硬脂酸鎂標準操作規(guī)程

1、XXXX公司當前版本編號STP-MM-02-001-Rev.00. 12替代版本編號規(guī)程名稱硬脂酸鎂操作規(guī)程硬脂酸鎂操作規(guī)程起 草 人日 期20 年 月 日審 核 人日 期20 年 月 日批 準 人日 期20 年 月 日生效日期頒發(fā)部門質量部分發(fā)部門1.目的 建立硬脂酸鎂檢驗標準操作規(guī)程，規(guī)范硬脂酸鎂檢驗操作2.范圍 適用于硬脂酸鎂的檢驗3.依據： 中國藥典2010版二部4.職責4.1 起草：QC 審核：QA 批準人：質量負責人4.2 QC實施本規(guī)程4.3 QA監(jiān)督本規(guī)程的實施5.內容5.1 性狀本品為白色輕松無砂性的細粉；微有特臭；與皮膚接觸有滑膩感。本品在水、乙醇或乙醚中不溶。 5.2 鑒

2、別5.2.1儀器及試液一般實驗儀器和高效液相色譜儀稀硝酸：取硝酸105ml，加水稀釋至1000ml，即得。氨試液：取濃氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得。氯化銨試液：取氯化銨10.5g，加水使溶解成100ml，即得。磷酸氫二鈉試液：取磷酸氫二鈉結晶12g，加水使溶解成100ml，即得。氫氧化鈉試液取氫氧化鈉4.3g，加水使溶解成100ml，即得。碘試液：取用碘滴定液0.05mol/L，取碘13. 0g，加碘化鉀36g與水50ml溶解后，加鹽酸3滴與水適量使成1000ml，搖勻，用垂熔玻璃濾器濾過。5.2.2分析步驟5.2.2.1取本品約5.0g，置圓底燒瓶中，加無過氧化物乙醚50ml

3、、稀硝酸20ml與水20ml，加熱回流至完全溶解，放冷，移至分液漏斗中，振搖，放置分層，將水層移至另一分液漏斗中，用水提取乙醚層2次，每次4ml，合并水層，用無過氧化物乙醚15ml清洗水層，將水層移至50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。5.2.2.1.1取上述溶液，加氨試液，觀察：滴加氯化銨試液，即生成白色沉淀；再加磷酸氫二鈉試液1滴，振搖，即生成白色沉淀；分離，沉淀加氨試液，不溶解。5.2.2.1.2取上述溶液，加氫氧化鈉試液，即生成白色沉淀；沉淀分成兩份，一份加過量的氫氧化鈉試液，沉淀不溶解；另一份中加碘試液，沉淀轉成紅棕色。5.2.2.2在硬脂酸與棕櫚酸相對含量檢查項下

4、記錄的色譜圖中，供試品溶液兩主峰的保留時間應分別與對照品溶液兩主峰的保留時間一致。5.3 檢查：5.3.1酸堿度5.3.1.1儀器及試液一般實驗儀器溴廨香草酚藍指示液：取溴麝香草酚藍0.1g，加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.2ml使溶解，再加水稀釋至200ml，即得。0.1mol/L鹽酸滴定液：取鹽酸9ml，加水適量使成1000ml，搖勻。0.1mol/L氫氧化鈉滴定液：取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6ml，加新沸過的冷水使成1000ml，搖勻。5.3.1.2 分析步驟取本品1.0g，加新沸過的冷水20ml，水浴上加熱1分鐘并時時振搖，放冷，濾過，取續(xù)濾液10ml，加溴麝香草酚藍指示液0.0

5、5ml，用鹽酸滴定液（0.1mol/L）或氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴至溶液顏色發(fā)生變化，滴定液用量不得過0.05ml。5.3.2氯化物5.3.2.1儀器及試液一般實驗儀器稀硝酸：取硝酸105ml，加水稀釋至1000ml，即得。標準氯化鈉溶液：稱取氯化鈉0.165g，置1000ml量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當于l0g的Cl)。硝酸銀試液：即硝酸銀滴定液5.3.2.2分析步驟量取鑒別（1）項下的供試品溶液1.0ml，加水使成25ml，再加稀硝酸10ml，置50ml納氏比色

6、管中，加水使成約40ml，搖勻，即得供試品溶液。另取標準氯化鈉溶液10.0ml，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，搖勻，即得對照溶液。于供試品溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0ml，用水稀釋使成50ml，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較，不得更濃。5.3.3硫酸鹽5.3.3.1儀器及試液一般實驗儀器稀鹽酸：取鹽酸234ml，加水稀釋至1000ml，即得標準硫酸鉀溶液：稱取硫酸鉀0.181g，置1000ml量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。25%氯化鋇溶液：取氯化鋇25g，加水使溶解成75ml，即得。5.3.3.2

