新步步高高二生物人教選修課時(shí)作業(yè) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù) Word含解析_第1頁(yè)
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1、第8課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)目標(biāo)導(dǎo)航1.簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程、條件及應(yīng)用。2.簡(jiǎn)述通過(guò)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程和應(yīng)用前景。一、動(dòng)物細(xì)胞工程1常用的技術(shù)手段:_、動(dòng)物細(xì)胞核移植、_、生產(chǎn)單克隆抗體等。2基礎(chǔ):_技術(shù)。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1概念:從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成_,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞_和_。2過(guò)程3條件(1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:對(duì)_和所有_進(jìn)行無(wú)菌處理。(2)營(yíng)養(yǎng)(3)溫度和pH(4)氣體環(huán)境4應(yīng)用(1)生產(chǎn)生物制品:如_疫苗、干擾素、_等。(2)應(yīng)用于基因工程:_是基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞,因此,離不開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。(3)檢測(cè)_,判斷某種物質(zhì)

2、的_。(4)用于_、_、_等方面的研究,如篩選抗癌藥物等。三、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1理論基礎(chǔ):動(dòng)物的細(xì)胞核具有_。2概念:將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的_,移入一個(gè)去核的_中,使其_并發(fā)育成一個(gè)_,最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。3分類(lèi):包括_和_,其中_較易成功。4過(guò)程5應(yīng)用前景(1)在畜牧生產(chǎn)中:可以加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)_。(2)在保護(hù)瀕危物種方面:可增加這些動(dòng)物的_。(3)在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域:轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可以作為_(kāi)生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白。(4)在治療人類(lèi)疾病方面:轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物細(xì)胞、組織和器官可以作為_(kāi)的供體。(5)人的核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化,形成相應(yīng)的組織、器官后,可以用于_。(6)研究胚胎發(fā)育

3、及衰老過(guò)程,追蹤研究疾病的_和_。6存在問(wèn)題:(1)_低。(2)絕大多數(shù)克隆動(dòng)物還存在_。(3)克隆動(dòng)物食品的_存在爭(zhēng)議。知識(shí)點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()A培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變C二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的D惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)2用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng),下列敘述正確的是()A都需要用CO2培養(yǎng)箱B都需要用液體培養(yǎng)基C都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行D都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性知識(shí)點(diǎn)二動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物3一只羊的卵母細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后,這個(gè)卵母細(xì)胞經(jīng)過(guò)多

4、次分裂,再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育,結(jié)果產(chǎn)下了一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途,但是不能()A有選擇地繁殖某一性別的家畜B繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體C用于保存物種D改變動(dòng)物的基因型4如圖為某哺乳動(dòng)物的生殖過(guò)程圖,正確的敘述是()A個(gè)體2為克隆動(dòng)物,c為高度分化的體細(xì)胞B個(gè)體2的遺傳性狀與提供b細(xì)胞的母羊完全不同C產(chǎn)生動(dòng)物個(gè)體2的生殖方式為有性生殖De細(xì)胞為完成減數(shù)分裂的卵細(xì)胞基礎(chǔ)落實(shí)1在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,使用胰蛋白酶的目的是()A使動(dòng)物組織分散為單個(gè)細(xì)胞B去掉細(xì)胞壁,使其成為原生質(zhì)體C去掉細(xì)胞膜,暴露出原生質(zhì)體便于細(xì)胞融合D促進(jìn)蛋白質(zhì)水解為多肽2一般來(lái)說(shuō),動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿(mǎn)足以下條件()無(wú)毒

5、的環(huán)境無(wú)菌的環(huán)境合成培養(yǎng)基需加血漿溫度與動(dòng)物的體溫相近需要氧氣,也需要二氧化碳適宜的pHABCD3下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是()A培養(yǎng)基成分不同B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行C動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng),而植物細(xì)胞不能D動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng),而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株4從母羊甲的體細(xì)胞中取出細(xì)胞核,注入到母羊乙的去核卵母細(xì)胞中,融合后的細(xì)胞經(jīng)卵裂形成早期胚胎,再移入到另一只母羊丙的子宮內(nèi),出生的小羊大多數(shù)性狀()A難以預(yù)測(cè)B像甲C像乙D像丙5根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)劃分,植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所常用的培養(yǎng)基分別是()A固體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基B固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基C液體培養(yǎng)基

