液相色譜常見問題及其對策

1、液相色譜常見問題及其對策現(xiàn)象：無壓力，流動相不流動可能原因1、保險絲斷或電源問題2、柱塞桿折斷3、泵頭內有空氣或流動相不足4、單向閥損壞5、漏液6、壓力傳感器損壞(流動相流動正常，但無壓力)現(xiàn)象：壓力持續(xù)偏高或不斷上升1、流速設定過高2、保護柱或柱子篩板堵塞3、流動相使用不當或有緩沖鹽出4、色譜柱選擇不當5、進樣閥損壞現(xiàn)象：壓力持續(xù)偏低1、流速設定過低2、色譜柱選擇不當3、柱溫過高4、系統(tǒng)漏液現(xiàn)象：壓力波動可能原因1、泵頭中有氣泡2、單向閥損壞3、柱塞密封圈損壞4、脫氣不充分5、系統(tǒng)漏液6、使用了梯度洗脫接頭處漏液1、接頭處松動2、接頭磨損3、接頭被污染泵漏液1、單向閥松動2、泵密封損壞3、接

2、頭松動（不要擰的太緊）進樣閥漏液可能原因1、轉子密封損壞2、定量環(huán)堵塞3、進樣口密封松動4、進樣針尺寸不合適5、廢液管產(chǎn)生虹吸6、廢液管堵塞檢測器漏液可能原因1、流通池墊片損壞2、流通池透鏡破碎3、手緊接頭處漏液4、廢液管堵塞5、流通池堵塞保留時間漂移保留時間漂移可能原因1、柱溫變化2、流動相組分變化3、色譜柱沒有平衡4、流速變化5、泵中有氣泡6、流動相選擇不當7、緩沖容量不夠基線漂移基線漂移可能原因 1、溫度波動 2、流動相不均勻(脫氣，使用純度更高的溶劑) 3、流通池被污染或有氣泡 4、流動相配比不當或流速變化 5、柱子平衡（約3060min） 6、流動相污染，變質或由低品質溶劑配成 7、

3、樣品中有強保留的物質以饅頭樣峰被洗出 8、檢測器沒有設定在最大吸收波長處基線噪聲（規(guī)則的）基線噪聲（規(guī)則的）可能原因1、流動相、泵、檢測器中有氣泡2、有地方漏液3、流動相混和不均勻4、溫度影響（檢測器和柱溫差別太大）5、其他電子設備的影響基線噪聲（不規(guī)則的）基線噪聲（不規(guī)則的）可能原因1、流動相污染、變質或由低質溶劑配成2、有地方漏液3、流動相各溶劑不相溶或混和不均勻4、檢測池能量不足5、系統(tǒng)內有氣泡 前沿峰、拖尾峰前沿峰、拖尾峰 可能原因 1、柱塞板堵塞 2、色譜柱塌陷 3、干擾峰 4、柱溫過低 5、緩沖不足或不合適 6、重金屬污染 7、樣品溶劑選擇不當 8、樣品過載分叉峰分叉峰可能原因1、

4、保護柱或分析柱污染2、樣品溶劑不溶于流動相峰展寬1. 進樣體積過大2. 流動相粘度過高3. 檢測池體積過大4. 保留時間過長5. 樣品過載鬼峰1、進樣閥殘余峰2、柱未平衡3、水污染4、柱未平衡 重新平衡柱,用流動相作樣品溶劑 (尤其是離子對色譜) 維護流程圖吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過濾器手動進樣器檢測器吸濾頭吸濾頭材料：不銹鋼燒結，孔徑10um故障：堵塞表現(xiàn)：管路中不斷有氣泡生成措施：用520的稀硝酸，超聲波清洗，再用蒸餾水清洗注意點：吸濾頭拆下時不必將塑料管剪斷單向閥單向閥故障1：寶石球粘附于墊片表現(xiàn)：泵無法吸液或排液，流路不通措施：1）用針筒抽出口單向閥以產(chǎn)生壓，使寶石球與墊片分開2）拆

5、下單向閥，放入異丙醇或水中，用超聲波清洗故障2：寶石球或塑料墊片受污導致密封不好表現(xiàn)：系統(tǒng)壓力波動大措施：拆下單向閥，放入異丙醇或水中，用超聲波清洗故障：密封圈磨損而導致密封不良現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動大或漏液措施：更換密封圈注意點：更換密封圈 拆卸泵頭前，柱塞桿復位手動進樣閥故障：轉子密封損壞現(xiàn)象：漏液原因：a 擰的太緊b 樣品太臟c 針頭損壞或不使用液相專用針解決措施：更換轉子密封，并在使用時注意保養(yǎng)手動進樣閥故障：載樣困難原因：a 定量環(huán)堵塞b 進樣器污染解決措施：清洗或更換定量環(huán)、進樣器柱子故障：系統(tǒng)高壓、峰型變差（拖尾峰、前沿峰、分叉峰），保留時間的改變解決措施：清洗正相柱，正庚烷、氯仿、

6、乙酸乙酯、丙酮、乙醇反相柱，甲醇、乙腈、氯仿、異丙醇、稀硫酸峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因1. 柱子劣化柱子劣化（進口處產(chǎn)生不均勻的空隙）（進口處產(chǎn)生不均勻的空隙）2. 樣品劣化樣品劣化（生成氧化物、分解物等）（生成氧化物、分解物等）判斷標準判斷標準所有的峰都產(chǎn)生有肩峰或分叉時則為柱子劣化所有的峰都產(chǎn)生有肩峰或分叉時則為柱子劣化延長柱壽命方法：延長柱壽命方法：倒沖柱倒沖柱換過濾片換過濾片修補柱頭修補柱頭 分析柱的維護 1、在使用新柱之前，最好用強溶劑在低流量下 ml/min)沖洗30 mins，長時間未用的分析柱也要同樣處理 2、定期使用強溶劑沖洗柱子 3、使用緩沖鹽時，要先用水

7、沖洗，再用有機溶劑沖洗 4、凈化樣品 5、分離條件 6、不使用時，要蓋上蓋子，避免固定相干枯 7、使用預柱 8、避免流動相組成及極性的劇烈變化 9、避免壓力脈沖的劇烈變化更換氘燈更換氘燈（紫外檢測器）判斷氘燈能量：設定220nm波長，檢查參比池能量，如 能量低于800，需更換氘燈。操作注意點：不要用手直接接觸氘燈表面一、脫氣除去流動相中溶解或因混合而產(chǎn)生的氣泡氣泡對測定的影響：1）泵中氣泡使液流波動，改變保留時間和峰面積2）柱中氣泡使流動相繞流，峰變形3）檢測器中的氣泡產(chǎn)生基線波動脫氣的目的脫氣的目的1. 防止由氣泡的產(chǎn)生引起的故障2. 防止由溶解（在液體中的）氣體量的變動引起的檢測不穩(wěn)定程度1）示差折射率檢測器*使折射率變化2）UV檢測器（200nm以下）*溶解氧氣有吸收二、緩沖液二、緩沖液選擇緩沖液的步