生物制品及其應(yīng)用

1、第十章  生物制品及其應(yīng)用§10-1  免疫診斷和免疫防治一、免疫診斷與檢測(cè)（一）免疫血清學(xué)技術(shù)診斷與檢測(cè)1疾病診斷凝集試驗(yàn) 沉淀試驗(yàn) 中和試驗(yàn)2妊娠診斷間接凝集試驗(yàn)或間接凝集抑制試驗(yàn)間接血凝抑制試驗(yàn)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)等3生物活性物質(zhì)的超微定量   對(duì)動(dòng)物、植物和昆蟲(chóng)體內(nèi)微量激素、白細(xì)胞介素（IL）等生物活性物質(zhì)的超微量測(cè)定。4物種鑒定分析物種鑒定和生物分類的依據(jù)用于人和動(dòng)物血型的分類與鑒定。5免疫增強(qiáng)藥物和疫苗研究研究疫苗免疫效力評(píng)價(jià)免疫增強(qiáng)藥物的功效6免疫診斷與高新技術(shù)結(jié)合  （二）變態(tài)反應(yīng)診斷  遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)常用于診斷結(jié)核

2、分支桿菌、鼻疽桿菌、布氏桿菌等細(xì)胞內(nèi)寄生菌的感染。例如，將結(jié)核菌素進(jìn)行皮內(nèi)注射同時(shí)點(diǎn)眼，可以診斷動(dòng)物是否已經(jīng)感染結(jié)核分支桿菌。目前，用結(jié)核菌素進(jìn)行皮內(nèi)注射、點(diǎn)眼診斷是動(dòng)物結(jié)核病的規(guī)范化檢疫方法。（三）細(xì)胞免疫測(cè)定技術(shù)  1E玫瑰花環(huán)試驗(yàn)  2T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。3細(xì)胞毒性T細(xì)胞試驗(yàn)   二、免疫防治獲得性免疫的獲得途徑：                    

3、0;    天然主動(dòng)免疫（自然感染耐過(guò)）              主動(dòng)免疫                         人工主動(dòng)免疫（注射疫苗）獲得性免疫  

4、60;                      天然被動(dòng)免疫（獲得母源抗體）              被動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫（注射免疫血清、卵黃抗體）（一）主動(dòng)免疫動(dòng)物自身在抗原刺激下主動(dòng)產(chǎn)生特異性免疫保護(hù)力的過(guò)程稱為主動(dòng)免疫。1天然主動(dòng)免疫  概

5、念：動(dòng)物在感染某種病原微生物耐過(guò)后產(chǎn)生的對(duì)該病原體再次侵入的抵抗力稱為天然主動(dòng)免疫。自然感染耐過(guò)2人工主動(dòng)免疫  概念：給動(dòng)物接種疫苗，刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生應(yīng)答反應(yīng)，產(chǎn)生的特異性免疫力稱為人工主動(dòng)免疫。接種的物質(zhì)是刺激產(chǎn)生免疫應(yīng)答的各種疫苗制品，包括各種疫苗、類毒素等。特點(diǎn)：有一定的誘導(dǎo)期，出現(xiàn)免疫力的時(shí)間與抗原種類有關(guān)免疫力持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，免疫期可達(dá)數(shù)月甚至數(shù)年，而且有回憶反應(yīng)，某些疫苗免疫后，可產(chǎn)生終生免疫。生產(chǎn)中人工主動(dòng)免疫是預(yù)防和控制傳染病的行之有效的措施之一。（二）被動(dòng)免疫并非動(dòng)物自身產(chǎn)生，而是被動(dòng)接受其他動(dòng)物形成的抗體或免疫活性物質(zhì)而獲得特異性免疫力的過(guò)程稱為被動(dòng)免疫。1天然