6、、固體培養(yǎng)基D液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基6進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),最好選用的培養(yǎng)材料是()A衰老退化的動(dòng)物組織細(xì)胞B成熟動(dòng)物個(gè)體的體細(xì)胞C動(dòng)物的受精卵細(xì)胞D健康動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物個(gè)體的體細(xì)胞能力提升7下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中,不正確的是()A培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清B原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右便會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)停止C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般能夠傳到4050代,但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)和獲得大量自身的健康細(xì)胞8美國(guó)杜克大學(xué)醫(yī)療中心一個(gè)研究小組在科學(xué)雜志上撰文透露,他們利用成年豬的動(dòng)脈血管細(xì)胞和能夠模擬胚胎環(huán)境的新型生物效應(yīng)器,成功地在實(shí)驗(yàn)室培育出

7、新的動(dòng)脈血管。這種血管的外形和功能都與真的血管一樣。這一研究成果是生物組織培養(yǎng)工程領(lǐng)域的重大進(jìn)展。下列關(guān)于以上技術(shù)的敘述中,不正確的是()A以上技術(shù)屬于“克隆”B這項(xiàng)技術(shù)中可能利用了去核卵細(xì)胞C這項(xiàng)技術(shù)的關(guān)鍵是要激發(fā)血管細(xì)胞的“全能性”D這項(xiàng)技術(shù)的關(guān)鍵是要激發(fā)血管細(xì)胞發(fā)育成血管的潛能92010年6月中國(guó)養(yǎng)殖網(wǎng)報(bào)道,“內(nèi)蒙古白絨山羊種羊場(chǎng)”誕生了目前國(guó)際上規(guī)模最大的一批轉(zhuǎn)基因克隆絨山羊。關(guān)于克隆,除個(gè)體水平的外,還有分子、細(xì)胞、器官等水平的克隆,下列不屬于克隆技術(shù)的是()A從出生不久的小鼠心臟取下細(xì)胞在體外離體培養(yǎng)成細(xì)胞系B使某些特定的外源基因在哺乳動(dòng)物體內(nèi)表達(dá)C農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上利用馬鈴薯的芽繁殖馬鈴

8、薯D將單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖題號(hào)123456789答案10.人的血清蛋白在臨床上需求量很大,通常從血液中提取。由于艾滋病等人類(lèi)傳染病造成的威脅與日俱增,使人們對(duì)血液制品心存疑慮。生物技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用使利用動(dòng)物生產(chǎn)人的血清蛋白成為可能,如圖是上海某研究所培育生產(chǎn)出血清蛋白奶牛的流程圖。根據(jù)圖示回答:(1)雌性奶牛胚胎干細(xì)胞是()A雌性奶牛產(chǎn)生的卵細(xì)胞B雌性奶牛體內(nèi)的受精卵C能發(fā)育成雌性奶牛的受精卵D從奶牛胚胎中取出的細(xì)胞,這個(gè)奶牛胚胎將發(fā)育成雌性奶牛(2)圖中A、B用到的生物技術(shù)分別為_(kāi)、_。(3)小牛1、2、3的性別是_性,性狀_(填“相同”或“不相同”)。(4)在形成重組細(xì)胞之前,先去掉

9、受體牛卵母細(xì)胞的核,其原因是_。(5)舉例說(shuō)明體細(xì)胞核移植在治療人類(lèi)疾病方面的應(yīng)用。_。綜合拓展11隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們可以根據(jù)人類(lèi)的需求來(lái)改造生物的性狀,在許多領(lǐng)域取得了可喜的成果,下圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)血清白蛋白的圖解,根據(jù)下圖回答:(1)此工程涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)主要有:_。(2)在形成圖中的過(guò)程中,我們稱(chēng)為_(kāi),獲取的途徑主要有_。能實(shí)現(xiàn)直接進(jìn)入嗎?_。為什么?_。(3)圖中一般經(jīng)_處理可以得到,從到的過(guò)程中一般用未受精的卵細(xì)胞去核為受體,不用普通的體細(xì)胞,原因是:_。(4)是的后代,那么與的遺傳性狀完全一樣嗎?_,為什么?_。利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物乳汁生產(chǎn)生物產(chǎn)品的方法稱(chēng)為_(kāi),利用核移植的方

