顯微鏡的原理和使用方法

1、顯微鏡的原理和使用方法-裝片的制作一. 教學(xué)內(nèi)容：顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用、裝片的制作（注：從本周開(kāi)始轉(zhuǎn)入復(fù)習(xí)階段） 二. 重點(diǎn)和難點(diǎn)重點(diǎn)：顯微鏡的原理和使用方法、裝片的制作難點(diǎn)：熟練掌握顯微鏡的使用及相關(guān)知識(shí)的應(yīng)用和遷移，解決相關(guān)操作問(wèn)題，對(duì)相應(yīng)的題型能做出科學(xué)的分析，得出正確的答案。 三. 具體內(nèi)容顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用（2）顯微鏡的成像 光源（天然光或人工光源）反光鏡光圈物體物鏡（凸透鏡）在鏡筒內(nèi)形成物體放大的實(shí)像目鏡把經(jīng)物鏡形成放大的實(shí)像進(jìn)一步放大 顯微鏡放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)（3）高倍顯微鏡的使用 用低倍顯微鏡觀察取鏡與安放：  

2、                   a. 右手握鏡臂，左手托鏡座。b. 顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的前方稍偏左。對(duì)光 ：              a. 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。b. 選一較大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔，左眼注視目境，轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，使光線通過(guò)通光孔反射到鏡筒內(nèi)，通過(guò)目鏡，可能看到自亮

3、的視野。低倍鏡觀察：              a. 把所要觀察的玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上，用壓片夾壓住，標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中心。 b. 轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止（此時(shí)實(shí)驗(yàn)者的眼睛應(yīng)當(dāng)看物鏡鏡頭與標(biāo)本之間，以免物鏡與標(biāo)本相撞）。c. 左眼看目鏡內(nèi)，同時(shí)反向緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒上升，直到看到物像為止，再稍稍轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物像更加清晰。 高倍鏡觀察       a.

4、移動(dòng)裝片，在低倍鏡下使需要放大觀察的部分移動(dòng)到視野中央。b. 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，移走低倍物鏡，轉(zhuǎn)換為高倍物鏡。c. 調(diào)節(jié)光圈，使視野亮度適宜。    d. 緩緩調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使物像清晰 注意事項(xiàng)a. 使用顯微鏡一定要嚴(yán)格按照取鏡安放對(duì)光壓片觀察的程序進(jìn)行。b. 下降鏡筒時(shí)，一定要用雙眼從側(cè)面注視物鏡，使之接近裝片，但又要防止鏡頭觸及裝片。否則會(huì)壓碎裝片和損壞物鏡（l0x物鏡的工作距離為0. 5-1 cm）。c. 有必要使用高倍物鏡時(shí)，必須先在低倍物鏡下將目標(biāo)移到視野的中心，然后換用高倍物鏡。因?yàn)樵诘捅段镧R下看到的物像放大倍數(shù)小，但看到的標(biāo)本實(shí)際面積大，容易找到目標(biāo)；與

5、低倍物鏡相比，高倍物鏡下看到的物像人，同樣的視野面積看到的標(biāo)本的實(shí)際面積小，在裝片不動(dòng)的情況下，高倍物鏡看到的只是低倍物鏡視野的中心部分。d. 換高倍物鏡時(shí)，千萬(wàn)不可將鏡筒升高，正確的做法是直接轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，換上高倍物鏡即可。e. 使用高倍物鏡之后，透鏡與裝片之間的距離很近，使用粗準(zhǔn)焦螺旋容易壓碎玻片和損壞透鏡，或者由于物像一閃而過(guò)，找不到要觀察的目標(biāo)因此，必須用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦，細(xì)準(zhǔn)焦螺旋只在調(diào)節(jié)圖像清晰度時(shí)使用。 原理說(shuō)明1. 識(shí)別鏡頭：（1）目鏡：裝在鏡筒的上端，通常備有23個(gè)，上面刻有5×、10×或15×符號(hào)以表示其放大倍數(shù)，一般裝的是10×的目鏡。

