高三生物選修一知識(shí)點(diǎn)

1、課題一果酒和果醋的制作果酒一原理1、酵母菌，兼性厭氧，適溫18°25°（最適20°）生殖方式：有性生殖和出芽生殖酶酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖（出芽生殖），表達(dá)式為：C6H12O6+O2CO2+H2O+能量酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，表達(dá)式為：C6H12O6C2H5OH+CO2+能量酒精+（橙色）重鉻酸鉀 灰綠色2酵母菌發(fā)酵的最佳環(huán)境有氧時(shí)，酵母菌大量繁殖。再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵2、 實(shí)驗(yàn)步驟1、 器皿等實(shí)驗(yàn)用具進(jìn)行清洗并消毒（70%的酒精）2、 先清水沖洗葡萄，再去除枝梗和腐爛的子粒。（以免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌感染的機(jī)會(huì)）3、 葡萄汁裝入發(fā)酵瓶

2、中，不要超過(guò)瓶總體積的2/3。（先有氧呼吸大量繁殖，避免發(fā)酵旺盛時(shí)，發(fā)酵液溢出），每12小時(shí)左右將瓶蓋擰松一次，以放出CO2。溫度控制在18°25°。4、10 d12d左右監(jiān)測(cè)，檢驗(yàn)酒味、酒精的含量、進(jìn)行酵母菌的鏡檢。5、無(wú)氧、酸性抑制其它微生物生長(zhǎng)。三、注意事項(xiàng)1、在發(fā)酵的過(guò)程中，隨著酒精度的提高，紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈紅色果醋一、原理醋酸菌，需氧，適溫30-35，C2H5OH+ O2CH3COOH+H2O+能量或 2CH3CHO+O22CH3COOH二、實(shí)驗(yàn)步驟1、當(dāng)果酒制成以后，可以在發(fā)酵液中加入醋酸菌或醋曲，然后將裝置轉(zhuǎn)移至3035 的條件下發(fā)酵，適

3、時(shí)向發(fā)酵液中充氣。如果找不到醋酸菌菌種或醋曲，可嘗試自然接種，但效果不是很好。如果沒(méi)有充氣裝置，可以將瓶蓋打開(kāi)，在瓶口蓋上紗布，以減少空氣中塵土等的污染。2、時(shí)間7-8天，觀(guān)察菌膜的形成、嗅味和品嘗、顯微鏡觀(guān)察PH試紙檢測(cè)課題2腐乳的制作一、 實(shí)驗(yàn)原理1參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種，其中起主要作用的是毛霉。2毛霉是一種絲狀真菌，常見(jiàn)于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有發(fā)達(dá)的白色菌絲。3.毛酶等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸二、實(shí)驗(yàn)步驟（一）讓豆腐長(zhǎng)出毛霉1.豆腐的含水量為70左右，大于70%則腐乳不易成形。少于7

4、0%，不利于毛霉生長(zhǎng)。2.將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，毛霉來(lái)自空氣，現(xiàn)代腐乳的制作是在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，人工接種優(yōu)良毛霉菌種。 3.溫度保持在1518 的地方。毛霉逐漸生長(zhǎng)，大約5 d后豆腐表面叢生著直立菌絲。 （二）加鹽腌制：豆腐：鹽=5：1分層加鹽，并隨層加高而增加鹽量，在瓶口表面鋪鹽厚些，以防止雜菌從瓶口進(jìn)入。約腌制8 d。（注 加鹽腌制腌析出水分，豆腐變硬抑制微生物生長(zhǎng)，是腐乳的第一調(diào)味品浸提出毛霉菌絲上的蛋白質(zhì)用鹽腌制時(shí)，注意鹽都用量。鹽的濃度過(guò)低，不足以抑制微生物生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過(guò)高，會(huì)影響腐乳的口味。） （三）加鹵湯裝瓶鹵湯的成分：酒、

5、香辛料鹵湯的作用： 抑制細(xì)菌和其他真菌生長(zhǎng)的作用，調(diào)制口味酒：含量12%，小于12%，不殺菌；大于12%，抑制酶活性，腐乳成熟時(shí)間會(huì)延長(zhǎng)，影響腐乳風(fēng)味。注：腐乳的臭味：臭味越濃，發(fā)酵程度越深，蛋白質(zhì)在分解過(guò)程中產(chǎn)生了硫化氫“青方”：不加輔料；“紅方”：加紅曲；“糟方”：加酒糟。除毛霉外，還有根霉、青霉、酵母菌、曲霉和細(xì)菌，它們都能起到發(fā)酵的作用三、注意事項(xiàng)1.腐乳的“皮”，毛霉菌絲繁殖于表面形成，無(wú)害，可防止腐乳變質(zhì)。課題3制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽的含量1、 基礎(chǔ)知識(shí)1、乳酸球菌、乳酸桿菌：厭氧細(xì)菌分布：空氣、土壤、植物體表，動(dòng)物腸道2、亞硝酸鹽白色粉末，易溶于水，用于食品添加劑；危害人中毒,3

