黃芪多糖和氧化苦參堿協(xié)同增強(qiáng)雞新城疫疫苗免疫效果研究.docx

1、DOI:10.13207/j.ciiki.jnwafii.2015.06.028網(wǎng)絡(luò)出版時間：2O15-O5.ll15:03磷崎讖版縛址期kcms/degg峰株葡技美孳孽抿(培禽滁串腆12015年6月JournalofNorthwestA安FUniversity(Nat.Sci.Ed.)黃茂多糖和氧化苦參堿協(xié)同增強(qiáng)雞新城疫疫苗免疫效果研究陳茜】，邢玉娟2,陳玉庫2,胡元亮，王德云。蔡丙嚴(yán)2(1南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院.江蘇南京210095；2江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院.江蘇泰州225300)摘要【目的】研究黃斐多(Astragaluspolysaccharides.APS)和氧化苦參堿(Oxymalr

2、ine,OM)對新城疫疫苗免疫的影響。【方法】將M日齡非免疫羅曼蛋公雞550羽隨機(jī)均分為11組，19組分別為()AP(以O(shè)M與APS質(zhì)量比為6«4配成)、()M和APS的高(4mg/mL)、中(2mg/mL)、低(Img/mL)劑雖組.10組為免疫對照組.11組為空白對照組。除空白對照組外.各組試驗(yàn)雞只均于14日齡首免、DVIV系疫苗.28日齡而：復(fù)免疫。在首次免疫的同時.19組分別口服商、中、低劑量:藥物.免疫對照組和空門對照組口服等鼠生理拙:水，每天1次.連續(xù)3d。分別于5和42日齡采血.用MTT法測定T淋巴細(xì)胞增殖的變化,用什微質(zhì)法測定血清抗體效價變化。于1

3、4,21.28和35日齡.每組隨機(jī)抽取雞4羽.稱體質(zhì)揪.削殺.摘取法氏囊和脾臟并稱質(zhì)伉計(jì)算免疫器官指數(shù)。【結(jié)果】()AP、()M、APS高、中劑信隹各時間點(diǎn)均能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖；()AP高、中劑技組在各時間點(diǎn)抗體效價顯著高于免疫對照組：OAP高、中、低劑屈組在各時間點(diǎn)的脾指數(shù)和法氏囊指數(shù)均顯著高于免疫對照組(CAP低劑所組35日齡除外【結(jié)論】黃芭多糖和氧化苦參堿能協(xié)同增強(qiáng)雞新城疫疫苗的免疫效果。關(guān)鍵詞中藥成分復(fù)方；T淋巴細(xì)胞增殖；抗體效價；免疫器官指數(shù)中圖分類號S853.7文獻(xiàn)標(biāo)志碼A文章編號1671-9387(2015)06-0041-06Increasingimmuneefficacyo

4、fNewcastlediseasevaccineinchickenbyastragaluspolysaccharideandoxymatrineCHENXi收稿日期一2014-05-27WZuTTiHP4IxlWHr-irW4X4>ilPIf。八houAr>uF女-4-必爪/hl=奸*SArtfiM，。八io11八力八no、,XINGYu-juan2,CHENYu-ku2,HUYuan-liang1WANGDe-yun1,CAIBing-yan2(1CollegeofVeterinaryMedicineNanjingAgriculturalUniversity.NanjingJia

5、ngsu210095A'hina:2JiangsuAgrianimalIltislnindryV(Kational('ollegr,Taizhou.Jiangstt225300.C/jzwu)Abstract:IObjective)Thispaperaimedtostudytheimmuneeffectofastragaluspolysaccharide(APS)andoxymatrine(OM)onNewcastlediseasevaccine.MethodFivehundredandfifty14-day-oldnon-iminiinizedRomancockswerera

6、ndomlydividedinto11groups.GroupsIto9were()AP()MandAPSqualityratioof6:4)，OMandAPSathigh(4mg/mL).medium(2mg/mL)andlow(Img/mL)doses.respectively.Group10wasvaccinecontrolandgroupI1wasblankcontrol.GroupsIto10werevaccinatedwithNDV-1attheagesofI4and28days,respectively.Atthesametimeofthefirstvaccination.the

7、chickensingroupsIto9weregivencompoundsathigh.mediumandlowdosesandchickensinvaccinationandblankcontrolgroupsweregivenphysiologicalsalinebyoraladministration.onceadayforthreeclays.Ondays5and42.peripheralIlymphocyteproliferationsandserumantibodytitersweredeter-minedwithMT'Fmethodandp-micr

