人天然fab噬菌體抗體庫的構(gòu)建

1、免疫學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 精品論文 人天然Fab噬菌體抗體庫的構(gòu)建關(guān)鍵詞：噬菌體抗體庫 Fab抗體 分子生物學(xué) 人源抗體摘要：目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超

2、感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。正文內(nèi)容 目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段

3、，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性

4、的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為

5、1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-B

6、lue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法：

7、 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為

8、進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體

9、電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基

10、因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和

11、思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過

12、輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體p

13、Comb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)

14、技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。

15、結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。目的： 采用噬菌體抗體庫這一新興生物學(xué)技術(shù)，構(gòu)建天然人源Fab抗體庫。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分離淋巴細胞，提取總RNA后逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，通過PCR擴增抗體重鏈和輕鏈基因片段，回收700bp左右的目的基因片段，將基因片段連接到噬菌體pComb3中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體pComb3電穿孔轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞XL1-Blue構(gòu)建輕鏈文庫，隨后將重鏈基因經(jīng)XhoI和SpeI雙酶切后連

16、到輕鏈質(zhì)粒文庫中，將構(gòu)建的重組噬菌體載體電轉(zhuǎn)化XL1-Blue，經(jīng)輔助噬菌體VCSM13超感染，構(gòu)建非免疫人源Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)果： 經(jīng)過輕鏈和重鏈基因的重組和轉(zhuǎn)化，獲得庫容量為1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌體抗體庫。 結(jié)論： 本研究構(gòu)建的人天然噬菌體抗體庫為進一步篩選特異性抗體提供基礎(chǔ)，也是分子生物學(xué)實驗方法的-個探索與嘗試。為今后篩選制備抗體提供了技術(shù)平臺和思路，有望為后續(xù)獲得多種有高潛在中和活性的人源抗體打下一定的基礎(chǔ)。特別提醒：正文內(nèi)容由PDF文件轉(zhuǎn)碼生成，如您電腦未有相應(yīng)轉(zhuǎn)換碼，則無法顯示正文內(nèi)容，請您下載相應(yīng)軟件，下載地址為 。如還不能顯示，可以聯(lián)系我q q 1627550258 ，提供原格式文檔。 " 垐垯櫃換燙梯葺銠?endstreamendobj2x滌?U'閩AZ箾FTP鈦X飼?狛P?燚?琯嫼b?袍*甒?颙嫯'?4)=r宵?i?j彺帖B3锝檡骹>笪yLrQ#?0鯖l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛枒l壛>渓?擗#?"?#綫G劌#K芿$?7.耟?Wa癳$Fb癳$Fb癳$Fb癳$Fb