發(fā)酵豆粕(濕料)生產(chǎn)工藝及相關(guān)指標(biāo)

1、發(fā)酵豆粕（濕料）生產(chǎn)工藝及相關(guān)指標(biāo)名目名目2發(fā)酵豆粕生產(chǎn)手冊3產(chǎn)品指標(biāo)4混合及發(fā)酵設(shè)備5發(fā)酵車間設(shè)計6發(fā)酵豆粕濕料應(yīng)用7發(fā)酵料儲存時間9附件（部分檢測方法）：13發(fā)酵豆粕生產(chǎn)手冊原料：豆粕、酵源、水、糖蜜（非必選）原料配比：酵源5kg +水500Kg+豆粕1000Kg（+糖蜜20Kg，非必選）工藝：上述原料混勻，轉(zhuǎn)入發(fā)酵桶、蓋嚴(yán)、室溫48120 小時。檢測pH 值5.5 即為合格。 發(fā)酵容器可選內(nèi)膜袋、呼吸膜袋、發(fā)酵桶、發(fā)酵箱等，以能密閉不進(jìn)氣為好。添加挨次：酵源+水充分混勻，再加入豆粕中。酵源與水混勻時間不小于2分鐘，混合液添加至豆粕時間不超過2分鐘，混合液與豆粕攪拌混合不超過2分鐘。溫度需

2、求：水溫3040°C最宜，不能高于40°C，低于15°C考慮用熱水；環(huán)境溫度 2040°C，低于15°C考慮保溫或延長發(fā)酵時間。水質(zhì)要求：一般自來水及以上級別均可。加工設(shè)備：材質(zhì)要求不銹鋼（防腐蝕）。原料稱量：確定電子秤精確后按配方要求挨次稱取各種原料，最大誤差：大宗原料保持在0.5Kg 以內(nèi)、小料保持在100g 以內(nèi)。原料混合：非連續(xù)生產(chǎn)時，混合前后清理攪拌機，保證原料的混合均勻度。嚴(yán)禁消滅結(jié)塊，半干半濕現(xiàn)象。產(chǎn)品指標(biāo)以46%蛋白豆粕計算，干料以60°C烘干計算指標(biāo)干料濕料水分（%）1042粗蛋白（%）4932pH5.25.2小肽（

3、占粗蛋白，%）1011KOH蛋白質(zhì)溶解度（%）7070總酸（%）2.53.0L-乳酸（%）2.02.5水蘇糖（%）0.50.5棉籽糖 （%）0.30.3抗原蛋白消退（%）8080乳酸菌（CFU/g）0-106106-108酵母菌（CFU/g）00-105芽孢菌（CFU/g）0-1060-106VBN（mg/100g）7070灰分（%）7.06.5粗纖維（%）7.06.5混合及發(fā)酵設(shè)備混合設(shè)備：建議接受帶投料斗垂直提升絞龍臥式混合機接種混合系統(tǒng)在整個設(shè)計中比較關(guān)鍵，因此必需要滿足一下幾個條件：1. 對于水分較高的料具有較高的混合均勻度，不會消滅成團(tuán)或成球；2. 效率高，占地面面積小，運行費用低；

4、3. 發(fā)酵前要盡量避開帶入雜菌，因此菌種混合系統(tǒng)要易于清理。發(fā)酵設(shè)備：建議接受呼吸袋或者厚一點一般密封塑料袋子，可以重復(fù)利用。混合完后裝袋發(fā)酵，保證袋口密封，杜絕空氣中的雜菌進(jìn)入影響產(chǎn)品質(zhì)量。 依據(jù)每個飼料廠的狀況選擇合理發(fā)酵方式，現(xiàn)在用的比較多的發(fā)酵模式有：槽式發(fā)酵，堆式發(fā)酵，箱式發(fā)酵，塔式發(fā)酵，罐式發(fā)酵，袋式發(fā)酵。由于我們這個方案是針對終端，發(fā)酵規(guī)模相對較小，操作需簡潔，投入小等特點，所以我們建議用袋式發(fā)酵，易于把握溫度，夏天把袋子鋪開來發(fā)酵，可以較好的散熱，冬天把袋子堆起來發(fā)酵，可以較好提升發(fā)酵的保溫，易于使用，每個袋子的發(fā)酵料都定量，用的時候不用稱量，易于把握產(chǎn)品的質(zhì)量，每個袋子都是獨