10、法得到的動(dòng)物叫做_。答案知識(shí)清單一、1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)二、單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖2剪碎胰蛋白酶膠原蛋白酶貼壁接觸胰蛋白酶二倍體核型緩慢細(xì)胞核型3(1)培養(yǎng)液培養(yǎng)用具(2)微量元素氨基酸促生長(zhǎng)因子(3)36.57.27.4(4)細(xì)胞代謝培養(yǎng)液的pH4(1)病毒單克隆抗體(2)動(dòng)物細(xì)胞(3)有毒物質(zhì)毒性(4)生理病理藥理三、1.全能性2.細(xì)胞核卵母細(xì)胞重組新的胚胎3.胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植胚胎細(xì)胞核移植4.體細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞細(xì)胞融合重組細(xì)胞胚胎移植5(1)優(yōu)良畜群繁育(2)存活數(shù)量(3)生物反應(yīng)器(4)異種移植(5)組織器官的移植(6)發(fā)展過(guò)程治療疾病6(1)成功率(2)

11、健康問(wèn)題(3)安全性問(wèn)題對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練1D動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中有接觸抑制現(xiàn)象,細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中會(huì)貼壁生長(zhǎng),形成一層細(xì)胞,相互接觸后停止生長(zhǎng)??寺∨囵B(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中,僅有極少數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變。二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)一般傳至10代后就不易傳下去了。惡性細(xì)胞系的細(xì)胞具有不死性,可以進(jìn)行傳代培養(yǎng)。知識(shí)鏈接動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),一般選取幼齡動(dòng)物的組織、器官,其細(xì)胞的分化程度較低,增殖能力強(qiáng),有絲分裂旺盛,容易培養(yǎng)。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,一般情況下10代以前的細(xì)胞核型不變,10代以后有些細(xì)胞核型發(fā)生改變,50代以后的細(xì)胞可能發(fā)生癌變。(3)胰蛋白酶在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的作用包括將組織

12、分散成單個(gè)細(xì)胞,以及將貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái),這樣做的目的是避免動(dòng)物細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象。2C不管是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)還是植物組織培養(yǎng),最基本的一個(gè)外界條件就是都要在無(wú)菌環(huán)境條件下進(jìn)行。此外,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基,其中的碳源是葡萄糖,培養(yǎng)液中還需要加入一定的動(dòng)物血清,其氣體環(huán)境是95%空氣5%的二氧化碳,以維持培養(yǎng)液的pH。而植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,其碳源為蔗糖,在組織培養(yǎng)的脫分化階段必須在黑暗條件下進(jìn)行,再分化過(guò)程則需要一定的光照條件;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是細(xì)胞的增殖,不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,而植物組織培養(yǎng)體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性。歸納提升動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較3.D生物的各

13、種性狀是由遺傳物質(zhì)DNA控制的。由細(xì)胞核內(nèi)的DNA控制的遺傳叫細(xì)胞核遺傳,由細(xì)胞質(zhì)內(nèi)DNA(主要存在于線粒體、葉綠體)控制的遺傳叫細(xì)胞質(zhì)遺傳。目前的克隆技術(shù)是將一個(gè)體細(xì)胞核移入一個(gè)去核的卵母細(xì)胞,經(jīng)過(guò)試管培養(yǎng)一段時(shí)間后,再移入另一個(gè)體的子宮內(nèi)發(fā)育、分娩的技術(shù),通過(guò)該技術(shù)能夠保持親本的優(yōu)良性狀,能夠保持性別不變,亦能夠用于保存物種,但不能改變動(dòng)物的基因型,這是因?yàn)榛蛐偷母淖兪峭ㄟ^(guò)動(dòng)物的有性生殖(減數(shù)分裂)完成的。知識(shí)鏈接動(dòng)物細(xì)胞核移植和克隆動(dòng)物(1)原理:動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。(2)動(dòng)物細(xì)胞全能性的特點(diǎn):動(dòng)物細(xì)胞的全能性隨著動(dòng)物細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到抑制,全能性表達(dá)很難,但動(dòng)物的細(xì)胞核內(nèi)仍

14、含有該種動(dòng)物的全部遺傳基因,具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能,即動(dòng)物的細(xì)胞核仍具有全能性。(3)核移植種類(lèi)胚胎細(xì)胞核移植:較易成功。體細(xì)胞核移植:較難成功。(4)動(dòng)物克隆的一般過(guò)程4A通過(guò)克隆技術(shù)培育的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物,提供細(xì)胞核的是高度分化的體細(xì)胞,A項(xiàng)正確;B項(xiàng)考慮細(xì)胞質(zhì)基因,應(yīng)該是“有相同之處”;動(dòng)物的克隆實(shí)際上是無(wú)性生殖過(guò)程,C項(xiàng)錯(cuò)誤;e細(xì)胞是處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞,并沒(méi)有完全完成減數(shù)分裂,D項(xiàng)錯(cuò)誤。歸納提升動(dòng)物細(xì)胞核移植的條件及結(jié)果(1)核移植一般選擇去核的卵母細(xì)胞,因?yàn)槁涯讣?xì)胞體積大,易操作,含有促使細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。一般不選擇生殖細(xì)胞作為供核細(xì)胞,因?yàn)樯臣?xì)胞與