6、被動(dòng)免疫  概念：新生動(dòng)物通過(guò)母體胎盤、初乳或卵黃從母體獲得母源抗體從而獲得對(duì)某種病原體的免疫力稱為天然被動(dòng)免疫。動(dòng)物在生長(zhǎng)發(fā)育的早期可通過(guò)獲得母源抗體增強(qiáng)免疫力，以保證早期的生長(zhǎng)發(fā)育。在初乳中的IgG、IgM可抵抗敗血性感染，IgA可抵抗腸道病原體的感染。然而母源抗體可干擾弱毒疫苗對(duì)幼齡動(dòng)物的免疫效果，導(dǎo)致免疫失敗是其不利的一面。2人工被動(dòng)免疫  概念：給機(jī)體注射免疫血清、康復(fù)動(dòng)物血清或高免卵黃抗體而獲得的對(duì)某種病原體的免疫力稱為人工被動(dòng)免疫如抗犬瘟熱病毒血清可防治犬瘟熱，精制的破傷風(fēng)抗毒素可防治破傷風(fēng)，尤其是患病毒性傳染病的珍貴動(dòng)物，用抗血清防治更有意義。特點(diǎn)：注射免疫

7、血清可使抗體立即發(fā)揮作用，無(wú)誘導(dǎo)期，免疫力出現(xiàn)快抗體在體內(nèi)逐漸減少，免疫維持時(shí)間短，根據(jù)半衰期的長(zhǎng)短，一般維持14周。 §10-2  生物制品及其應(yīng)用一、生物制品的概念利用微生物、寄生蟲(chóng)及其組織成分或代謝產(chǎn)物以及動(dòng)物或人的血液與組織液等生物材料為原料，通過(guò)生物學(xué)、生物化學(xué)以及生物工程學(xué)的方法制成的，用于傳染病或其他疾病的預(yù)防、診斷和治療的生物制劑稱為生物制品。狹義的生物制品是指利用微生物及其代謝產(chǎn)物或免疫動(dòng)物而制成的，用于傳染病的預(yù)防、診斷和治療的各種抗原或抗體制劑。主要包括疫苗、免疫血清和診斷液三大類。 二、生物制品的命名原則   

8、 根據(jù)中華人民共和國(guó)獸用新生物制品管理辦法規(guī)定，生物制品命名原則有10條。    1生物制品的命名原則以明確、簡(jiǎn)練、科學(xué)為基礎(chǔ)原則。    2生物制品名稱不采用商品名或代號(hào)。    3生物制品名稱一般采用“動(dòng)物種名+病名+制品名稱”的形式。診斷制劑則在制品種類前加診斷方法名稱。如：牛巴氏桿菌病滅活疫苗、馬傳染性貧血活疫苗、豬支原體肺炎微量間接血凝抗原。特殊的制品命名可參照此方法。病名應(yīng)為國(guó)際公認(rèn)的、普遍的稱呼，譯音漢字采用國(guó)內(nèi)公認(rèn)的習(xí)慣定法。4共患病一般可不列動(dòng)物種名。如：氣腫疽滅活疫苗、狂犬病滅活疫苗。

9、    5由特定細(xì)菌、病毒、立克次氏體、螺旋體、支原體等微生物以及寄生蟲(chóng)制成的主動(dòng)免疫制品，一律稱為疫苗。例如：仔豬副傷寒活疫苗、牛瘟活疫苗、牛環(huán)形泰勒蟲(chóng)疫苗。    6凡將特定細(xì)菌、病毒等微生物及寄生蟲(chóng)毒力致弱或采用異源毒制成的疫苗，稱“活疫苗”；用物理或化學(xué)方法將其滅活后制成的疫苗，稱“滅活疫苗”。    7同一種類而不同毒（菌、蟲(chóng)）株（系）制成的疫苗。可在全稱后加括號(hào)注明毒（菌、蟲(chóng)）株（系）。例如：豬丹毒活疫苗（GC42株）、豬丹毒活疫苗（G4T10株）。    8由兩