6、放大倍數(shù)越大鏡筒越短。（2）物鏡：裝在鏡筒下端的轉(zhuǎn)換器上，一般有2-3個(gè)物鏡，其中最短的刻有“10×”符號(hào)的為低倍鏡，較長(zhǎng)的刻有“40×”符號(hào)的為高倍鏡，放大倍數(shù)越大鏡筒越長(zhǎng)2. 放大倍數(shù)：顯微鏡的放大倍數(shù)是物鏡的放大倍數(shù)與目鏡的放大倍數(shù)的乘積，如物鏡為10×，目鏡為10×，其放大倍數(shù)就為10×10=100。放大的是物體的直線長(zhǎng)度和寬度而不是面積。3. 工作距離：是指顯微鏡處于工作狀態(tài)（物象調(diào)節(jié)清楚）時(shí)物鏡的下表面與蓋玻片（蓋玻片的厚度一般為0.17mm）上表面之間的距離，物鏡的放大倍數(shù)愈大，它的工作距離愈小。如物鏡是10×的工作距離

7、比物鏡是40×的工作距離大。 4. 明暗程度：（1）顯微鏡用光源，自然光和燈光都可以，以燈光較好，因光色和強(qiáng)度都容易控制。（2）反光鏡它有平、凹兩面，再經(jīng)通光孔照至標(biāo)本。可向任意方向轉(zhuǎn)動(dòng)，凹面鏡聚光作用強(qiáng)，適于光線較弱時(shí)使用，平面鏡聚光作用弱，適于光線較強(qiáng)時(shí)使用。（3）光圈或遮光器在通光孔下方，光圈由十幾張金屬薄片組成，其外側(cè)伸出一柄，推動(dòng)它可調(diào)節(jié)其開(kāi)孔的大小，以調(diào)節(jié)進(jìn)光量；遮光器由幾個(gè)直徑大小不同的孔組成，選擇某一孔以確定進(jìn)光量。5. 物像：鏡下見(jiàn)到的是完全的倒像，即標(biāo)本位于玻片右上角時(shí)在鏡下的左下角位置出現(xiàn)，移動(dòng)的規(guī)律是物象在鏡下的左下角時(shí)將玻片向左下角移動(dòng)可以將物象移到視野的中

8、央來(lái)。但是物體的運(yùn)動(dòng)方向不變，即標(biāo)本中細(xì)胞質(zhì)是順時(shí)針?lè)较蛄鲃?dòng)的，鏡下仍為順時(shí)針流動(dòng)。6. 污物的位置：在視野中常看到污物，要明確污物不會(huì)在反光鏡上，因?yàn)榉垂忡R的作用是將光源光線反射到玻片標(biāo)本上；確定污物的位置首先移動(dòng)玻片如污物隨之移動(dòng)即污物在玻片上；如污物不動(dòng)，再轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡污物也隨之轉(zhuǎn)動(dòng)即污物在目鏡上；否則在物鏡上。7. 普通光學(xué)顯微鏡下可以見(jiàn)到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有：細(xì)胞壁、細(xì)胞核、液泡、葉綠體、線粒體、核仁，在質(zhì)壁分離時(shí)可見(jiàn)到細(xì)胞膜，有絲分裂時(shí)可見(jiàn)到染色體。8. 玻片標(biāo)本：必須是透明的，要使光線能透過(guò)標(biāo)本內(nèi)部。常用的種類有切片（洋蔥根尖縱切片）；裝片（洋蔥表皮臨時(shí)裝片）；壓片（洋蔥根尖臨時(shí)壓片觀察有絲

9、分裂）；涂片（血涂片、自生固氮菌的臨時(shí)涂片）。 相關(guān)原理例析1. 物像放大問(wèn)題<1> 放大的對(duì)象：放大的是所觀察的物體的長(zhǎng)或?qū)捈矗哼呴L(zhǎng)被放大的倍數(shù)，不是指面積、體積的放大倍數(shù)。 <2> 放大倍數(shù)=目鏡倍數(shù)×物鏡倍數(shù)如：目鏡為20×；物鏡為10×，則放大倍數(shù)為20×10=200倍細(xì)胞面積的放大倍數(shù)為2002 =40000倍<3> 放大倍數(shù)越大，物像越大，視野越小放大倍數(shù)越小，物像越小，視野越大如圖：左圖是放大10倍的物像，右圖是放大20倍時(shí)的物像，非常明顯放大倍數(shù)小，細(xì)胞物像小，但看到的細(xì)胞數(shù)目多，視野大；放大倍數(shù)大，細(xì)