15、正常體細(xì)胞相比,遺傳物質(zhì)減半。(2)核移植時(shí),一般先用電刺激使供受體細(xì)胞融合,再用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。(3)核移植過(guò)程中細(xì)胞核只來(lái)自于一個(gè)個(gè)體,因此核遺傳物質(zhì)與供核個(gè)體的相同,屬于無(wú)性繁殖,不會(huì)改變生物體的基因型。(4)克隆動(dòng)物的性狀與核供體生物的性狀基本相同,但不是完全相同,因?yàn)椋嚎寺?dòng)物的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)自于受體卵母細(xì)胞。生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān),還受環(huán)境的影響。課后作業(yè)1A在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前,先用胰蛋白酶使組織塊中的細(xì)胞相互分散開(kāi),以增加與培養(yǎng)液的接觸面積,便于培養(yǎng)。2A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境;一定的營(yíng)養(yǎng);一般與動(dòng)物相近的體溫和適宜

16、的pH以及氣體環(huán)境等。3A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的不同點(diǎn)主要有:原理不同:植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性;而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理則是有絲分裂;培養(yǎng)基不同:植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還有血清、血漿等;結(jié)果不同:植物組織培養(yǎng)最終培養(yǎng)為完整的植株,而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)最后形成細(xì)胞株或細(xì)胞系。4B由于出生的小羊的細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)和提供細(xì)胞核的甲羊相同,所以小羊大多數(shù)性狀像甲。但由于乙提供了細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)中線粒體DNA也會(huì)發(fā)揮作用,所以小羊的性狀不會(huì)和甲羊完全一樣。5B在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中所用的是固體培養(yǎng)基,而在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需制成單個(gè)懸浮細(xì)胞,

17、用的是液體培養(yǎng)基。6D在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),用的是健康幼齡動(dòng)物細(xì)胞或胚胎,這類(lèi)細(xì)胞有旺盛的分裂能力。7C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)到4050代時(shí)的細(xì)胞叫做細(xì)胞株,其遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變。在之后的培養(yǎng)中,有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并帶有癌變性質(zhì),有可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞系。8C“全能性”是指細(xì)胞發(fā)育成完整生物體的潛能。上述技術(shù)并未產(chǎn)生出完整的個(gè)體,只是產(chǎn)生了外形和功能都與真的血管一樣的動(dòng)脈血管。所以這項(xiàng)技術(shù)的關(guān)鍵并非要激發(fā)血管細(xì)胞的“全能性”,而是要激發(fā)血管細(xì)胞發(fā)育成血管的潛能。9B克隆實(shí)質(zhì)上就是一種無(wú)性繁殖,題中A、D兩項(xiàng)都是細(xì)胞水平的克隆,C項(xiàng)是指植物的營(yíng)養(yǎng)生殖,也屬

18、于克隆的范疇。B項(xiàng)使某些特定的外源基因在哺乳動(dòng)物體內(nèi)表達(dá),這屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)。10(1)D(2)基因工程(轉(zhuǎn)基因技術(shù))動(dòng)物細(xì)胞核移植(3)雌相同(4)卵母細(xì)胞中的核物質(zhì)會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)基因重組細(xì)胞產(chǎn)生干擾(5)為器官移植提供供體;研究疾病的發(fā)展進(jìn)程和治療疾病等解析(1)胚胎干細(xì)胞是來(lái)自于發(fā)育的胚胎,它可以形成一個(gè)個(gè)體。(2)圖中A的操作對(duì)象是基因,而B(niǎo)過(guò)程中是一個(gè)細(xì)胞核與另一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)重組。(3)圖中小牛1、2、3細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)均來(lái)自雌性母牛胚胎,所以都為雌性,而且大部分性狀相同。(4)受體卵母細(xì)胞核中含有大量遺傳物質(zhì),會(huì)對(duì)移入的轉(zhuǎn)基因重組細(xì)胞形成干擾,所以要去除。(5)克隆技術(shù)是一項(xiàng)新的技術(shù),操作時(shí)有一定困難,但在器官移植中器官的提供方面有較大前景。11(1)基因工程技術(shù)、核移植技術(shù)、胚胎移植技術(shù)(2)目的基因從基因文庫(kù)獲取、PCR技術(shù)擴(kuò)增、人工合成不能獨(dú)立

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