10、種以上的病原體制成的一種疫苗，命名采用“動(dòng)物種名+若干病名+x聯(lián)疫苗”的形式。例如：羊黑疫、快疫二聯(lián)滅活疫苗，豬瘟、豬丹毒、豬肺疫三聯(lián)活疫苗。    9由兩種以上血清型制備的一種疫苗，命名采用“動(dòng)物種名+病名+若干型名+x價(jià)疫苗”的形式。例如：口蹄疫O型、A型雙價(jià)活疫苗。10制品的制造方法、劑型、滅活劑、佐劑一般不標(biāo)明。但為區(qū)別已有的制品，可以標(biāo)明。 三、獸醫(yī)臨床常用的生物制品及應(yīng)用（一）疫苗  概念：利用病原微生物、寄生蟲(chóng)及其組分或代謝產(chǎn)物制成的，用于人工主動(dòng)免疫的生物制品稱為疫苗。用于預(yù)防疫病1疫苗的種類  。（1）活疫苗

11、0; 簡(jiǎn)稱活苗強(qiáng)毒苗：現(xiàn)在的生產(chǎn)中應(yīng)嚴(yán)格禁止。弱毒苗：優(yōu)點(diǎn)是能在動(dòng)物體內(nèi)有一定程度的增殖，免疫劑量小，免疫保護(hù)期長(zhǎng)，不需要使用佐劑，應(yīng)用成本低。缺點(diǎn)是弱毒苗有散毒的可能或有一定的組織反應(yīng)，難以制成聯(lián)苗，運(yùn)輸保存條件要求高，現(xiàn)多制成凍干苗。異源苗是用具有共同保護(hù)性抗原的不同種病毒制成的疫苗（2）滅活疫苗  簡(jiǎn)稱死苗。優(yōu)點(diǎn)是研制周期短，使用安全，易于保存和運(yùn)輸，容易制成聯(lián)苗或多價(jià)苗缺點(diǎn)是不能在動(dòng)物體內(nèi)增殖，使用劑量大，免疫保護(hù)期短，通常需加佐劑以增強(qiáng)免疫效果，常需多次免疫且只能注射免疫。（3）代謝產(chǎn)物疫苗  利用細(xì)菌的代謝產(chǎn)物如毒素、酶等制成的疫苗。如：破傷風(fēng)類毒素（4）亞單位

12、疫苗  除去病毒核酸用提純的蛋白質(zhì)衣殼制成的疫苗優(yōu)點(diǎn)：僅含病毒的抗原成分，無(wú)核酸，因而無(wú)不良反應(yīng)，使用安全，效果較好。缺點(diǎn)：制備困難，價(jià)格昂貴。降低成本是推廣的關(guān)鍵。（5）生物技術(shù)疫苗  基因工程亞單位疫苗： 合成肽疫苗：抗獨(dú)特性疫苗： DNA疫苗： 基因工程活疫苗：包括基因缺失苗、重組活載體疫苗及非復(fù)制性疫苗三類。（6）多價(jià)苗和聯(lián)苗  多價(jià)苗是指將細(xì)菌（或病毒）的不同血清型混合制成的疫苗聯(lián)苗是指由兩種以上的細(xì)菌或病毒聯(lián)合制成的疫苗，一次免疫可達(dá)到預(yù)防幾種疾病的目的。如豬瘟豬丹毒豬肺疫三聯(lián)苗，新城疫減蛋綜合癥傳染性法氏囊病三聯(lián)苗，犬的六聯(lián)苗等。 

13、0;  （7）寄生蟲(chóng)疫苗  2疫苗使用的注意事項(xiàng)（1）疫苗的質(zhì)量     （2）疫苗的保存和運(yùn)輸  （3）疫苗的稀釋與及時(shí)使用（4）選擇適當(dāng)?shù)拿庖咄緩?#160; （5）制定合理的免疫程序  。（6）免疫劑量、接種次數(shù)及時(shí)間間隔 （7）疫苗的型別與疫病型別的一致性  （8）藥物的干擾  （9）防止不良反應(yīng)的發(fā)生 （二）免疫血清  概念：動(dòng)物經(jīng)反復(fù)多次注射同一種抗原物質(zhì)（菌苗、疫苗、類毒素等）后，機(jī)體體液中尤其血清中產(chǎn)生大量抗體，由此分離所得的血清稱為免疫血清，又稱高免血清或抗血清。常用

