第五章微生物營養(yǎng)與培養(yǎng)基習(xí)題及答案電子教案

1、精品文檔第五章 微生物營養(yǎng)習(xí)題及參考答案一、名詞解釋1生長因子：2選擇培養(yǎng)基 （seclected media）3基礎(chǔ)培養(yǎng)基4合成培養(yǎng)基5化能異養(yǎng)微生物6化能自養(yǎng)微生物7光能自養(yǎng)微生物8光能異養(yǎng)微生物9. 單純擴(kuò)散10. 促進(jìn)擴(kuò)散11. 主動運(yùn)輸12. 基團(tuán)移位13. pH 的內(nèi)源調(diào)節(jié)14. 滲透壓15. 水活度、填空題1微生物生長繁殖所需六大營養(yǎng)要素是 和 等。精品文檔2碳 源物質(zhì)為 微生物 提供 和 有、碳源物質(zhì)主要、等。3生長因子主要包括、 和 ，其主要作用是4根據(jù)，微生物可分為自養(yǎng)型和異養(yǎng)型。5根據(jù)，微生物可分為光能營養(yǎng)型和化能營養(yǎng)型。6根據(jù) ，微生物可分為無機(jī)營養(yǎng)型和有機(jī)營養(yǎng)型。微生

2、物的營養(yǎng)類型可分為、和和。、和等 4 種類型。7根據(jù)碳源、 能源和電子供體性質(zhì)的不同， 和。8按用途劃分，培 養(yǎng)基 可分為 9常用的培養(yǎng)基凝固劑有、10營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式有三、選擇題（ 4 個答案選 1） 1下列物質(zhì)可用作生長因子的是（ ）。A. 葡萄糖 B. 纖維素 C.NaGl D. 葉酸 2大腸桿菌屬于（）型的微生物。A. 光能無機(jī)自養(yǎng) B. 光能有機(jī)異養(yǎng) C. 化能無機(jī)自養(yǎng) D. 化能有機(jī)異養(yǎng) 3硝化細(xì)菌屬于（）型的微生物。A. 光能無機(jī)自養(yǎng) B. 光能有機(jī)異養(yǎng) C. 化能無機(jī)自養(yǎng) D. 化能有機(jī)異養(yǎng)4某種細(xì)菌可利用無機(jī)物為電子供體而有賈稀為碳源，屬于（）型的微生物。A. 兼養(yǎng)型

3、B. 異養(yǎng)型 C. 自養(yǎng)型 D. 原養(yǎng)型 5、化能無機(jī)自養(yǎng)微生物可利用（）為電子供體。A.CO2 B.H 2 C.O 2 D.H2O6用來分離產(chǎn)胞外蛋白酶菌株的酪素培養(yǎng)基是一種（）。A. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 B. 加富培養(yǎng)基 C. 選擇培養(yǎng)基 D. 鑒別培養(yǎng)基7、固體培養(yǎng)基中瓊脂含量一般為（）。A.0.5% B.1.5% C.2.5% D.5% 8用來分離固氮菌的培養(yǎng)基中缺乏氮源，這種培養(yǎng)基是一種（）。A. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 B. 加富培養(yǎng)基 C. 選擇培養(yǎng)基 D. 鑒別培養(yǎng)基9水分子可通過（）進(jìn)入細(xì)胞。A. 主動運(yùn)輸 B. 擴(kuò)散 C. 促進(jìn)擴(kuò)散 D. 基團(tuán)轉(zhuǎn)位 10被運(yùn)輸物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞前后物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的

4、是（）。A.主動運(yùn)輸 B. 擴(kuò)散 C. 促進(jìn)擴(kuò)散D. 基團(tuán)轉(zhuǎn)位四、是非題1. 某些假單胞菌可以利用多達(dá)90 多種以上的碳源物質(zhì)。2. 碳源對配制任何微生物的培養(yǎng)基都是必不可少的。3. 氨基酸在碳源缺乏時可被微生物用作碳源物質(zhì)，但不能提供能源。4. 培養(yǎng)營養(yǎng)缺陷型微生物的培養(yǎng)基必須同時加入維生素、氨基酸、嘌呤及嘧啶。5. 為使微生物生長旺盛，培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好。6 .對含葡萄糖的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌時可以121.3 C加熱20min即可。7. 半固體培養(yǎng)基常用來觀察微生物的運(yùn)動特征。8. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)所有類型的微生物。9. 伊紅美藍(lán)（ EMB ）培養(yǎng)基中，伊紅美藍(lán)的作用是促