5、立的單元，互不影響，可以避開在使用過程中的二次發(fā)酵，沒有用完的成品需密封儲存，避開空氣中的雜菌污染。發(fā)酵車間設(shè)計發(fā)酵車間可以建在建在盡量離投料口距離近，濕料發(fā)酵用空間為每3m2/噸濕料/批；車間盡量做到封閉，有利于把握發(fā)酵條件；發(fā)酵車間要保持清潔，必要時需定期消毒；須有保溫設(shè)備，建議裝地暖或暖氣片，恒溫發(fā)酵是打算發(fā)酵產(chǎn)品穩(wěn)定的至關(guān)因素。具體可以由根源團(tuán)隊供應(yīng)設(shè)計方案。發(fā)酵豆粕濕料應(yīng)用全價料中使用方案飼料配方中添加濕料，接受先預(yù)混合后粉碎配料制粒的方式，添加方法：預(yù)混合粉碎發(fā)酵豆粕（濕料）與豆粕按1:3比例預(yù)混合（水分18%左右），發(fā)酵豆粕（濕料）與膨化玉米按1:2比例預(yù)混合（水分17%左右）.

6、目的分散、降低水分，預(yù)混后用1.2mm的篩片進(jìn)行粉碎后，進(jìn)入正常工序原料比例粉碎后水分（%）理論水分（%）降低水分（%）發(fā)酵豆粕：豆粕1217.5820.572.99發(fā)酵豆粕：膨化大豆1216.1918.161.97發(fā)酵豆粕：膨化玉米3718.3719.320.95制粒混合粉碎后的發(fā)酵豆粕（濕）+豆粕、玉米直接進(jìn)入配料混合、制粒工序。二次制粒及先混合后粉碎工藝模式可以直接添加，省去上述步驟。 加料方式 小料口直接加到混合機與配方物料直接混合，因發(fā)酵后產(chǎn)品水份低，黏度小，流淌性好,優(yōu)點：可操作性強，節(jié)省成本。（預(yù)混合工藝、先配料后粉碎工藝、二次制粒工藝中在一次制粒時） 添加比例配方保持不變，依據(jù)

7、養(yǎng)分指標(biāo)發(fā)酵豆粕濕料依據(jù)1.2：1替換配方中原豆粕含量。如配方中原豆粕添加比例為5%，則發(fā)酵豆粕添加為=1.2×5%=6%，替代發(fā)酵豆粕干料依據(jù)1.3:1添加。濕料添加量（%）理論增加水分（%）飼料增加水分（%）720.96102.81.35113.21.55實際生產(chǎn)中水分低于上表，但因各地氣候環(huán)境不同，需做對比試驗，來確定實際提升量發(fā)酵料儲存時間 發(fā)酵結(jié)束原料在原包裝密閉條件下，儲存大于6個月 混合后發(fā)酵濕料裝在正常使用的飼料袋中保存（常溫保存），15天 破包狀況/開口保存（常溫儲存)，5天。直接經(jīng)濟(jì)價值1. 促進(jìn)畜禽健康：保障動物養(yǎng)分全面，增加動物體質(zhì)，削減健康問題，降低死淘率，

8、降低藥物成本，降低養(yǎng)殖成本，使養(yǎng)殖動物食用更平安，。2. 提高飼料利用率：產(chǎn)品中富含的多種消化酶、有機酸等可提高動物對飼料蛋白、能量、礦物質(zhì)的消化利用率，并在發(fā)酵過程中將發(fā)酵物料提前預(yù)消化，分解成小分子物質(zhì)，更利于吸取利用，表現(xiàn)為糞便變少、變細(xì)、過料變少。在發(fā)酵過程中合成的中氨基酸、維生素、不飽和脂肪酸，可促進(jìn)動物養(yǎng)分更均衡。3. 促進(jìn)生長發(fā)育：補充功能性益生菌及代謝產(chǎn)物，維持菌群平衡，促進(jìn)胃腸消化、吸取功能更強，提高生長速度，提高畜禽生產(chǎn)或繁殖性能，增加養(yǎng)殖效益。4. 改善內(nèi)外環(huán)境：發(fā)酵過程中產(chǎn)生的益生菌對動物消化道產(chǎn)生益生保健作用，改善動物體內(nèi)環(huán)境，削減消化道問題，同時削減糞便氨氣、硫化氫

9、等有害氣體產(chǎn)生，改善圈舍環(huán)境，削減刺激氣味，使養(yǎng)殖現(xiàn)場更環(huán)保。5. 抗應(yīng)激：分泌抗氧化物質(zhì)，減小免疫、轉(zhuǎn)群、運輸、驚嚇、換料、天氣猛烈變化等造成的應(yīng)激反應(yīng)，降低應(yīng)激損失。成本對比依據(jù)目前的發(fā)酵豆粕生產(chǎn)成本進(jìn)行成本對比（以規(guī)?；a(chǎn)核算）：商品發(fā)酵豆粕濕料發(fā)酵豆粕原料31003100菌種150150混合、發(fā)酵10050烘干2500粉碎50-80不同粒度60包裝7010可以反復(fù)使用運輸50-200不同距離0損耗300發(fā)酵、粉碎損耗30發(fā)酵、粉碎損耗管理費用及其它30050費用低小計1270-1450380合計4370-45503440備注：商品發(fā)酵豆粕以50蛋白發(fā)酵豆粕進(jìn)行核算，濕料發(fā)酵豆粕以飼料