6、g死亡。標(biāo)準(zhǔn) 肉：30mg/kg，醬腌菜：20 mg/kg，兒童奶：2 mg/kg 代謝 大部分隨尿排出 PH、溫度、一定的微生物亞硝酸鹽 亞硝胺（致癌物）2、 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）泡菜制作1、清水：鹽=4：1，將鹽水煮沸冷卻（除氧殺菌，冷卻是避免溫度高殺死乳酸菌）2、新鮮蔬菜（亞硝酸鹽含量低）：修整、洗滌、晾曬、切分成條狀或片狀3、腌制 蔬菜半壇+香辛料至八成加鹽水至沒(méi)菜蓋蓋溫度過(guò)高，食鹽用量不足10%，腌制時(shí)間過(guò)短，容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加 腌制中：控制腌制時(shí)間、溫度和食鹽用量4、測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理1、見(jiàn)下表。名稱(chēng)原理或方法顯色反應(yīng)在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重

7、氮化反應(yīng)生成重氮鹽，重氮鹽與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽偶合形成玫瑰紅色染料去雜反應(yīng)用氯化鎘、氯化鋇和氫氧化鋁等無(wú)機(jī)顆粒吸附泡菜碎片和有機(jī)大分子（人工）比色法將標(biāo)準(zhǔn)比色液與顯色液（實(shí)驗(yàn)液）進(jìn)行比較，以確定顯色液中亞硝酸鹽的含量專(zhuān)題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1培養(yǎng)基的類(lèi)型和用途（1）按物理狀態(tài)來(lái)分：培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等，液體培養(yǎng)基用于工業(yè)生產(chǎn)。（2）按功能來(lái)分，可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基：加入青霉素的培養(yǎng)基:分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基:分離固氮菌不加含碳有

8、機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基: 分離自養(yǎng)型微生物鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，鑒別大腸桿菌，菌落深紫色，帶金屬光澤。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如PH升高，指示劑變紅，則有能分解尿素的細(xì)菌培養(yǎng)基中加入剛果紅，剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被分解后，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。（3）按成分來(lái)分，可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。2培養(yǎng)基一般都含有 水 、 碳源 、 氮源 、 無(wú)機(jī)鹽 四類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生長(zhǎng)因子，另外還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH 、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 以及 氧氣、二氧化碳、滲透壓等 的要求。3獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 防止外來(lái)雜菌的入侵 。實(shí)驗(yàn)室常用消毒、滅菌

9、。4.消毒煮沸消毒：100°C煮沸56分鐘；巴氏消毒：7075°C煮30分鐘或80°C煮15分鐘；酒精擦手；氯氣消毒水源；紫外線(xiàn)；石炭酸。滅菌:灼燒；干熱滅菌；高壓蒸汽滅菌5.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟是：計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板溶化后要調(diào)PH（真菌：5.06.0, 細(xì)菌：6.57.5,放線(xiàn)菌：7.58.5）倒平板：右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞（冷卻到50°C左右才能倒平板：手觸摸，剛剛不燙手）瓶口迅速通過(guò)火焰（通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基）左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿平板冷

10、卻，倒置（平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。）問(wèn)題：在倒平板的過(guò)程中，如果不小心瘵培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。6、 純化大腸桿菌微生物接種的方法中最常用的是 平板劃線(xiàn)法 和 稀釋涂布平板法。平板劃線(xiàn)法常用于分離菌種稀釋涂布平板法常用于統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目思考：為什么在操作的第一步以及每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什

11、么？操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線(xiàn)時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端，從而通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加，使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線(xiàn)結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線(xiàn)？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。在作第二次以及其后的劃線(xiàn)操作是為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)？答：劃線(xiàn)后，線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少，每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增

