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文檔簡介
1、精品文檔第五章 微生物營養(yǎng)習(xí)題及參考答案一、名詞解釋1生長因子:2選擇培養(yǎng)基 (seclected media)3基礎(chǔ)培養(yǎng)基4合成培養(yǎng)基5化能異養(yǎng)微生物6化能自養(yǎng)微生物7光能自養(yǎng)微生物8光能異養(yǎng)微生物9. 單純擴(kuò)散10. 促進(jìn)擴(kuò)散11. 主動運(yùn)輸12. 基團(tuán)移位13. pH 的內(nèi)源調(diào)節(jié)14. 滲透壓15. 水活度、填空題1微生物生長繁殖所需六大營養(yǎng)要素是 和 等。精品文檔2碳 源物質(zhì)為 微生物 提供 和 有、碳源物質(zhì)主要、等。3生長因子主要包括、 和 ,其主要作用是4根據(jù),微生物可分為自養(yǎng)型和異養(yǎng)型。5根據(jù),微生物可分為光能營養(yǎng)型和化能營養(yǎng)型。6根據(jù) ,微生物可分為無機(jī)營養(yǎng)型和有機(jī)營養(yǎng)型。微生
2、物的營養(yǎng)類型可分為、和和。、和等 4 種類型。7根據(jù)碳源、 能源和電子供體性質(zhì)的不同, 和。8按用途劃分,培 養(yǎng)基 可分為 9常用的培養(yǎng)基凝固劑有、10營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式有三、選擇題( 4 個答案選 1) 1下列物質(zhì)可用作生長因子的是( )。A. 葡萄糖 B. 纖維素 C.NaGl D. 葉酸 2大腸桿菌屬于()型的微生物。A. 光能無機(jī)自養(yǎng) B. 光能有機(jī)異養(yǎng) C. 化能無機(jī)自養(yǎng) D. 化能有機(jī)異養(yǎng) 3硝化細(xì)菌屬于()型的微生物。A. 光能無機(jī)自養(yǎng) B. 光能有機(jī)異養(yǎng) C. 化能無機(jī)自養(yǎng) D. 化能有機(jī)異養(yǎng)4某種細(xì)菌可利用無機(jī)物為電子供體而有賈稀為碳源,屬于()型的微生物。A. 兼養(yǎng)型
3、B. 異養(yǎng)型 C. 自養(yǎng)型 D. 原養(yǎng)型 5、化能無機(jī)自養(yǎng)微生物可利用()為電子供體。A.CO2 B.H 2 C.O 2 D.H2O6用來分離產(chǎn)胞外蛋白酶菌株的酪素培養(yǎng)基是一種()。A. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 B. 加富培養(yǎng)基 C. 選擇培養(yǎng)基 D. 鑒別培養(yǎng)基7、固體培養(yǎng)基中瓊脂含量一般為()。A.0.5% B.1.5% C.2.5% D.5% 8用來分離固氮菌的培養(yǎng)基中缺乏氮源,這種培養(yǎng)基是一種()。A. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 B. 加富培養(yǎng)基 C. 選擇培養(yǎng)基 D. 鑒別培養(yǎng)基9水分子可通過()進(jìn)入細(xì)胞。A. 主動運(yùn)輸 B. 擴(kuò)散 C. 促進(jìn)擴(kuò)散 D. 基團(tuán)轉(zhuǎn)位 10被運(yùn)輸物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞前后物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的
4、是()。A.主動運(yùn)輸 B. 擴(kuò)散 C. 促進(jìn)擴(kuò)散D. 基團(tuán)轉(zhuǎn)位四、是非題1. 某些假單胞菌可以利用多達(dá)90 多種以上的碳源物質(zhì)。2. 碳源對配制任何微生物的培養(yǎng)基都是必不可少的。3. 氨基酸在碳源缺乏時可被微生物用作碳源物質(zhì),但不能提供能源。4. 培養(yǎng)營養(yǎng)缺陷型微生物的培養(yǎng)基必須同時加入維生素、氨基酸、嘌呤及嘧啶。5. 為使微生物生長旺盛,培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好。6 .對含葡萄糖的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時可以121.3 C加熱20min即可。7. 半固體培養(yǎng)基常用來觀察微生物的運(yùn)動特征。8. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)所有類型的微生物。9. 伊紅美藍(lán)( EMB )培養(yǎng)基中,伊紅美藍(lán)的作用是促