14、于傳染病的緊急預(yù)防和治療，屬人工被動(dòng)免疫。    1免疫血清的分類  根據(jù)制備免疫血清所用抗原物質(zhì)的不同分為：抗菌血清   抗病毒血清    抗毒素根據(jù)制備免疫血清所用動(dòng)物的不同分為：同種血清   異種血清    家禽常用卵黃抗體制劑2免疫血清使用的注意事項(xiàng)  （1）早期使用      （2）多次足量     （3）血清用量      （

15、4）途徑適當(dāng)      （5）防止過(guò)敏  （三）診斷液  概念：利用微生物、寄生蟲(chóng)或其代謝產(chǎn)物，以及含有其特異性抗體的血清制成的，專供傳染病、寄生蟲(chóng)病或其他疾病診斷以及機(jī)體免疫狀態(tài)檢測(cè)用的生物制品，稱為診斷液。種類：診斷抗原：變態(tài)反應(yīng)性抗原   血清學(xué)反應(yīng)抗原診斷抗體（血清）：診斷血清   診斷用特殊抗體 §10-3  常用生物制品的制備及檢驗(yàn)    一、疫苗的制備及檢驗(yàn)（一）菌種、毒種的一般要求1背景資料完整  2生物學(xué)特性典型

16、60; 3遺傳性狀穩(wěn)定 （二）菌種、毒種的鑒定與保存。1菌種、毒種的鑒定  2菌種、毒種的保存  （三）滅活、滅活劑與佐劑1滅活與滅活劑  滅活的方法有兩種：物理法：加熱法是一種常見(jiàn)的物理滅活法，但疫苗生產(chǎn)上主要采用化學(xué)滅活法?；瘜W(xué)法：來(lái)進(jìn)行滅活的試劑稱為滅活劑。如甲醛、苯酚、結(jié)晶紫及烷化劑等2佐劑（1）佐劑的概念 本身無(wú)免疫原性，但與抗原物質(zhì)合用能增強(qiáng)抗原的免疫原性和機(jī)體免疫應(yīng)答，或改變機(jī)體免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)稱為佐劑。（2）佐劑的分類與常用佐劑  佐劑可簡(jiǎn)單地分為兩類貯存型：與抗原混合成懸濁狀態(tài)，使抗原在注射局部存留時(shí)間延長(zhǎng)，通過(guò)抗原的緩慢釋放，持續(xù)刺

17、激機(jī)體免疫系統(tǒng)。如：氫氧化鋁膠  白油-Span非貯存型：不與抗原混合，分別在機(jī)體不同部位同時(shí)注射也可發(fā)揮佐劑作用。如：吐溫-80  蜂膠（四）疫苗的制備1細(xì)菌性滅活苗的制備（圖12-1）：無(wú)菌條件下無(wú)菌操作（1）種子培養(yǎng)  （2）菌液培養(yǎng)  （3）滅活與濃縮  （4）配苗與分裝  2細(xì)菌性活疫苗的制備（1）種子液及菌液培養(yǎng)  （2）濃縮、配苗與凍干  3病毒性組織苗的制備（圖12-2）（1）種毒與接種  （2）收獲與制苗  4病毒性禽胚苗的制備（1）種毒與接毒  （2）收獲與配苗  5病毒性細(xì)胞苗的制備（1）培養(yǎng)液與細(xì)胞  （2）接毒、收獲和配苗 （五）成品檢驗(yàn) 1純度檢驗(yàn)及活菌計(jì)數(shù)（1）純度檢驗(yàn)  即無(wú)菌檢驗(yàn)。（2）活菌計(jì)數(shù)  2安全與效力檢驗(yàn)（1）安全檢驗(yàn)  （2）效力檢驗(yàn)  主要包括免疫原性、免疫產(chǎn)生期與持續(xù)期的檢驗(yàn)可采用活菌計(jì)數(shù)、病毒量滴定或血清學(xué)試驗(yàn)等多種方法但最常用的仍是動(dòng)物保護(hù)試驗(yàn)，即體內(nèi)中和試驗(yàn)。3其他檢驗(yàn)（1）物理性