5、進(jìn)大腸桿菌的生長。10. 在促進(jìn)擴(kuò)散過程中，載體蛋白對被運(yùn)輸物質(zhì)具有較高的專一性，一種載體蛋白只能 運(yùn)輸一種物質(zhì)。五、簡答題1 .能否精確地確定微生物對微量元素的需求，為什么？2.為什么生長因子通常是維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶， 而葡萄糖通常不是生長因子？3 以伊紅美藍(lán)（EMB ）培養(yǎng)基為例，分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。4. 與促進(jìn)擴(kuò)散相比，微生物通過主動運(yùn)輸吸收營養(yǎng)物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是什么？5. 舉例說明微生物在生長過程中培養(yǎng)基pH 值可能發(fā)生的變化，并提出解決方法。6有一培養(yǎng)基如下：甘露醇，MgS4, K2HPO4, H2PO4, CuS04, NaCl, CaC03,蒸餾水。試述該培養(yǎng)基的 A.碳

6、素來源；B.氮素來源；C.礦質(zhì)來源，該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)哪類微 生物？7.列表比較微生物的四大營養(yǎng)類型。8. 分析下述培養(yǎng)基各組分的作用，依據(jù)其功能推測其所屬培養(yǎng)基的類型：A .麥康開培養(yǎng)液： 蛋白胨 20g, 乳糖 10g, 牛膽酸鹽 5g,NaCl 5g, 水 1000ml,pH7.4 加 1% 中性紅 5ml 分裝與有發(fā)酵管的試管 0.7kg/km 2滅菌 15min ，用于腸道桿菌培養(yǎng)。B.檸檬酸鹽培養(yǎng)基：NH4H2PO4 1g , K2HPO 4 1g , NaCl 5g , MgSO 4 0.2g,檸檬酸鈉 2g, 瓊脂18g ,水100Oml , pH6.8加1%溴麝香草酚蘭10m

7、l , 1.1Kgcm2滅菌20分鐘，制成 斜面，用于細(xì)菌利用檸檬酸鹽試驗(yàn)。9簡述什么是主動運(yùn)輸和基團(tuán)轉(zhuǎn)位？二者有什么區(qū)別和聯(lián)系？六、論述題1 以紫色非硫細(xì)菌為例, 解釋微生物的營養(yǎng)類型可變性及對環(huán)境條件變化適應(yīng)能力的靈 活性。2如果要從環(huán)境中分離得到能利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物,你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)？3某些微生物對生長因子的需求是具有較高的專一性,可利用它們通過“微生物分析” （microbiological assay ）對樣品中維生素或氨基酸進(jìn)行定量。試設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)利用微生物對某一 樣品維生素 B12 的含量進(jìn)行分析。4某學(xué)生利用酪素培養(yǎng)基平板篩選產(chǎn)胞外蛋白酶細(xì)菌, 在酪素培養(yǎng)基平板上

8、發(fā)現(xiàn)有幾株 菌的菌落周圍有蛋白水解圈, 是否能僅憑蛋白水解圈與菌落直徑比大, 就斷定該菌株產(chǎn)胞外 蛋白酶的能力就大,而將其選擇為高產(chǎn)蛋白酶的菌種,為什么？5 以大腸桿菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)（PTS）為例解釋基團(tuán)轉(zhuǎn)位。6試分析在主動運(yùn)輸中, ATP 結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白）系統(tǒng)和膜結(jié)合載體 蛋白（透過酶）系統(tǒng)的運(yùn)行機(jī) 機(jī)及相互區(qū)別。7 試設(shè)計(jì)一種分離纖維素分解菌的培養(yǎng)基，并說明各營養(yǎng)物質(zhì)的主要功能（只寫明成分，不要求定量） 。8 .試從能源、碳源的角度來比較Anabaena、Rhodospirillum、NitrobaCter、E.col i四種微生物的營養(yǎng)類型。微生

9、物營養(yǎng)習(xí)題參考答案一、名詞解釋1生長因子： 微生物生長不可缺少的微量有機(jī)物，包括維生素，氨基酸及堿基等2選擇培養(yǎng)基： 是用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。3基礎(chǔ)培養(yǎng)基： 是含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。4合成培養(yǎng)基： 是由化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基，也稱化學(xué)限定培養(yǎng) 基。5化能異養(yǎng)微生物： 以有機(jī)碳化合物為能源，碳源和供氫體也是有機(jī)碳化合物的微生 物。6化能自養(yǎng)微生物： 利用無機(jī)化合物氧化過程中釋放的能量和以CO2 為碳源生長的微生物。7光能自養(yǎng)微生物： 利用光作為能源，以 CO2 為基本碳源，供氫體是還原在無機(jī)化合 物的微生物。8光能