10、廠直接使用進(jìn)行核算。根源生產(chǎn)技術(shù)服務(wù)根源集團(tuán)自有益生菌應(yīng)用研發(fā)、生產(chǎn)體系，可保障產(chǎn)品的持續(xù)更新?lián)Q代，保持行業(yè)的領(lǐng)先性，有持續(xù)改善力量，可供應(yīng)發(fā)酵豆粕以外的發(fā)酵技術(shù)支持；建立了一支由營銷、生產(chǎn)和技術(shù)組成的團(tuán)隊，共同為合作伙伴服務(wù)；其中生產(chǎn)專家可以為合作伙伴供應(yīng)流程優(yōu)化和生產(chǎn)指導(dǎo)等一系列服務(wù)，技術(shù)專家可以給合作伙伴供應(yīng)菌種配方優(yōu)化、產(chǎn)品質(zhì)量把握、發(fā)酵工藝指導(dǎo)等服務(wù)，共享閱歷；對本項目工程負(fù)責(zé)終身跟蹤服務(wù)。附件（部分檢測方法）：固體pH 值測量取半成品1g（分析天平），加入5ml 蒸餾水混勻，靜置5min，取上清液測pH。乳酸菌菌量檢測方法目的：檢測產(chǎn)品中乳酸菌的菌量，以監(jiān)測產(chǎn)品質(zhì)量。設(shè)備及儀器：1

11、ml移液器及槍頭，滅菌空平板，MRS培育基，超凈工作臺，無菌水，振蕩器，無菌試管，10ml移液管，酒精燈，培育箱。培育基（MRS）：蛋白胨 10g，牛肉膏 10g，酵母膏 5g，K2HP04 2g，檸檬酸三銨2g，乙酸鈉 5g，葡萄糖 20g，吐溫80 1mL，硫酸鎂 0.58g，硫酸錳 0.25g，碳酸鈣5g，瓊脂粉 18g，蒸餾水1L。116 30min滅菌備用。檢測方法：1、每只試管用10ml刻度吸管加入9ml無菌水，按所需梯度來定所需的試管數(shù)2、用1ml移液器吸取菌液1ml（潤洗3次)加入第一根試管中即得10-1稀釋液3、更換槍頭，同樣操作制成10倍梯度稀釋的樣品液，直至最終的稀釋度4

12、、用1ml移液器吸取1ml菌液在酒精燈旁加到無菌空平板內(nèi)（3塊），倒入溫度適宜的MRS培育基，約20ml左右，輕輕搖擺平皿混勻培育基和菌液。注：假如樣品為固體，先稱取1g到含玻璃珠的三角瓶中，加滅菌水100ml，37震蕩活化0.5h。然后再按上述方法稀釋。5、待培育基凝固后，倒置放入37培育箱內(nèi)培育48h后即可計數(shù)（若有雜菌需要厭氧裝置）。6、以消滅20300個菌落數(shù)的稀釋度的平板為計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計有效活菌數(shù)目。有效菌數(shù)（億/ml)=有效菌落總數(shù)（3塊板的平均數(shù)）×稀釋倍數(shù)芽孢桿菌檢測方法1 預(yù)備工作1.1 培育皿：培育皿用洗潔精洗滌，然后清水反復(fù)沖洗潔凈，確保無洗潔精殘留；晾干，用雙

13、層報紙包好121 °C/30min高壓滅菌，冷卻干燥后備用。1.2 蒸餾水、刻度吸管（10 ml )、eppendorf移液槍（1000ul、100ul）、15×180試管、涂布器等所需物品報紙包好后121 /30min 滅菌備用。1.3 培育基配制(北京陸橋養(yǎng)分瓊脂)1.3.1 確保配制時容器清洗潔凈1.3.2 培育基各組分稱量精確無誤1.3.3 培育基配置日期、名稱，配制人員等標(biāo)示清楚1.3.4 121 /30min 滅菌1.4 倒平板1.4.1 超凈工作臺，火焰愛護(hù)，確保無菌操作1.4.2 每個平皿中培育基的量約為20ml（即一升培育基倒約50個）1.4.3平板倒完后