12、加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。7、 菌種保藏臨時(shí)保藏：固體斜面培養(yǎng)基 4°C的冰箱中保藏 每3-6個(gè)月?lián)Q一次培養(yǎng)基長(zhǎng)期保藏：甘油管藏的方法 -20°C 甘油（防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞造成損害）課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1 尿素只有被 細(xì)菌 分解成 氨 之后，才能被植物吸收利用。 脲酶 CO（NH2）2+H2O CO2+2NH32實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是：人為提供有利于 目的菌生長(zhǎng)的條件（包括 營(yíng)養(yǎng)、溫度、PH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。1、 土壤取樣 3、篩選菌株：選擇培養(yǎng)基，以尿素為唯一N源 二、樣品的稀釋 4常用來(lái)統(tǒng)

13、計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是 稀釋平板計(jì)數(shù)法。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的 一個(gè)活菌 。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。另外， 顯微鏡直接觀(guān)察也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。稀釋?zhuān)杭?xì)菌104、105、106；放線(xiàn)菌103、104、105；真菌102、103、104 7一般來(lái)說(shuō)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 低。這是因?yàn)?當(dāng)兩個(gè)細(xì)胞或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀(guān)察到的只是一個(gè)菌落。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用 菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來(lái)表示。8設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是 排除非測(cè)試

14、因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。通常設(shè)置未接種的培養(yǎng)基同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)三、微生物的培養(yǎng)與觀(guān)察9微生物的培養(yǎng)與觀(guān)察：不同種類(lèi)的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng) 時(shí)間。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，一般每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以 防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征，包括：菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等。10在進(jìn)行多組實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)注意做好標(biāo)記，其目的是 避免混淆。11對(duì)所需的微生物進(jìn)行初步篩選，只是分離純化菌種的第一步，要對(duì)分離的菌種進(jìn)行一步的鑒定，還需要借助 生物化學(xué) 的方法。思考：有哪些方法可以對(duì)菌種進(jìn)行鑒定？細(xì)

15、菌合成的脲酶將尿素分解成了氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，PH升高，可以檢測(cè)PH。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果PH升高，指示劑將變紅。課題3 分解纖維素的微生物的分離1纖維素是 多糖類(lèi) 類(lèi)物質(zhì)， 棉花 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。2纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即 C1酶 、CX酶和葡萄糖苷酶， C1酶 、CX酶 葡萄糖苷酶 纖維素 纖維二糖 葡萄糖1、 纖維素分解菌的篩選1、 土壤取樣 選擇富含纖維素的環(huán)境；將濾紙埋在土壤中一個(gè)月左右，深度10CM的腐殖土壤。也會(huì)有能分解纖維素的微生物生長(zhǎng)。 2、

16、選擇培養(yǎng) 為了增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物 3、 梯度稀釋4、 將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上剛果紅染色法：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。利用剛果紅染色的方法有幾種？各自的優(yōu)缺點(diǎn)是什么？方法一：先培養(yǎng)微生物 ，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)。方法二：在 倒入平板時(shí)就加入剛果紅。這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足？提示：方法一 缺點(diǎn)是操作煩瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜；優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。 方法二 優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問(wèn)題。缺點(diǎn)一是由

17、于培養(yǎng)基中還含有淀粉類(lèi)物質(zhì)，可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)；缺點(diǎn)二有些微生物具有降解色素的能力，它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)降解剛果紅，形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。5、 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落2、 進(jìn)一步鑒定：是否產(chǎn)生纖維素酶分解濾紙等。專(zhuān)題三植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題1：菊花的組織培養(yǎng)一、原理：細(xì)胞的全能性1、概念：植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的細(xì)胞，具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的能力。2、基礎(chǔ)：每個(gè)細(xì)胞含全部遺傳物質(zhì)3、條件：含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、激素、一定的溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等。 脫分化 再分化 二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程：外植體 愈傷組織 胚狀體

18、幼苗愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞三：影響植物組織培養(yǎng)的因素：植物材料的選擇是關(guān)鍵1、 外植體的選擇：材料的年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短都會(huì)有影響，一般選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。外植體采集以春秋為宜 優(yōu)先選擇地上部分作為外植體 陰雨天勿采，晴天下午采 采前噴殺蟲(chóng)劑、殺菌劑或套塑料袋2、 營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等 含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，常用的是MS培養(yǎng)基，主要包括：大量元素、微量元素、有機(jī)物。激素使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率提高植物激素的用量的比例： 高