7、 分析步驟取鑒別（1）項下的供試品溶液1.0ml，加水使成約40ml置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸2ml ，搖勻，即得供試品溶液。另取6.0ml標準硫酸鉀溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成約40ml，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得對照溶液。于供試品溶液與對照溶液中，分別加入25%氯化鋇溶液5ml，用水稀釋至50ml，充分搖勻，放置10分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較，不得更濃（0.6%）。5.3.4干燥失重5.3.4.1儀器及試液一般實驗儀器5.3.4.2分析步驟取本品，在80熾灼至恒重，計算減失重量不得過5.0% 。 失重% = ×100%式中 W瓶+樣-熾灼后恒

8、重的稱量瓶與樣品重量；W瓶-熾灼前恒重的稱量瓶重量。W樣-樣品稱樣量5.3.5鐵鹽5.3.5.1儀器及試液一般實驗儀器稀鹽酸：取鹽酸234ml，加水稀釋至1000ml，即得。標準鐵溶液：取硫酸鐵銨FeNH4 (S04)2 ·12H2O0.863g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當于10µg的Fe)。5.3.5.2分析步驟取本品0.50g，熾灼灰化后，加稀鹽酸5ml與水10ml，煮沸，放冷，濾過，濾液加過硫酸銨50mg，用水稀釋成3

9、5ml，與標準鐵溶液5.0ml用同一方法制成的對照液比較，不得更深（0.01%）。5.3.6重金屬5.3.6.1儀器及試液一般實驗儀器稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀釋至1000ml，即得。醋酸鹽緩沖液（pH3.5）：取醋酸銨25g，加水25ml溶5解后，加7mol/L鹽酸溶液38ml，用2moI/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液準確調節(jié)pH值至3.5 (電位法指示），用水稀釋至100ml，即得。標準鉛溶液：稱取硝酸鉛0.1599g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml與水50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勾，作為貯備液。精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1

10、ml相當于l0µg的Pb）。硫代乙酰胺試液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。臨用前取混合液（由1mol/L氫氧化鈉溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml組成）5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加熱20秒鐘，冷卻，立即使用。5.3.6.2分析步驟取本品2.0g，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.51.0ml，使恰潤濕，低溫加熱至硫酸除盡，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸汽除盡后，放冷，在500600熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml與稀醋酸2ml，加熱溶解后，放冷，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，微熱溶解后

11、，移置納氏比色管中，加水稀釋成5ml，作為甲管；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標準鉛溶液一定量，再用水稀釋成25ml，作為乙管；再在甲、乙兩管中分別加硫代乙酖胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深（含重金屬不得過百萬分之十五）。5.4硬脂酸與棕櫚酸相對含量5.4.1儀器及試液一般實驗儀器和GC-14C氣相色譜儀三氟化硼的甲醇溶液：取三氟化硼一水合物或二水合物適量（相當于三氟化硼14g），加甲醇溶解并稀釋至100ml，搖勻。5.4.2分析步驟取本品

12、0.1g,精密稱定，置錐形瓶中，加三氟化硼的甲醇溶液5ml，搖勻，加熱回流10分鐘使溶解，從冷凝管加正庚烷4ml,再回流10分鐘，放冷后加飽和氯化鈉溶液20ml,振搖，靜置使分層，將正庚烷層通過裝有無水硫酸鈉0.1g（預先用正庚烷洗滌）的玻璃柱，移入燒杯中，作為供試品溶液。照氣相色譜法試驗，用聚乙二醇20M為固定相的毛細管柱，起始柱溫70，維持2分鐘，以每分鐘5的速率升溫至240，維持5分鐘；進樣口溫度為220，檢測器溫度為260。分別稱取棕櫚酸甲酯與硬脂酸甲酯對照品適量，加正庚烷制成每1ml中分別約含5mg與10mg的溶液，取1l注入氣相色譜儀，棕櫚酸甲酯峰與硬脂酸甲酯峰的分離度應大于3.0

13、。精密量取供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，用正庚烷稀釋至刻度，搖勻，取1l注入氣相色譜儀，調節(jié)檢測靈敏度，使棕櫚酸甲酯峰與硬脂酸甲酯峰應能檢出。再取供試品溶液1l注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，按下式面積歸一化法計算硬脂酸鎂中硬脂酸在脂肪酸中的百分含量。硬脂酸百分含量（%）= 式中 A為供試品中硬脂酸甲酯的峰面積； B為供試品中所有脂肪酸脂的峰面積。 同法計算硬脂酸鎂中棕櫚酸在總脂肪酸中百分含量。硬脂酸相對含量不得低于40%，硬脂酸與棕櫚酸相對含量的總和不得低于90%。5.5微生物限度5.5.1儀器及試液一般實驗儀器和無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液：取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鈉7.23g、氯