10、胞物像大，但看到的細(xì)胞數(shù)目少，視野?。?lt;4> 物鏡越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越大；目鏡越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越小。2. 物像方位問(wèn)題觀察著從顯微鏡看到的是上下顛倒、左右顛倒的象。 成像原理圖解如下：光線反光鏡遮光器通光孔標(biāo)本（一定要透明）物鏡的透鏡（第一次放大成倒立實(shí)像）鏡筒目鏡（再放大成虛像）眼 舉例說(shuō)明載玻片上物體形態(tài)與鏡中物像之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系：例一：分析：從例一可以讓學(xué)生體會(huì)顯微鏡下圖像與裝片上物體上下顛倒、左右顛倒的位置關(guān)系，進(jìn)而得出判斷物像的簡(jiǎn)便方法：即把紙張旋轉(zhuǎn)1800直接觀察。例二：分析：可以先讓學(xué)生判斷裝片下的物體狀態(tài)在鏡下的圖像，通過(guò)此例可以讓學(xué)生明白鏡下觀察到的物體旋轉(zhuǎn)的方向與實(shí)際旋

11、轉(zhuǎn)方向相同，并不是象部分學(xué)生所想當(dāng)然的相反，而且也符合上下顛倒、左右顛倒的規(guī)律。3. 物像明暗問(wèn)題 光圈小，成像暗；光圈大，成像亮 用平面反光鏡，成像相對(duì)暗；用凹面反光鏡，成像相對(duì)亮 高倍鏡下視野暗；低倍鏡下視野亮注：由于人眼感受物像的明暗是由進(jìn)入人眼的光照強(qiáng)弱、光線多少?zèng)Q定的，因此對(duì)于不難理解，但在教學(xué)中會(huì)有很多師生對(duì)于的理解不是很好，其實(shí)就其原因還是由于進(jìn)入人眼的光線多少造成的。因?yàn)榈捅剁R視野大，看到的細(xì)胞多，高倍鏡視野小，看到的細(xì)胞少，即：高倍鏡下只有透過(guò)少量細(xì)胞的光線進(jìn)入到人眼中，就感覺(jué)視野一些；低倍鏡下透過(guò)較多細(xì)胞的光線進(jìn)入到人眼中，就感覺(jué)視野亮一些。臨時(shí)裝片的制作：（1）準(zhǔn)備：1.

12、 用潔凈的紗布把載玻片和蓋玻片擦拭干凈。2. 把載玻片放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，用吸管在載玻片的中央滴一滴清水 （2）制片3. 用鑷子取材。（如：從洋蔥鱗片葉子內(nèi)側(cè)的表皮上，撕取一小塊透明薄膜）4. 把材料（如：撕下的薄膜）浸入載玻片上的水滴中，用鑷子把薄膜展平。5. 用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，然后輕輕地蓋在薄膜上，避免蓋玻片下面出現(xiàn)氣泡。 【典型例題】例1 觀察細(xì)胞中染色體行為并計(jì)數(shù)時(shí)，使用光學(xué)顯微鏡的正確方法是（    ）A. 低倍鏡對(duì)焦，將觀察目標(biāo)移至視野中央，轉(zhuǎn)用高倍鏡并減少光量，調(diào)焦觀察B. 低倍鏡對(duì)焦，將觀察目標(biāo)移至視野

13、中央，轉(zhuǎn)用高倍鏡并增加光量，調(diào)焦觀察C. 低倍鏡對(duì)焦，換用高倍鏡，將觀察目標(biāo)移至視野中央，增加光量，調(diào)焦觀察D. 高倍鏡對(duì)焦，將觀察目標(biāo)移至視野中央，增加光量，調(diào)焦觀察答案：B解析：正確使用低倍鏡 ：正確使用低倍鏡的操作程序是：取鏡、對(duì)光、安裝片、下降鏡筒、調(diào)焦。下降鏡筒時(shí)，必須雙眼注視鏡和裝片的距離，以免壓壞裝片和碰壞物鏡。高倍顯微鏡的使用：（1）在低倍鏡下將物像調(diào)到最清晰；（2）將所要放大的部位移至視野中央；（3）轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，換高倍物鏡；（4）調(diào)整反光鏡和光圈，使視野亮度適宜；（5）左眼注視目鏡內(nèi)，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋（約半圈），使鏡筒緩緩上升直到看清物像。 例2 小華觀察同一標(biāo)本