5、進(jìn)大腸桿菌的生長。10. 在促進(jìn)擴(kuò)散過程中,載體蛋白對被運(yùn)輸物質(zhì)具有較高的專一性,一種載體蛋白只能 運(yùn)輸一種物質(zhì)。五、簡答題1 .能否精確地確定微生物對微量元素的需求,為什么?2.為什么生長因子通常是維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶, 而葡萄糖通常不是生長因子?3 以伊紅美藍(lán)(EMB )培養(yǎng)基為例,分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。4. 與促進(jìn)擴(kuò)散相比,微生物通過主動運(yùn)輸吸收營養(yǎng)物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是什么?5. 舉例說明微生物在生長過程中培養(yǎng)基pH 值可能發(fā)生的變化,并提出解決方法。6有一培養(yǎng)基如下:甘露醇,MgS4, K2HPO4, H2PO4, CuS04, NaCl, CaC03,蒸餾水。試述該培養(yǎng)基的 A.碳
6、素來源;B.氮素來源;C.礦質(zhì)來源,該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)哪類微 生物?7.列表比較微生物的四大營養(yǎng)類型。8. 分析下述培養(yǎng)基各組分的作用,依據(jù)其功能推測其所屬培養(yǎng)基的類型:A .麥康開培養(yǎng)液: 蛋白胨 20g, 乳糖 10g, 牛膽酸鹽 5g,NaCl 5g, 水 1000ml,pH7.4 加 1% 中性紅 5ml 分裝與有發(fā)酵管的試管 0.7kg/km 2滅菌 15min ,用于腸道桿菌培養(yǎng)。B.檸檬酸鹽培養(yǎng)基:NH4H2PO4 1g , K2HPO 4 1g , NaCl 5g , MgSO 4 0.2g,檸檬酸鈉 2g, 瓊脂18g ,水100Oml , pH6.8加1%溴麝香草酚蘭10m
7、l , 1.1Kgcm2滅菌20分鐘,制成 斜面,用于細(xì)菌利用檸檬酸鹽試驗(yàn)。9簡述什么是主動運(yùn)輸和基團(tuán)轉(zhuǎn)位?二者有什么區(qū)別和聯(lián)系?六、論述題1 以紫色非硫細(xì)菌為例, 解釋微生物的營養(yǎng)類型可變性及對環(huán)境條件變化適應(yīng)能力的靈 活性。2如果要從環(huán)境中分離得到能利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物,你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?3某些微生物對生長因子的需求是具有較高的專一性,可利用它們通過“微生物分析” (microbiological assay )對樣品中維生素或氨基酸進(jìn)行定量。試設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)利用微生物對某一 樣品維生素 B12 的含量進(jìn)行分析。4某學(xué)生利用酪素培養(yǎng)基平板篩選產(chǎn)胞外蛋白酶細(xì)菌, 在酪素培養(yǎng)基平板上
8、發(fā)現(xiàn)有幾株 菌的菌落周圍有蛋白水解圈, 是否能僅憑蛋白水解圈與菌落直徑比大, 就斷定該菌株產(chǎn)胞外 蛋白酶的能力就大,而將其選擇為高產(chǎn)蛋白酶的菌種,為什么?5 以大腸桿菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)(PTS)為例解釋基團(tuán)轉(zhuǎn)位。6試分析在主動運(yùn)輸中, ATP 結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白( ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)系統(tǒng)和膜結(jié)合載體 蛋白(透過酶)系統(tǒng)的運(yùn)行機(jī) 機(jī)及相互區(qū)別。7 試設(shè)計(jì)一種分離纖維素分解菌的培養(yǎng)基,并說明各營養(yǎng)物質(zhì)的主要功能(只寫明成分,不要求定量) 。8 .試從能源、碳源的角度來比較Anabaena、Rhodospirillum、NitrobaCter、E.col i四種微生物的營養(yǎng)類型。微生