10、異養(yǎng)微生物： 以光為能源，以有機(jī)碳化合物作為碳源和供氫體營光合生長的微 生物。9. 單純擴(kuò)散 又稱被動運(yùn)輸，只疏水型雙分子層細(xì)胞膜（包括孔蛋白在內(nèi)）在無載體蛋 白的參與下， 單純依靠物理擴(kuò)散的方式讓許多小分子， 非電離分子尤其是親水性小分子被動 通過的一種物質(zhì)運(yùn)送方式。 通過這種方式運(yùn)送的物質(zhì)主要是O2,CO2, 乙醇和某些氨基酸分子。10. 促進(jìn)擴(kuò)散 指溶質(zhì)在運(yùn)送過程中， 必須借助存在于細(xì)胞膜上的底物特異載體蛋白的協(xié) 助，但步消耗能量的一類擴(kuò)散性運(yùn)送方式。載體蛋白有時稱作滲透酶，移位酶或移位蛋白， 一般通過誘導(dǎo)產(chǎn)生， 它借助自身構(gòu)象的變化， 在不耗能的條件下可加速把膜外高濃度的溶質(zhì) 擴(kuò)散到膜

11、內(nèi)，直至膜內(nèi)外該溶質(zhì)的濃度相等為止。11. 主動運(yùn)輸 指一類須提供能量（包括 ATP質(zhì)子動勢或離子泵等）并通過細(xì)胞膜上特 異性載體蛋白構(gòu)想的變化，而使膜外環(huán)境中低濃度的溶質(zhì)運(yùn)入膜內(nèi)的一種運(yùn)送方式。12. 基團(tuán)移位 指一類既需要特異性載體蛋白的參與，又需耗能的一種物質(zhì)運(yùn)送方式。其 特點(diǎn)是溶質(zhì)在運(yùn)送前后還會發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化。 主要用于運(yùn)送各種糖類， 核苷酸， 丁酸和 腺嘌呤等物質(zhì)?？苛姿徂D(zhuǎn)移酶系統(tǒng)即磷酸烯醇式丙酮酸 - 己糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)進(jìn)行。13. pH的內(nèi)源調(diào)節(jié) 由于微生物的生長，代謝過程中會產(chǎn)生引起培養(yǎng)基的PH改變的代謝產(chǎn)物， 如步及時調(diào)節(jié)，就會抑制甚至殺死自身，因而在設(shè)計(jì)此類培養(yǎng)基時，就

12、要考慮培養(yǎng)基成分對PH的調(diào)節(jié)能力，這種通過培養(yǎng)基內(nèi)內(nèi)在成分所起的調(diào)節(jié)作用，稱PH的內(nèi)源調(diào)節(jié)。14. 滲透壓 是某水溶液中一個可用壓力來量度的物化指標(biāo)。 它表示兩種不同濃度的溶液間若被一個半透性薄膜隔開時，稀溶液中的水分子會因水勢的推動而透過薄膜流向濃溶液， 直至濃溶液所產(chǎn)生的機(jī)械壓力足以使兩邊水分子的進(jìn)出達(dá)到平衡為止，這時由濃溶液中的溶質(zhì)所產(chǎn)生的機(jī)械壓力，既為它的滲透壓值。15. 水活度 表示在天然或人為環(huán)境中，微生物可實(shí)際利用的自由水或游離水的含量。其 定量含義為：在同溫同壓下，某溶液的蒸汽壓與純水蒸汽壓之比。二、填空題1 碳源，氮源，無機(jī)鹽，生長因子，水，能源2碳素來源，能源，糖，有機(jī)酸，

13、醇，脂，烴3維生素，氨基酸，嘌呤和嘧啶，作為酶的輔基或輔酶，合成細(xì)胞結(jié)構(gòu)及組分的前體 4碳源性質(zhì)5能源6電子供體7光能無機(jī)自養(yǎng) 光能有機(jī)異養(yǎng) 化能無機(jī)自養(yǎng) 化能有機(jī)異養(yǎng)8基礎(chǔ)，加富，鑒別，選擇9瓊脂，明膠，硅膠10擴(kuò)散，促進(jìn)擴(kuò)散，主動運(yùn)輸，膜泡運(yùn)輸三、選擇題1D；2D；3C；4 A；5B；6D；7B；8C；9B；10D四、是非題1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 五、簡答題1能否精確地確定微生物對微量元素的需求，為什么？答:不能。微生物對微量元素需要量極低；微量元素?；祀s在天然有機(jī)化合物、無機(jī)化學(xué) 試劑、自來水、蒸餾水、普通玻璃器皿中；細(xì)胞中微量元素含量因培養(yǎng)基組分含量不恒定、 藥品生產(chǎn)