19、 利于根和愈傷組織的形成 生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素 適中 有利于根芽的分化 低 有利于芽的形成一定的溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等PH：5.8；溫度：18-22°C；每日用日光照射12小時(shí)4、 實(shí)驗(yàn)操作：制備MS培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培1、 制備MS培養(yǎng)基2、 外植體消毒 沖洗少許洗衣粉刷洗沖洗20分鐘無(wú)菌吸水紙吸干70%酒精中搖動(dòng)23次，67S無(wú)菌水沖洗無(wú)菌吸水紙吸干0.1%氯化汞中12分鐘無(wú)菌水沖洗3次3、 接種 0.51CM小段，每瓶接鐘68塊4、 培養(yǎng) 溫度：18-22°C；每日用日光照射12小時(shí)；無(wú)菌培養(yǎng)箱，定期消毒5、 移栽 先讓試管苗在培養(yǎng)間生

20、長(zhǎng)幾日，再移植到消過(guò)毒的珍珠巖等環(huán)境中，讓幼苗長(zhǎng)壯6、 栽培課題2 月季的花藥培養(yǎng)1、 基礎(chǔ)知識(shí)1 被子植物的花粉發(fā)育被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 小孢子四分體時(shí)期 、 單核期 和 雙核期 等階段?；ǚ凼怯苫ǚ勰讣?xì)胞經(jīng)過(guò) 減數(shù)分裂 而形成的，因此花粉是 單倍體的生殖細(xì)胞 。單核期，細(xì)胞核由中央移向一側(cè)，并分裂成一個(gè)生殖細(xì)胞核和一個(gè)花粉管細(xì)胞核，進(jìn)而形成兩個(gè)細(xì)胞，一個(gè)是生殖細(xì)胞，一個(gè)是營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞。生殖細(xì)胞再分裂成兩個(gè)精子。2 產(chǎn)生花粉植物的兩種途徑花藥中的花粉花藥中的花粉胚狀體 叢芽叢芽愈傷組織 誘導(dǎo)生根移栽脫分化脫分化 分化 再分化 通過(guò)花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：思考：（1）花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植

21、株的兩種途徑的差別主要取決于什么？培養(yǎng)基中激素的種類(lèi)及其濃度配比（2） 體細(xì)胞胚：體細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的植株，是無(wú)性生殖；花粉胚：?jiǎn)伪扼w性細(xì)胞發(fā)育成為單倍體植株，是有性生殖。3、 影響花藥培養(yǎng)的因素 材料的選擇 與 培養(yǎng)基的組成 是主要的影響因素； 合適的花粉發(fā)育時(shí)期 也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素；另外親本植株的生長(zhǎng)條件、材料的低溫預(yù)處理 以及 接種密度 等對(duì)誘導(dǎo)成功率都有一定影響。思考：（1）材料的選擇：五月初到五月中旬，即月季的初花期。（2）合適的花粉發(fā)育時(shí)期：在花粉發(fā)育的過(guò)程中，只有某一個(gè)時(shí)期對(duì)離體刺激敏感。即單核期，細(xì)胞核由中央向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期，花藥培養(yǎng)成功率最高。要選擇完全未開(kāi)放

22、的花蕾：為了挑選到單核期的花藥。3 實(shí)驗(yàn)操作（1）材料的選取 選擇花藥時(shí)，一般要通過(guò) 鏡檢 來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時(shí)期的方法有 醋酸洋紅法 和 焙花青鉻礬法 。某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色，需用焙花青鉻礬法，將核染成藍(lán)黑色（2）材料的消毒70%的酒精，30S無(wú)菌水清洗無(wú)菌吸水紙吸干0.1%的氯化汞溶液中24分鐘無(wú)菌水清洗35次 （3）接種和培養(yǎng) 剝離花藥時(shí)，應(yīng)注意哪些問(wèn)題？花藥培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)注意哪些問(wèn)題？盡量不損傷花藥（否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織），同時(shí)還要徹底去除花絲（因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或者胚狀體的形成）接種：每瓶接種花藥710個(gè)，溫度25

23、°C，不需光照【疑難點(diǎn)撥】1為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難？花瓣松動(dòng)后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來(lái)困難。專(zhuān)題六植物有效成分的提取課題1植物芳香油的提取1.植物芳香油的來(lái)源天然香料的主要來(lái)源是 植物 和 動(dòng)物。提取出的植物芳香油具有很強(qiáng)的 揮發(fā)性 ，其組成也 比較復(fù)雜，主要包括 萜類(lèi)化合物及其 衍生物 2.植物芳香油的提取方法植物芳香油的提取方法有 蒸餾 、 壓榨 和 萃取 等。具體采用那種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)決定。 水蒸汽蒸餾法 是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是 利用水蒸汽將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會(huì)重新分出油層