9、物營養(yǎng)習(xí)題參考答案一、名詞解釋1生長因子: 微生物生長不可缺少的微量有機(jī)物,包括維生素,氨基酸及堿基等2選擇培養(yǎng)基: 是用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。3基礎(chǔ)培養(yǎng)基: 是含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。4合成培養(yǎng)基: 是由化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基,也稱化學(xué)限定培養(yǎng) 基。5化能異養(yǎng)微生物: 以有機(jī)碳化合物為能源,碳源和供氫體也是有機(jī)碳化合物的微生 物。6化能自養(yǎng)微生物: 利用無機(jī)化合物氧化過程中釋放的能量和以CO2 為碳源生長的微生物。7光能自養(yǎng)微生物: 利用光作為能源,以 CO2 為基本碳源,供氫體是還原在無機(jī)化合 物的微生物。8光能
10、異養(yǎng)微生物: 以光為能源,以有機(jī)碳化合物作為碳源和供氫體營光合生長的微 生物。9. 單純擴(kuò)散 又稱被動運(yùn)輸,只疏水型雙分子層細(xì)胞膜(包括孔蛋白在內(nèi))在無載體蛋 白的參與下, 單純依靠物理擴(kuò)散的方式讓許多小分子, 非電離分子尤其是親水性小分子被動 通過的一種物質(zhì)運(yùn)送方式。 通過這種方式運(yùn)送的物質(zhì)主要是O2,CO2, 乙醇和某些氨基酸分子。10. 促進(jìn)擴(kuò)散 指溶質(zhì)在運(yùn)送過程中, 必須借助存在于細(xì)胞膜上的底物特異載體蛋白的協(xié) 助,但步消耗能量的一類擴(kuò)散性運(yùn)送方式。載體蛋白有時稱作滲透酶,移位酶或移位蛋白, 一般通過誘導(dǎo)產(chǎn)生, 它借助自身構(gòu)象的變化, 在不耗能的條件下可加速把膜外高濃度的溶質(zhì) 擴(kuò)散到膜
11、內(nèi),直至膜內(nèi)外該溶質(zhì)的濃度相等為止。11. 主動運(yùn)輸 指一類須提供能量(包括 ATP質(zhì)子動勢或離子泵等)并通過細(xì)胞膜上特 異性載體蛋白構(gòu)想的變化,而使膜外環(huán)境中低濃度的溶質(zhì)運(yùn)入膜內(nèi)的一種運(yùn)送方式。12. 基團(tuán)移位 指一類既需要特異性載體蛋白的參與,又需耗能的一種物質(zhì)運(yùn)送方式。其 特點(diǎn)是溶質(zhì)在運(yùn)送前后還會發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化。 主要用于運(yùn)送各種糖類, 核苷酸, 丁酸和 腺嘌呤等物質(zhì)??苛姿徂D(zhuǎn)移酶系統(tǒng)即磷酸烯醇式丙酮酸 - 己糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)進(jìn)行。13. pH的內(nèi)源調(diào)節(jié) 由于微生物的生長,代謝過程中會產(chǎn)生引起培養(yǎng)基的PH改變的代謝產(chǎn)物, 如步及時調(diào)節(jié),就會抑制甚至殺死自身,因而在設(shè)計(jì)此類培養(yǎng)基時,就
12、要考慮培養(yǎng)基成分對PH的調(diào)節(jié)能力,這種通過培養(yǎng)基內(nèi)內(nèi)在成分所起的調(diào)節(jié)作用,稱PH的內(nèi)源調(diào)節(jié)。14. 滲透壓 是某水溶液中一個可用壓力來量度的物化指標(biāo)。 它表示兩種不同濃度的溶液間若被一個半透性薄膜隔開時,稀溶液中的水分子會因水勢的推動而透過薄膜流向濃溶液, 直至濃溶液所產(chǎn)生的機(jī)械壓力足以使兩邊水分子的進(jìn)出達(dá)到平衡為止,這時由濃溶液中的溶質(zhì)所產(chǎn)生的機(jī)械壓力,既為它的滲透壓值。15. 水活度 表示在天然或人為環(huán)境中,微生物可實(shí)際利用的自由水或游離水的含量。其 定量含義為:在同溫同壓下,某溶液的蒸汽壓與純水蒸汽壓之比。二、填空題1 碳源,氮源,無機(jī)鹽,生長因子,水,能源2碳素來源,能源,糖,有機(jī)酸,
13、醇,脂,烴3維生素,氨基酸,嘌呤和嘧啶,作為酶的輔基或輔酶,合成細(xì)胞結(jié)構(gòu)及組分的前體 4碳源性質(zhì)5能源6電子供體7光能無機(jī)自養(yǎng) 光能有機(jī)異養(yǎng) 化能無機(jī)自養(yǎng) 化能有機(jī)異養(yǎng)8基礎(chǔ),加富,鑒別,選擇9瓊脂,明膠,硅膠10擴(kuò)散,促進(jìn)擴(kuò)散,主動運(yùn)輸,膜泡運(yùn)輸三、選擇題1D;2D;3C;4 A;5B;6D;7B;8C;9B;10D四、是非題1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 五、簡答題1能否精確地確定微生物對微量元素的需求,為什么?答:不能。微生物對微量元素需要量極低;微量元素?;祀s在天然有機(jī)化合物、無機(jī)化學(xué) 試劑、自來水、蒸餾水、普通玻璃器皿中;細(xì)胞中微量元素含量因培養(yǎng)基組分含量不恒定、 藥品生產(chǎn)