14、廠家及批次、水質(zhì)、容器等條件不同而變化，難以定量分析檢測。2.為什么生長因子通常是維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶，而葡萄糖通常不是生長因子？ 答：維生素、氨基酸或嘌呤 (嘧啶 )通常作為酶的輔基或輔酶，以及用于合成蛋白質(zhì)、核 酸，是微生物生長所必需且需要量很小，而微生物(如營養(yǎng)缺陷型菌株 )自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長需要的有機(jī)化合物。而葡萄糖通常作為碳源和能源物質(zhì)被微生物利 用，需要量較大，而且其他一些糖類等碳源物質(zhì)也可以代替葡萄糖滿足微生物生長所需。3 以伊紅美藍(lán)(EMB培養(yǎng)基為例，分析鑒別培養(yǎng)基的作用原理。答：EMB培養(yǎng)基含有伊紅和美藍(lán)兩種染料作為指示劑，大腸桿菌可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸造成

15、酸性環(huán)境時， 這兩種染料結(jié)合形成復(fù)合物， 使大腸桿菌菌落帶金屬光澤的深紫色， 而與其他不 能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的微生物區(qū)分開。4 與促進(jìn)擴(kuò)散相比，微生物通過主動運(yùn)輸吸收營養(yǎng)物質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)是什么？答：主動運(yùn)輸與促進(jìn)擴(kuò)散相比的優(yōu)點(diǎn)在于可以逆濃度運(yùn)輸營養(yǎng)物質(zhì)。通過促進(jìn)擴(kuò)散將營 養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞， 需要環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)濃度高于胞內(nèi)， 而在自然界中生長的微生物所處 環(huán)境中的營養(yǎng)物質(zhì)含量往往很低， 在這種情況下促進(jìn)擴(kuò)散難以發(fā)揮作用。 主動運(yùn)輸則可以逆 濃度運(yùn)輸，將環(huán)境中較低濃度什養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi)，保證微生物正常生長繁殖。5 舉例說明微生物在生長過程中培養(yǎng)基 PH值可能發(fā)生的變化，并提出解決方法。答：微生物在生長繁

16、殖和積累代謝產(chǎn)物的過程中，培養(yǎng)基的pH 會發(fā)生如下變化：(1) 如微生物在含糖基質(zhì)上生長，會產(chǎn)酸而使PH下降。(2) 微生物在分解蛋白質(zhì)和氨基酸時，會產(chǎn)NH3而使PH上升。(3) 以(NH 4)2SO4作N源，會過剩SO42-,而使PH下降。(4) 分解利用陽離子化合物如：NaNO3,會過剩Na+而使PH上升。為了維持培養(yǎng)基 PH 值的相對恒定，常常在培養(yǎng)基中加入緩沖物質(zhì)如磷酸鹽，碳酸鹽等， 以緩和 PH 的劇烈變化。6有一培養(yǎng)基如下：甘露醇，MgS4, K2HPO4, H2PO4, CuS04, NaCl, CaC03,蒸餾水。試述該培養(yǎng)基的 A.碳素來源；B.氮素來源；C.礦質(zhì)來源，該培養(yǎng)

17、基可用于培養(yǎng)哪類微 生物？答：( 1)該培養(yǎng)基的碳素來源和能量來源均來自甘露醇。(2)該培養(yǎng)基未提供氮素來源， 根據(jù)所學(xué)知識， 只有能固氮的微生物才能在無氮培養(yǎng)基 上生長。（3） 該培養(yǎng)基的礦質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)包括：Mg2+, K+, Cu2+, Na+, PO43-, SO42-（4） HPO42-, PO43-, CaCO3主要用來作緩沖物質(zhì)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值，以保持PH不變。 據(jù)此我們可推知該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)自生固氮菌等微生物。7 .列表比較微生物的四大營養(yǎng)類型營養(yǎng)類型能源氫供體基本碳源實(shí)例光能無機(jī)營養(yǎng)型（光能自養(yǎng)型）光無機(jī)物CO2藍(lán)細(xì)菌、紫硫細(xì)菌、綠硫細(xì)菌、藻類光能有機(jī)營養(yǎng)型（光能異養(yǎng)型）光有