24、和水層。根據(jù)蒸餾過(guò)程中 原料放置 的位置，可以將水蒸氣蒸餾法劃分為 水中蒸餾 、 水上蒸餾 和 水氣蒸餾 。其中，水中蒸餾的方法對(duì)于有些原料不適用，如柑橘和檸檬。這是因?yàn)?水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問(wèn)題 等問(wèn)題。因此，柑橘、檸檬芳香油的制備通常使用 壓榨法 法。植物芳香油不僅 揮發(fā)性強(qiáng) ，而且易溶于 有機(jī)溶劑 ，如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸餾的原料，可以考慮使用 萃取法 法。萃取法是將 粉碎、干燥的植物原料用有機(jī)溶劑浸泡，使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中的 的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后，只需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑，就可以獲得純凈的 植物芳香油了。但是，用于萃取的有機(jī)溶劑必須 事

25、先精制 ， 除去雜質(zhì) ，否則會(huì)影響芳香油的質(zhì)量。3、玫瑰精油的提取 玫瑰精油是制作 高級(jí)香水的主要成分，能使人產(chǎn)生愉悅感。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì) 穩(wěn)定 ，難溶于水 ，易溶于 有機(jī)溶劑 ，能隨 水蒸氣 一同蒸餾， 通常采用 水蒸氣蒸餾法 法中的 水中蒸餾 法。 提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程 鮮玫瑰花+清水、水蒸氣蒸餾、 油水混合物、 分離油層、 除水、 玫瑰油 。水蒸氣蒸餾淺黃色、黃色加入一些無(wú)水Na2SO4吸水使用分液漏斗蒸餾溫度太高,時(shí)間太短,產(chǎn)品品質(zhì)就比較差（適當(dāng)延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間）加入NaCL，增加水的濃度，就會(huì)出現(xiàn)明顯的分層玫瑰花：清水=1：4鮮玫瑰花水蒸氣蒸餾法；干玫瑰花-萃取法 注：1. 玫瑰精

26、油揮發(fā)性強(qiáng),難溶于水,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,所以用水蒸氣蒸餾法.4、橘皮精油的提取從橘皮中提取的 橘皮油 ，主要成分為 檸檬烯 ，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。橘皮精油主要儲(chǔ)藏在 橘皮部分 部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解，使用水中蒸餾法又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊的問(wèn)題，所以一般采用 壓榨法 法。具體的流程是 石灰水浸泡 、 漂洗、 壓榨、 過(guò)濾、 靜置 、 再次過(guò)濾、 橘皮油。要求既要將原料壓緊又要將油分?jǐn)D壓出來(lái)；為了易與水分離加相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%NaHCO3和5%的Na2SO4并調(diào)節(jié)PH到7-8能夠破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率（10小時(shí)）進(jìn)一步除去分子較小的殘

27、留固體物布袋過(guò)濾，除去固體物和殘?jiān)x心過(guò)濾壓榨漂洗石灰水浸泡橘皮要新鮮：芳香油含量高，但是含有大量的果蠟、果膠、水分，所以要曬干橘皮油再次過(guò)濾靜置濾液與吸出的上層橘油混合合并后成為最終的橘皮精油（無(wú)色透明）在5 10下靜置57天（除去果蠟等雜質(zhì)，吸出上層澄清橘皮油）濾紙過(guò)濾【疑難點(diǎn)撥】1、 要根據(jù)原料特點(diǎn)的不同，采用適宜的提取方法提取方法 方法步驟 適用范圍水蒸氣蒸餾1.水蒸氣蒸餾2.分離油層3.除水過(guò)濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓 榨 法1.石灰水浸泡、漂洗2.壓榨、過(guò)濾、靜置3.再次過(guò)濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取1.粉碎、干燥2.萃取、過(guò)濾3.濃縮適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中課題2胡蘿卜素的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1. 胡蘿卜素是 橘黃色結(jié)晶 ，化學(xué)性質(zhì)比較 穩(wěn)定 ，不溶于水，微溶于 乙醇 ，易溶于 石油醚等有機(jī)溶劑。根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為、三類(lèi)。 -胡蘿卜素是其中最主要的組成成分。與化學(xué)結(jié)構(gòu)類(lèi)似的胡蘿卜素約有100多種,它們大多存在于蔬菜中。胡蘿卜 等蔬菜是提取天然-胡蘿卜素的原料。工業(yè)生產(chǎn)上，提取天然-胡蘿卜素的方法主要有