14、廠家及批次、水質(zhì)、容器等條件不同而變化,難以定量分析檢測。2.為什么生長因子通常是維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶,而葡萄糖通常不是生長因子? 答:維生素、氨基酸或嘌呤 (嘧啶 )通常作為酶的輔基或輔酶,以及用于合成蛋白質(zhì)、核 酸,是微生物生長所必需且需要量很小,而微生物(如營養(yǎng)缺陷型菌株 )自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長需要的有機(jī)化合物。而葡萄糖通常作為碳源和能源物質(zhì)被微生物利 用,需要量較大,而且其他一些糖類等碳源物質(zhì)也可以代替葡萄糖滿足微生物生長所需。3 以伊紅美藍(lán)(EMB培養(yǎng)基為例,分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。答:EMB培養(yǎng)基含有伊紅和美藍(lán)兩種染料作為指示劑,大腸桿菌可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸造成
15、酸性環(huán)境時, 這兩種染料結(jié)合形成復(fù)合物, 使大腸桿菌菌落帶金屬光澤的深紫色, 而與其他不 能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的微生物區(qū)分開。4 與促進(jìn)擴(kuò)散相比,微生物通過主動運(yùn)輸吸收營養(yǎng)物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是什么?答:主動運(yùn)輸與促進(jìn)擴(kuò)散相比的優(yōu)點(diǎn)在于可以逆濃度運(yùn)輸營養(yǎng)物質(zhì)。通過促進(jìn)擴(kuò)散將營 養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞, 需要環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)濃度高于胞內(nèi), 而在自然界中生長的微生物所處 環(huán)境中的營養(yǎng)物質(zhì)含量往往很低, 在這種情況下促進(jìn)擴(kuò)散難以發(fā)揮作用。 主動運(yùn)輸則可以逆 濃度運(yùn)輸,將環(huán)境中較低濃度什養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi),保證微生物正常生長繁殖。5 舉例說明微生物在生長過程中培養(yǎng)基 PH值可能發(fā)生的變化,并提出解決方法。答:微生物在生長繁
16、殖和積累代謝產(chǎn)物的過程中,培養(yǎng)基的pH 會發(fā)生如下變化:(1) 如微生物在含糖基質(zhì)上生長,會產(chǎn)酸而使PH下降。(2) 微生物在分解蛋白質(zhì)和氨基酸時,會產(chǎn)NH3而使PH上升。(3) 以(NH 4)2SO4作N源,會過剩SO42-,而使PH下降。(4) 分解利用陽離子化合物如:NaNO3,會過剩Na+而使PH上升。為了維持培養(yǎng)基 PH 值的相對恒定,常常在培養(yǎng)基中加入緩沖物質(zhì)如磷酸鹽,碳酸鹽等, 以緩和 PH 的劇烈變化。6有一培養(yǎng)基如下:甘露醇,MgS4, K2HPO4, H2PO4, CuS04, NaCl, CaC03,蒸餾水。試述該培養(yǎng)基的 A.碳素來源;B.氮素來源;C.礦質(zhì)來源,該培養(yǎng)
17、基可用于培養(yǎng)哪類微 生物?答:( 1)該培養(yǎng)基的碳素來源和能量來源均來自甘露醇。(2)該培養(yǎng)基未提供氮素來源, 根據(jù)所學(xué)知識, 只有能固氮的微生物才能在無氮培養(yǎng)基 上生長。(3) 該培養(yǎng)基的礦質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)包括:Mg2+, K+, Cu2+, Na+, PO43-, SO42-(4) HPO42-, PO43-, CaCO3主要用來作緩沖物質(zhì)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值,以保持PH不變。 據(jù)此我們可推知該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)自生固氮菌等微生物。7 .列表比較微生物的四大營養(yǎng)類型營養(yǎng)類型能源氫供體基本碳源實(shí)例光能無機(jī)營養(yǎng)型(光能自養(yǎng)型)光無機(jī)物CO2藍(lán)細(xì)菌、紫硫細(xì)菌、綠硫細(xì)菌、藻類光能有機(jī)營養(yǎng)型(光能異養(yǎng)型)光有