18、機(jī)物CO2及簡單有機(jī)物紅螺菌科的細(xì)菌（即紫色無硫細(xì)菌）化能無機(jī)營養(yǎng)型（化能自養(yǎng)型）無機(jī)物無機(jī)物CO2硝化細(xì)菌、硫化細(xì)菌、鐵細(xì)菌、氫細(xì)菌、硫磺細(xì)菌等化能有機(jī)營養(yǎng)型（化能異養(yǎng)型）無機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物絕大多數(shù)細(xì)菌和全部真核生物8 分析下述培養(yǎng)基各組分的作用，依據(jù)其功能推測其所屬培養(yǎng)基的類型：A. 麥康開培養(yǎng)液：蛋白胨20g,乳糖10g,牛膽酸鹽5g,NaCl 5g,水1000ml,pH7.4力口 1%中性紅5ml分裝與有發(fā)酵管的試管0.7kgkm 2滅菌15min ,用于腸道桿菌培養(yǎng)。B. 檸檬酸鹽培養(yǎng)基： NH4H2PO4 1g , K2HPO 4 1g , NaCl 5g , MgSO 4 0.2

19、g,檸檬酸鈉 2g, 瓊脂18g ,水100Oml , pH6.8加1%溴麝香草酚蘭10ml , 1.1Kgcm2滅菌20分鐘，制成 斜面，用于細(xì)菌利用檸檬酸鹽試驗(yàn)。答：A 功能B功能蛋白胨氮院NH4H2PO4氮源乳糖碳源K2HPO4生長因子NaCl無機(jī)物NaCl、MgSo 4、K2HPO4無機(jī)物牛膽酸鹽生長因子檸檬酸鈉碳源PH 值 7.4適宜菌生長瓊脂凝固劑1%中性紅指示劑1%溴麝香草酚蘭指示劑，判斷能否利用檸檬 酸鈉發(fā)酵管判斷是否產(chǎn)氣PH 值 6.8適宜菌生長屬于半組合培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基9.簡述什么是主動運(yùn)輸和基團(tuán)轉(zhuǎn)位？二者有什么區(qū)別和聯(lián)系？答：主動運(yùn)輸是物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的一種方式，即細(xì)胞會

20、針對某些特定物質(zhì)通過消耗能量，借助載體進(jìn)行逆濃度的輸送。基團(tuán)轉(zhuǎn)位是一種特殊的主動運(yùn)輸， 其基本特征與后者一樣，區(qū) 別在于被轉(zhuǎn)運(yùn)的物質(zhì)一旦進(jìn)入細(xì)胞后，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，通常是接上某種基團(tuán)（通常為磷酸基團(tuán)），使之不能穿過細(xì)胞膜重新回到細(xì)胞外。六、論述題1 .以紫色非硫細(xì)菌為例， 解釋微生物的營養(yǎng)類型可變性及對環(huán)境條件變化適應(yīng)能力的靈 活性。答：紫色非硫細(xì)菌在沒有有機(jī)物時可同化CO2進(jìn)行自養(yǎng)生活，有有機(jī)物時利用有機(jī)物進(jìn)行異養(yǎng)生活， 在光照及厭氧條件下利用光能進(jìn)行光能營養(yǎng)生活， 在黑暗及好氧條件下利用有 機(jī)物氧化產(chǎn)生的化學(xué)能進(jìn)行化能營養(yǎng)生活。2如果要從環(huán)境中分離得到能利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)

21、物，你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)？答：（ 1）從苯含量較高環(huán)境中采集土樣或水樣；（2）配制培養(yǎng)基， 制備平板， 種僅以苯作為唯一碳源（A）,另一種不含任何碳源作為對照 （B）; （3）將樣品適當(dāng)適稀釋（十倍稀釋法），涂 布 A 平飯； （4）將平板置于適當(dāng)溫度條件下培養(yǎng)， 觀察是否有菌落產(chǎn)生； （5）將 A 平板上的菌 落編號并分別轉(zhuǎn)接至 B 平板， 置于相同溫度條件下培養(yǎng) （在 B 平板上生長的菌落是可利用空 氣 CO 的自養(yǎng)型微生物 ）； （6）挑取在 A 平板上生長而不在 B 平板上生長的菌落，在一個新的 A 平板上劃線、 培養(yǎng)，獲得單菌落， 初步確定為可利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物； （7