14、化鈉4. 0g、蛋白胨1.0g，加水1000ml，微溫溶解，濾清，分裝，滅菌。5.5.2 分析步驟微生物限度檢查應在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內進行。檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。細菌及控制菌培養(yǎng)溫度為3035；霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為23285.5.2.1細菌、霉菌及酵母菌計數5.5.2.1.1供試品檢查平皿法取供試品10g，加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，用勻漿儀或其他適宜的方法，混勻，作為1:10的供試液。取1:10的供試液1ml，加無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至10ml，作為1:10

15、0的供試液。取相應稀釋級的供試液1ml，置直徑90mm的無菌平皿中，注入1520ml溫度不超過45的溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備2個平板。5.5.2.1.2陰性對照試驗取試驗用的稀釋液1ml，置無菌平皿中，注人培養(yǎng)基,凝固，倒置培養(yǎng)。每種計數用的培養(yǎng)基各制備2個平板，均不得有菌生長。5.5.2.1.3培養(yǎng)和計數除另有規(guī)定外，細菌培養(yǎng)3天，霉菌、酵母菌培養(yǎng)5天，逐日觀察菌落生長情況，點計菌落數，必要時，可適當延長培養(yǎng)時間至7天進行菌落計數并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數后，計算各稀釋級供

16、試液的平均菌落數，按菌數報告規(guī)則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不小于15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。一般營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于細菌計數；玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基用于霉菌及酵母菌計數；酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于酵母菌計數。在特殊情況下，若營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上長有霉菌和酵母菌、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上長有細菌，則應分別點計霉菌和酵母菌、細菌菌落數。然后將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上的霉菌和酵母菌數或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上的細菌數，與玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基中的霉菌和酵母菌數或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中的細菌數進行比較，以菌落數高的培養(yǎng)基中的菌數為計數結果。每1g供試品中除細菌數不得過1000個、霉菌及酵母菌數不得過1

17、00個。5.5.2.2控制菌檢查5.5.2.2.1供試品檢查取細菌、霉菌及酵母菌計數的供試液10ml，直接或處理后接種至適量（不少于100ml)的膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)1824小時，必要時可延長至48小時。取上述培養(yǎng)物0.2ml，接種至含5mlMUG培養(yǎng)基的試管內，培養(yǎng)，于5小時、24小時在366nm紫外光下觀察，同時用未接種的M U G 培養(yǎng)基作本底對照。若管內培養(yǎng)物呈現熒光，為MUG陽性；不呈現熒光，為MUG陰性。觀察后，沿培養(yǎng)管的管壁加人數滴靛基質試液，液面呈玫瑰紅色，為靛基質陽性；呈試劑本色，為靛基質陰性。本底對照應為MUG陰性和靛基質陰性。如MUG陽性、靛基質陽性，判供試品檢出大腸埃

18、希菌；如MUG陰性、靛基質陰性，判供試品未檢出大腸埃希菌；如MUG陽性、靛基質陰性，或MUG陰性、錠基質陽性，則應取膽鹽乳糖培養(yǎng)基的培養(yǎng)物劃線接種于曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)1824小時。若平板上無菌落生長或生長的菌落與表1所列的菌落形態(tài)特征不符，判供試品未檢出大腸埃希菌。若平板上生長的菌落與表1所列的菌落形態(tài)特征相符或疑似，應進行分離、純化、染色鏡檢和適宜的鑒定試驗，確認是否為大腸埃希菌。本品不得檢出大腸埃希菌。5.5.2.2.2陽性對照試驗陽性對照試驗方法同供試品的控制菌檢查，對照菌的加菌量為10100cfu。陽性對照試驗應檢出大腸埃希菌。5.5.2.2.3陰性對照試驗取稀釋液10ml照相應控制菌檢查法檢査，作為陰性對照。陰性對照應無菌生長。5.6含量測定5.6.1儀器及試液一般實驗儀器氨-氯化銨緩沖液（pH10.0）：取氯化銨5.4g，加水20ml溶解后，加濃氨溶液35ml，再加水稀釋至100ml，即得。乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05mol/l）：取乙二胺四醋酸二鈉19g，加適量的水使溶解成1000ml，搖勻。鉻黑T指示劑：取鉻黑T0.1g，加氯化鈉10g，研磨均勻，即得。5.6.2 分析步驟取本品約0.2g，精密稱定，加正丁醇-無水乙醇（1：1）溶液50ml