18、機(jī)物CO2及簡單有機(jī)物紅螺菌科的細(xì)菌(即紫色無硫細(xì)菌)化能無機(jī)營養(yǎng)型(化能自養(yǎng)型)無機(jī)物無機(jī)物CO2硝化細(xì)菌、硫化細(xì)菌、鐵細(xì)菌、氫細(xì)菌、硫磺細(xì)菌等化能有機(jī)營養(yǎng)型(化能異養(yǎng)型)無機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物絕大多數(shù)細(xì)菌和全部真核生物8 分析下述培養(yǎng)基各組分的作用,依據(jù)其功能推測其所屬培養(yǎng)基的類型:A. 麥康開培養(yǎng)液:蛋白胨20g,乳糖10g,牛膽酸鹽5g,NaCl 5g,水1000ml,pH7.4力口 1%中性紅5ml分裝與有發(fā)酵管的試管0.7kgkm 2滅菌15min ,用于腸道桿菌培養(yǎng)。B. 檸檬酸鹽培養(yǎng)基: NH4H2PO4 1g , K2HPO 4 1g , NaCl 5g , MgSO 4 0.2
19、g,檸檬酸鈉 2g, 瓊脂18g ,水100Oml , pH6.8加1%溴麝香草酚蘭10ml , 1.1Kgcm2滅菌20分鐘,制成 斜面,用于細(xì)菌利用檸檬酸鹽試驗(yàn)。答:A 功能B功能蛋白胨氮院NH4H2PO4氮源乳糖碳源K2HPO4生長因子NaCl無機(jī)物NaCl、MgSo 4、K2HPO4無機(jī)物牛膽酸鹽生長因子檸檬酸鈉碳源PH 值 7.4適宜菌生長瓊脂凝固劑1%中性紅指示劑1%溴麝香草酚蘭指示劑,判斷能否利用檸檬 酸鈉發(fā)酵管判斷是否產(chǎn)氣PH 值 6.8適宜菌生長屬于半組合培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基9.簡述什么是主動運(yùn)輸和基團(tuán)轉(zhuǎn)位?二者有什么區(qū)別和聯(lián)系?答:主動運(yùn)輸是物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的一種方式,即細(xì)胞會
20、針對某些特定物質(zhì)通過消耗能量,借助載體進(jìn)行逆濃度的輸送。基團(tuán)轉(zhuǎn)位是一種特殊的主動運(yùn)輸, 其基本特征與后者一樣,區(qū) 別在于被轉(zhuǎn)運(yùn)的物質(zhì)一旦進(jìn)入細(xì)胞后,分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,通常是接上某種基團(tuán)(通常為磷酸基團(tuán)),使之不能穿過細(xì)胞膜重新回到細(xì)胞外。六、論述題1 .以紫色非硫細(xì)菌為例, 解釋微生物的營養(yǎng)類型可變性及對環(huán)境條件變化適應(yīng)能力的靈 活性。答:紫色非硫細(xì)菌在沒有有機(jī)物時可同化CO2進(jìn)行自養(yǎng)生活,有有機(jī)物時利用有機(jī)物進(jìn)行異養(yǎng)生活, 在光照及厭氧條件下利用光能進(jìn)行光能營養(yǎng)生活, 在黑暗及好氧條件下利用有 機(jī)物氧化產(chǎn)生的化學(xué)能進(jìn)行化能營養(yǎng)生活。2如果要從環(huán)境中分離得到能利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)
21、物,你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?答:( 1)從苯含量較高環(huán)境中采集土樣或水樣;(2)配制培養(yǎng)基, 制備平板, 種僅以苯作為唯一碳源(A),另一種不含任何碳源作為對照 (B); (3)將樣品適當(dāng)適稀釋(十倍稀釋法),涂 布 A 平飯; (4)將平板置于適當(dāng)溫度條件下培養(yǎng), 觀察是否有菌落產(chǎn)生; (5)將 A 平板上的菌 落編號并分別轉(zhuǎn)接至 B 平板, 置于相同溫度條件下培養(yǎng) (在 B 平板上生長的菌落是可利用空 氣 CO 的自養(yǎng)型微生物 ); (6)挑取在 A 平板上生長而不在 B 平板上生長的菌落,在一個新的 A 平板上劃線、 培養(yǎng),獲得單菌落, 初步確定為可利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物; (7
22、)將初步確定的目標(biāo)菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為惟一碳源的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn),利 用相應(yīng)化學(xué)分析方法定量分析該菌株分解利用苯的情況。3某些微生物對生長因子的需求是具有較高的專一性,可利用它們通過“微生物分析” ( microbiological assay )對樣品中維生素或氨基酸進(jìn)行定量。試設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)利用微生物對某一 樣品維生素 B 12的含量進(jìn)行分析。答:(1)將缺乏維生素 B 12但含有過量其他營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基分裝于一系列試管,分別定量接人用于測定的微生物; (2)在這些試管中分別補(bǔ)加不同量的維生素B12 標(biāo)準(zhǔn)樣品及待測樣品,在適宜條件下培養(yǎng); (3)以微生物生長量 (如測定 OD600nm
