位于P位點(diǎn)與A位點(diǎn)的連接處,靠近tRNA的接受臂,與P位上的氨?;螂幕D(zhuǎn)移到A位形成肽鍵。5SrRNA位點(diǎn):在50s亞基上,靠近轉(zhuǎn)肽酶位點(diǎn),可能與tRNA的進(jìn)入有關(guān)EF-Tu位點(diǎn):位于大亞基內(nèi),靠近30s亞基,

21、與氨基酰-tRNA結(jié)合有關(guān)轉(zhuǎn)位因子EF-G結(jié)合位點(diǎn),在大亞基上靠近與小亞基的界面上,與A位上的肽基-tRNA移到P位有關(guān)。5. 可誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子的活性可受到一種或多種方式的調(diào)節(jié)。目前對(duì)類固醇激素受體作為一類重要的可誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子有比較深入的認(rèn)識(shí)。簡(jiǎn)述你所了解的相關(guān)知識(shí)。腎上腺分泌的三十多種類固醇,其中最主要的兩組是糖皮質(zhì)激素和鹽皮質(zhì)激素。糖皮質(zhì)激素與其受體的相互作用有一定的了解:類固醇激素能經(jīng)簡(jiǎn)答擴(kuò)散穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞核,在細(xì)胞內(nèi)與其受體結(jié)合,當(dāng)激素與受體結(jié)合后,受體蛋白質(zhì)便轉(zhuǎn)變成活性形式,對(duì)非牛I異DNA結(jié)合的親和力也提高了10倍,因此激素-受體復(fù)合物總是位于細(xì)胞核內(nèi)。激活的受體識(shí)別其特異共

22、有序列即糖皮質(zhì)激素應(yīng)答元件(GlucocorrticoidresponseelementGRE)。GRE總是位于應(yīng)答糖皮質(zhì)激素的基因附近的增強(qiáng)子內(nèi),當(dāng)類固醇受體復(fù)合物與增強(qiáng)子結(jié)合時(shí),激活附近的啟動(dòng)子,是啟動(dòng)子開(kāi)始轉(zhuǎn)錄。類固醇激素受體有對(duì)立的DNA結(jié)合和激素集合結(jié)構(gòu)域。各種類固醇受體DNA結(jié)合域的中心結(jié)構(gòu)很相近,各種受體的N-末端區(qū)同源性低,該區(qū)含轉(zhuǎn)錄所需的另一些區(qū)域。C-末端與激素結(jié)合。不同激素受體C-末端區(qū)不同,從而決定了不同激素有不同的活性。如果將糖皮質(zhì)激素受體C-末端刪除,保留的蛋白質(zhì)具有組成型活性,即不需要類固醇激素就要活性。這表明,類固醇激素的缺乏,其受體的類固醇結(jié)合域阻止受體識(shí)別G

23、RE從而起內(nèi)在負(fù)調(diào)控物的作用。加入類固醇激素能消除其抑制作用,是受體能與GRE結(jié)合,激活轉(zhuǎn)錄。而雌激素受體的結(jié)構(gòu)域間的關(guān)系與此不同。具有激活活性,不是阻抑活性。每種受體識(shí)別的應(yīng)答元件很保守,這些應(yīng)答元件有明顯的特點(diǎn):每個(gè)共有序列都含有兩個(gè)短的重復(fù)序列,每個(gè)重復(fù)序列也可稱為半位點(diǎn)。各種受體的應(yīng)答元件也可能是反向或者正向重復(fù)序列。受體超家族可分為:糖皮質(zhì)激素受體(GR),鹽皮質(zhì)激素(Mineralcorticoid)受體(MR)雄激素受體(AR),孕酮受體(PR),它們都以相同亞基組成二聚體,所識(shí)別的元件的半位點(diǎn)有共有序列TGTTCT,半位點(diǎn)反向重復(fù)排列,位點(diǎn)間間隔決定其識(shí)別元件的類型。第二類:甲

24、狀腺素受體(T3R),維生素D受體(VDR),視黃酸受體(RARR及9-順-視黃酸受體(RXR)。除RXR外由不同兩個(gè)亞基構(gòu)成二聚體,所識(shí)別的元件的半位點(diǎn)序列是TGACCT半位點(diǎn)是直接重復(fù)排列,識(shí)別特異性由半位點(diǎn)間間隔序列長(zhǎng)度決定,1bp對(duì)應(yīng)RXR,2bp對(duì)應(yīng)VDR,3bp對(duì)應(yīng)T3R,4bp對(duì)應(yīng)RAR。6. 說(shuō)明Ca2+在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)中的作用。2006年試題、名詞解釋1. Lineweaver-Burkplot2. Telomerase:端粒酶3. PrPc4. Ampholyte5. Recognitionhelix:螺旋-轉(zhuǎn)折-螺旋基序,兩段螺旋被一個(gè)?-轉(zhuǎn)角分開(kāi),其中一段為識(shí)別螺旋,

25、直接與暴露在DNA大溝中堿基對(duì)接觸結(jié)合,識(shí)別和結(jié)合的作用力包括氫鍵,離子鍵,范德華力等。識(shí)別螺旋只有幾圈,圈數(shù)有三種情況,1圈螺旋,與DNA大溝垂直,2圈螺旋以廣泛的角度與DNA大溝結(jié)合,3圈螺旋,與DNA大溝平行。其氨基酸殘基可分三類:與DNA堿基接觸的殘基,主要是極性氨基酸;與DNA主鏈磷酸集團(tuán)接觸的殘基,大多為堿性氨基酸;與蛋白質(zhì)其他部分接觸的殘基,多為疏水性氨基酸殘基。、問(wèn)答題1. 結(jié)構(gòu)分析顯示,腺苷酸環(huán)化酶與DNA聚合酶有很高的同源性,從它們的催化反應(yīng)性質(zhì)你能提供進(jìn)一步證據(jù)嗎?AC是一種跨膜糖蛋白,其激活或抑制需要GTP和鎂離子的存在,由五部分組成,Rs,Ri,C,Gs,Gi2. 把

26、正在37條件下培養(yǎng)細(xì)菌轉(zhuǎn)移到25培養(yǎng)。你認(rèn)為細(xì)菌質(zhì)膜中脂肪酸組成將會(huì)發(fā)生怎樣的變化,請(qǐng)予解釋3. 有人向動(dòng)物注射用生長(zhǎng)激素受體的胞外部分制備的抗體,發(fā)現(xiàn)也具有生長(zhǎng)激素是效應(yīng)。為什么?生長(zhǎng)激素受體的胞外部分制備的抗體與動(dòng)物體中的生長(zhǎng)激素能形成抗原抗體復(fù)合物,使機(jī)體中生長(zhǎng)激素水平下降,刺激腦垂體分泌大量的生長(zhǎng)激素。4.下表記錄了某酶的分離純化過(guò)程,請(qǐng)?zhí)顚?xiě)表格中的空格,并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析評(píng)價(jià)純化過(guò)程總蛋白(mg)總活性(單位)比活性(單位/mg)純度得率粗提物200004,000,0002001100硫酸錢(qián)沉淀50003,000,000600DEAE纖維素層析15001,000,000666分子篩層析500750,0001500親和層析45675,

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