14、4次，每次除調(diào)整放大倍率外，其他條件都未變動(dòng)，結(jié)果如圖問(wèn)：視野亮度最弱的是哪一個(gè)？（    ）答案：B解析：低倍鏡換成高倍鏡后的視野變小，亮度變暗，細(xì)胞變大，數(shù)目變少； 例3 使用顯微鏡觀察水中微小生物，若發(fā)現(xiàn)鏡中生物往圖7中圓圈內(nèi)所示方向游走，請(qǐng)問(wèn)你該把載玻片往哪個(gè)方向移動(dòng)才不至于使微小生物從視野中消失（    ）A. 甲    B. 乙   C. 丙   D. 丁答案：C解析：顯徽鏡下看到的是倒像 例4 在光照明亮的實(shí)驗(yàn)室中，用白色洋蔥表皮做

15、質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)。在顯微鏡視野中清晰地看到細(xì)胞壁，但看不清細(xì)胞是否發(fā)生了質(zhì)壁分離，為了解決這一問(wèn)題應(yīng)（    ）A. 改用凹面反光鏡，放大光圈B. 改用凹面反光鏡，縮小光圈C. 改用平面反光鏡，放大光圈D. 改用平面反光鏡，縮小光圈答案：D 解析：顯徽鏡的用光（1）對(duì)于折光性較強(qiáng)的材料，觀察視野光線過(guò)強(qiáng)，往往易看清結(jié)構(gòu)，卻極易造成眼睛疲勞，影響實(shí)驗(yàn)效率。觀察洋蔥表皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)時(shí)，由于原生質(zhì)層較薄，故在視野較暗時(shí)，觀察效果較好。（2）觀察視野過(guò)暗，也會(huì)看不清物像，影響效果。對(duì)比較厚的材料或顏色較深的材料，應(yīng)增大通光量。觀察視野的明暗程度應(yīng)以眼睛感到舒適為宜。 【

16、模擬試題】1. 下圖表示光學(xué)顯微鏡的一組鏡頭，目鏡標(biāo)有5×和15×字樣，物鏡標(biāo)有10×和40×字樣。請(qǐng)看圖回答：（1）要仔細(xì)觀察葉綠體的形態(tài)時(shí)，顯微鏡的目鏡、物鏡及其與蓋玻片間距離的組合為_(kāi)（用標(biāo)號(hào)作答）。此時(shí)放大的倍數(shù)為         。（2）在觀察中，和的顯微視野中比較明亮的是               。（3）若在低倍鏡視野中發(fā)

17、現(xiàn)有一異物，當(dāng)移動(dòng)裝片時(shí)，異物不動(dòng)，轉(zhuǎn)換高倍鏡后，異物仍可觀察到，此異物可能存在于（    ）A. 物鏡上      B. 目鏡上      C. 裝片上      D. 反光鏡上2. 觀察葉綠體時(shí)，下列哪種材料不能直接放在載玻片上（    ）A. 葫蘆蘚的葉片          

18、0;            B. 黃楊葉橫切片C. 南瓜葉片                          D. 沾有少數(shù)葉肉細(xì)胞3. 下列關(guān)于葉綠體在細(xì)胞中的分布，正確的是（    ）A. 在強(qiáng)光下，葉綠體以其較小的面對(duì)著光

19、源，以利于接受較多的光B. 在弱光下，葉綠體以其較大的面對(duì)著光源，可以接受更多的光C. 在弱光下，葉綠體會(huì)較多地聚集在背光一側(cè)D. 在一般的葉片，背光面的細(xì)胞中含有較多的葉綠體4. 用小麥根尖成熟區(qū)表皮細(xì)胞觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)時(shí)，由于根細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)無(wú)色透明，難于觀察到細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)，這時(shí)需采取的措施是（    ）A. 縮小光圈，用弱光線                    B. 開(kāi)大

20、光圈，用弱光線C. 縮小光圈，用強(qiáng)光線                    D. 開(kāi)大光圈，用強(qiáng)光線5. 在觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)時(shí)，把葉綠體等顆粒作為細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)的標(biāo)志物是因?yàn)椋?#160;   ）A. 光學(xué)顯微鏡下看到的細(xì)胞器只有葉綠體B. 如果沒(méi)有標(biāo)志物，細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)就難以察覺(jué)C. 只有葉綠體等顆?？梢砸苿?dòng)，細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)不流動(dòng)D. 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)是流動(dòng)的，細(xì)胞器是隨細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的流動(dòng)被動(dòng)運(yùn)動(dòng)的6.