23、) 值對標(biāo)準(zhǔn)樣品的量作圖,獲 得標(biāo)準(zhǔn)曲線; (4)測定含待測樣品試管中微生物生長量,對照標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算待測樣品中維 生素 B12 的含量。4某學(xué)生利用酪素培養(yǎng)基平板篩選產(chǎn)胞外蛋白酶細(xì)菌,在酪素培養(yǎng)基平板上發(fā)現(xiàn)有幾株菌的菌落周圍有蛋白水解圈, 是否能僅憑蛋白水解圈與菌落直徑比大, 就斷定該菌株產(chǎn)胞外 蛋白酶的能力就大,而將其選擇為高產(chǎn)蛋白酶的菌種,為什么?答 :不能。因?yàn)椋?(1)不同微生物的營養(yǎng)需求、最適生長溫度等生長條件有差別,在同一平 板上相同條件下的生長及生理狀況不同;(2)不同微生物所產(chǎn)蛋白酶的性質(zhì) (如最適催化反應(yīng)溫度、PH、對底物酪素的降解能力等)不同;(3)該學(xué)生所采用的是一種定
24、性及初步定量的方 法,應(yīng)進(jìn)一步針對獲得的幾株菌分別進(jìn)行培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件優(yōu)化, 并在分析這些菌株所產(chǎn)蛋 白酶性質(zhì)的基礎(chǔ)上利用搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)確定蛋白酶高產(chǎn)菌株。5 以大腸桿菌磷酸烯醇式丙酮酸 -糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)(PTS)為例解釋基團(tuán)轉(zhuǎn)位。答:大腸桿菌 PTS由5種蛋白質(zhì)(酶I、酶 a、酶 b、酶 C及熱穩(wěn)定蛋白質(zhì) HPr)組成,酶 a酶 b、酶 C 3個亞基構(gòu)成酶°酶I和 HPr為非特異性細(xì)胞質(zhì)蛋白,酶aC相結(jié)合。酶將一個葡萄糖HPr 的磷酸化和去磷酸化PTS 進(jìn)入細(xì)胞后加上了個個也是細(xì)胞質(zhì)蛋白,親水性酶 b與位于細(xì)胞膜上的疏水性酶 運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi),磷酸烯醇式丙酮酸上的磷酸基團(tuán)逐步通過酶I和
25、 作用,最終在酶的作用下轉(zhuǎn)移到葡萄糖,這樣葡萄糖在通過 磷酸基團(tuán)。6 .試分析在主動運(yùn)輸中, ATP結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)系統(tǒng)和膜結(jié)合載體 蛋白(透過酶)系統(tǒng)的運(yùn)行機(jī) 機(jī)及相互區(qū)別。答:(1) ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白常由兩個疏水性跨膜結(jié)構(gòu)域與胞內(nèi)的兩個核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域形成復(fù)合物,跨膜結(jié)構(gòu)域在膜上形成一個孔,核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)則可結(jié)合ATP。 ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白發(fā)揮功能還需要存在于周質(zhì)空間(G +菌)或附著在質(zhì)膜外表面()的底物結(jié)合蛋白的幫助。底物結(jié)合蛋白與被動運(yùn)輸物質(zhì)結(jié)合后再與 ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合, 借助于 ATP 水解釋放的能量,ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將被運(yùn)輸物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入胞內(nèi)。(2)膜結(jié)合載體蛋白也是跨膜蛋白,被運(yùn)輸物質(zhì)在膜外表面與透過酶結(jié)合, 而膜內(nèi)外質(zhì)子濃度差在消失過程中, 被
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