14、置于超凈臺上，開風(fēng)機30min（禁止開啟紫外燈），待平板凝固后用滅菌報紙包好倒置于恒溫培育箱中37°C空培24小時1.4.4 空培結(jié)束后，將平板置于冰箱內(nèi)保存，待用2 平板計數(shù)2.1 樣品制備：2.1.1 發(fā)酵液樣品制備：取100ml發(fā)酵液于250ml 三角瓶中，置于磁力攪拌器上攪拌2min, 攪拌狀態(tài)下，取專用的10ml刻度吸管沿三角瓶壁插入，潤洗3遍后吸取發(fā)酵液10ml置于盛有90ml無菌水的500ml三角瓶中（含玻璃珠100粒），自然流下，旋轉(zhuǎn)式搖床上200r/min室溫振蕩30min即得10-1稀釋液2.1.2 固體菌劑樣品制備：依據(jù)統(tǒng)計學(xué)要求，多點采樣，采樣量不少于500g

15、。精確稱取待測樣品1g，放入裝有100ml無菌水的500ml三角瓶中（含玻璃珠100粒），在旋轉(zhuǎn)式搖床上200r/min室溫振蕩60min即得10-2稀釋液2.2 操作步驟2.2.1 依據(jù)樣品濃度選擇合適的稀釋度，確定稀釋用試管數(shù)量。2.2.2 每只試管用10ml刻度吸管加入9ml無菌水2.2.3 將制備好的樣品置于漩渦震蕩器震蕩2min（精確計時），振蕩完成后馬上將1ml移液器（帶槍頭）插入試管底部，潤洗3次后吸取稀釋液1ml 于9ml 無菌水試管中，即得10-2稀釋液（固體菌劑樣品為10-3稀釋液）2.2.4 更換槍頭，同樣操作制成10倍梯度稀釋的樣品液，直至最終的稀釋度2.2.5 涂布：

16、取最終稀釋度樣品開頭涂布，樣品重新震蕩1min（精確計時）馬上用0.1ml移液器（帶槍頭）插入試管底部，潤洗3次后吸取稀釋液0.1ml，在火焰愛護(hù)下將槍頭尖部靠于打開的培育基上打出菌液，取涂布器均勻涂布30秒左右，至樣品完全滲透入培育基（涂布過程中培育基有澀感），連續(xù)做3個平行。2.2.6 同樣操作共做3個連續(xù)的稀釋度（稀釋度由高到低），不同稀釋度更換槍頭和涂布器2.2.7 涂布完的培育皿做好標(biāo)示（樣品名稱、稀釋度、操作人）3 樣品培育 將上述培育皿用報紙包好（削減水分蒸發(fā)，并防止污染），倒置于37恒溫培育箱中培育24h可以計數(shù)（不同芽孢桿菌樣品所需的培育溫度和時間會有差異）。4 菌落計數(shù)4.

17、1 通過菌落識別結(jié)合鏡檢，確定有效菌。4.2以消滅20300個菌落數(shù)的稀釋度的平板為計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計有效活菌數(shù)目。當(dāng)只有一個稀釋度，其有效菌平均菌落數(shù)在20300之間時，則以該菌落數(shù)計算。若有兩個稀釋度，其有效菌平均菌落數(shù)均在20300之間時，應(yīng)按兩者菌落總數(shù)之比值（稀釋度大的菌落總數(shù)×10與稀釋度小的菌落總數(shù)之比）打算，若其比值小于等于2應(yīng)計算兩者的平均數(shù)；若大于2則以稀釋度小的菌落平均數(shù)計算。精確計數(shù)有效菌落數(shù)和雜菌總數(shù)，每個稀釋度3個培育皿菌落數(shù)之和的平均數(shù)為該稀釋度有效菌落總數(shù)4.3 計算 有效菌數(shù)（億/ml,克）=有效菌落總數(shù)×10×稀釋倍數(shù) 酵母活菌總數(shù)

18、的檢測1 儀器、設(shè)備、試劑和培育基1.1溫箱：30±1。1.2超凈工作臺1.3分析天平，感量為0.01g。1.4滅菌吸管：1ml（具0.01刻度）、10ml（具0.1刻度）。1.5濕熱滅菌鍋。1.6滅菌平皿：直徑為90mm。1.70.85%的無菌生理鹽水。1.8 震蕩器1.9培育基配方Y(jié)PD培育基：蛋白胨2%，酵母膏1%，葡萄糖2%，氯霉素0.1，瓊脂1.8-2%，116，20min蒸汽滅菌后備用。孟加拉紅培育基，成品，121，15min滅菌備用。YPD培育基和孟加拉紅培育基任選其一均可。在超凈工作臺上將滅好菌的培育基倒平皿，每個大約20ml，放在紫外燈下吹風(fēng)1小時，然后放在工作臺面過夜，其次天備用（倒好的平板一次用不完的，可放入冰箱冷藏，保藏時間不得超過一周）。2 操作步驟2.1 以無菌操作方法稱取1.00克待檢樣品，注入盛有99ml生理鹽水的帶有玻璃珠的三角瓶