21、 在觀察顯微鏡時(shí)，經(jīng)常遇到以下4種現(xiàn)象：（1）視野太亮；（2）只見(jiàn)視野不見(jiàn)圖像；（3）圖象結(jié)構(gòu)不完整。試分析出現(xiàn)這些現(xiàn)象的可能原因，并提出排除方法。7. 用顯微鏡觀察同一材料的同一部分時(shí)，高倍鏡視野與低倍鏡視野相比前者（    ）A. 亮，看到的細(xì)胞數(shù)目多         B. 暗，看到的細(xì)胞數(shù)目少C. 亮，看到的細(xì)胞數(shù)目少         D. 暗，看到的細(xì)胞數(shù)目多8,. 用顯微鏡觀察葫蘆蘚葉的裝片時(shí)，為

22、使視野內(nèi)看到的細(xì)胞數(shù)目最多，應(yīng)選用（    ）A. 目鏡5×，物鏡10×                           B. 目鏡10×，物鏡15×C. 目鏡5×，物鏡40×      

23、;                     D. 目鏡10×，物鏡40×9. 光學(xué)顯微鏡所能分辨的最小長(zhǎng)度單位是（    ）A. 厘米（cm）                B. 毫米（mm） 

24、60;         C. 微米（m）                 D. 納米（nm）10. 用顯微鏡觀察裝片時(shí)，要將物像從視野的左方移到正中，裝片的移動(dòng)方向應(yīng)是（    ）A. 向右方           

25、60; B. 向上方      C. 向左方             D. 向下方11. 某學(xué)生在顯微鏡下觀察落花生子葉的切片，當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，有部分細(xì)胞看得清晰，另一部分細(xì)胞較模糊，這是由于（    ）A. 反光鏡未調(diào)節(jié)好              &#

26、160;     B. 標(biāo)本切得厚薄不均C. 細(xì)準(zhǔn)焦螺旋未調(diào)節(jié)好             D. 顯微鏡物鏡損壞12. 下面是用普通光學(xué)顯微鏡觀察時(shí)的幾個(gè)操作步驟，在顯微鏡下要把視野中的物像從如圖中I轉(zhuǎn)為II，正確簡(jiǎn)便的操作步驟一般是（     ） 轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋            調(diào)節(jié)

27、光圈         轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋     轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器                   移動(dòng)標(biāo)本A.                 

28、    B. C.                     D. 13. 用顯微鏡的一個(gè)目鏡分別與4個(gè)不同倍數(shù)的物鏡組合起來(lái)觀察已發(fā)生質(zhì)壁分離的細(xì)胞裝片。當(dāng)成像清晰時(shí)，每一物鏡與載玻片的距離如圖6-3所示。如果載玻片位置不變，用哪一物鏡在一個(gè)視野中看到的細(xì)胞最多？14. 一個(gè)細(xì)小物體被顯微鏡放大50倍，這里“被放大50倍”指放大該細(xì)小物體的（   ）A. 體

29、積         B. 表面積             C. 像的面積         D. 長(zhǎng)度或?qū)挾?5. 當(dāng)顯微鏡的目鏡為10×，物鏡為10×時(shí)，在視野直徑范圍內(nèi)可看到相連的8個(gè)細(xì)胞。若目鏡不變，物鏡換成40×時(shí)，則在視野中可以看到這8個(gè)細(xì)胞中的（   

30、; ）A. 2個(gè)           B. 4個(gè)                  C. 16個(gè)                D. 32個(gè)16. 顯微鏡視野中用于指示的“指針”是用頭發(fā)制作的，這根頭發(fā)應(yīng)安放在（    ）A. 物鏡內(nèi)      B. 目鏡內(nèi)  &