22、）將初步確定的目標(biāo)菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為惟一碳源的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，利 用相應(yīng)化學(xué)分析方法定量分析該菌株分解利用苯的情況。3某些微生物對生長因子的需求是具有較高的專一性，可利用它們通過“微生物分析” （ microbiological assay ）對樣品中維生素或氨基酸進(jìn)行定量。試設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)利用微生物對某一 樣品維生素 B 12的含量進(jìn)行分析。答:（1）將缺乏維生素 B 12但含有過量其他營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基分裝于一系列試管，分別定量接人用于測定的微生物； （2）在這些試管中分別補(bǔ)加不同量的維生素B12 標(biāo)準(zhǔn)樣品及待測樣品，在適宜條件下培養(yǎng)； （3）以微生物生長量 （如測定 OD600nm

23、） 值對標(biāo)準(zhǔn)樣品的量作圖，獲 得標(biāo)準(zhǔn)曲線； （4）測定含待測樣品試管中微生物生長量，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算待測樣品中維 生素 B12 的含量。4某學(xué)生利用酪素培養(yǎng)基平板篩選產(chǎn)胞外蛋白酶細(xì)菌，在酪素培養(yǎng)基平板上發(fā)現(xiàn)有幾株菌的菌落周圍有蛋白水解圈， 是否能僅憑蛋白水解圈與菌落直徑比大， 就斷定該菌株產(chǎn)胞外 蛋白酶的能力就大，而將其選擇為高產(chǎn)蛋白酶的菌種，為什么？答 :不能。因?yàn)椋?（1）不同微生物的營養(yǎng)需求、最適生長溫度等生長條件有差別，在同一平 板上相同條件下的生長及生理狀況不同；（2）不同微生物所產(chǎn)蛋白酶的性質(zhì) （如最適催化反應(yīng)溫度、PH、對底物酪素的降解能力等）不同；（3）該學(xué)生所采用的是一種定

24、性及初步定量的方 法，應(yīng)進(jìn)一步針對獲得的幾株菌分別進(jìn)行培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件優(yōu)化， 并在分析這些菌株所產(chǎn)蛋 白酶性質(zhì)的基礎(chǔ)上利用搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)確定蛋白酶高產(chǎn)菌株。5 以大腸桿菌磷酸烯醇式丙酮酸 -糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)（PTS）為例解釋基團(tuán)轉(zhuǎn)位。答：大腸桿菌 PTS由5種蛋白質(zhì)（酶I、酶 a、酶 b、酶 C及熱穩(wěn)定蛋白質(zhì) HPr）組成，酶 a酶 b、酶 C 3個亞基構(gòu)成酶°酶I和 HPr為非特異性細(xì)胞質(zhì)蛋白，酶aC相結(jié)合。酶將一個葡萄糖HPr 的磷酸化和去磷酸化PTS 進(jìn)入細(xì)胞后加上了個個也是細(xì)胞質(zhì)蛋白，親水性酶 b與位于細(xì)胞膜上的疏水性酶 運(yùn)輸進(jìn)入胞內(nèi)，磷酸烯醇式丙酮酸上的磷酸基團(tuán)逐步通過酶I和

25、 作用，最終在酶的作用下轉(zhuǎn)移到葡萄糖，這樣葡萄糖在通過 磷酸基團(tuán)。6 .試分析在主動運(yùn)輸中， ATP結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白）系統(tǒng)和膜結(jié)合載體 蛋白（透過酶）系統(tǒng)的運(yùn)行機(jī) 機(jī)及相互區(qū)別。答：（1） ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白常由兩個疏水性跨膜結(jié)構(gòu)域與胞內(nèi)的兩個核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域形成復(fù)合物，跨膜結(jié)構(gòu)域在膜上形成一個孔，核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)則可結(jié)合ATP。 ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白發(fā)揮功能還需要存在于周質(zhì)空間（G +菌）或附著在質(zhì)膜外表面（）的底物結(jié)合蛋白的幫助。底物結(jié)合蛋白與被動運(yùn)輸物質(zhì)結(jié)合后再與 ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合， 借助于 ATP 水解釋放的能量，ABC 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將被運(yùn)輸物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入胞內(nèi)。（2）膜結(jié)合載體蛋白也是跨膜蛋白，被運(yùn)輸物質(zhì)在膜外表面與透過酶結(jié)合， 而膜內(nèi)外質(zhì)子濃度差在消失過程中， 被