8、oscopicmethod.respectively.On14.21.28and35days.theorganindexesofspleenandbursaweredeterminedbykillingIchickensineachgroup.LResultJTlymphocyteproliferationswerepromotedby()AP()MandAPSathighandmediumdosesandserumantibodylitersof()APathighandmediumdosesweresignificantlyhigherthanthoseofvaccinecontrolgr

9、oup.Atanytime,spleenandbursaindexesof(JAPatallclosesweresignificantlyhigherthanthoseofvaccinecontrolgroup(excepttheOAFlowdosegroupfor35-dayoldchicken).ConclusionJAPSandC)McouldsynergisticallyimprovetheimmuneefficacyofNewcastlediseasevaccineinchicken.Keywonls：Chineseherbalmedicinalingredientscompound

10、s;Tlymphocyteproliferation：antibodytiter：immuneorganindex研究證明,中藥及其主要成分作為-種免疫增強(qiáng)劑.具TF來源廣泛、效果顯著、無毒副作用等優(yōu)勢.不僅能克服油乳類、鋁膠類化學(xué)佐劑副作用大.局部刺激重、致癌、制備和使用麻煩或不足以提高弱抗原的免疫原性等弊病"而且能顯著增強(qiáng)機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能.促進(jìn)免疫器官的發(fā)育和細(xì)胞因子的分泌住勺。在前期研究中.筆者所在研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn).黃注多糖（.Astragaluspolysaccharides.APS）與氧化苦參堿（OxymatrineOM）等中藥成分具有顯著抑制新城疫病毒（Newsa

11、stlediseasevirus.NDV）增殖的作用；中藥成分復(fù)方在攻毒前、與攻毒同時和攻毒后給藥均能顯著降低受試雞的死亡率,提高血清NDV抗體效價.減輕死亡媽的器官出血,但對于其增強(qiáng)免疫作用機(jī)理的研究尚未見報(bào)道。木試驗(yàn)在前期研究基礎(chǔ)上.進(jìn)-步測定了中藥成分及其復(fù)方對新城疫苗免疫后雛雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖、血清抗體效價、法氏囊指數(shù)和脾指數(shù)的影響.進(jìn)-步探討中藥成分復(fù)方增強(qiáng)免疫的作用機(jī)理，以期為研制中藥成分免疫增強(qiáng)削提供理論依據(jù)。1材料與方法1.1材料I. 1.I藥物準(zhǔn)備根據(jù)以前的試驗(yàn)結(jié)果隊(duì).分別用雙蒸水將OM、APS和OM-APS（OAP.以雙M與APS質(zhì)量比為6：4配成）配制成高（4mg/m

12、L）、中（2mg/mL）、低（1mg/mL）3種質(zhì)量濃度的溶液.常規(guī)消毒后備用。1.1.2 疫苗和病毒新城疫1系（NewcastlediseasevirusIVstrain.NDV-1）疫苗.中牧股份南京藥械廠生產(chǎn),批號753-3。新城疫檢測抗原.由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院中獸醫(yī)研究室提供。新城疫強(qiáng)胚.恒溫培養(yǎng)72h.收獲尿囊液.按Reed-Muench法測定雞胚半數(shù)感染吊（Egginfectiousdose.EID5o）為10-8.七I.1.3主要試劑RPM1164O培養(yǎng)液.Gibco公司產(chǎn)品.按說明書用三蒸水配制后過濾除曲.分裝.4（保存.臨用前加入犢牛血清達(dá)體積分?jǐn)?shù)5%.同時加青霉素、鏈霉

13、素各10（）lU/mL：植物血凝素（PHA）.上海伊華科技有限公司產(chǎn)品.用RPM11640培養(yǎng)液配制成0.1mg/niL.0.22“m微孔濾膜過濾除菌.分裝后一20笆保存：四甲基偶氮哇藍(lán)（MTT）溶液.Amresco公司產(chǎn)品,用pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液（PBS）溶解，使最終質(zhì)缺濃度為5mg/mL.0.22微孔濾膜過濾除菌.分裝后It冰箱避光保存；淋巴細(xì)胞分離液.上海恒信化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品；淋巴細(xì)胞裂解液二甲基亞碗（DMS。）.分析純.蘇州正興化工研究院產(chǎn)品。1.1.4試驗(yàn)動物1日齡非免疫健康羅曼蛋公雞600羽.購自湯泉農(nóng)墾種雞場°試驗(yàn)期間采用籠養(yǎng).全價伺料.自由采食和飲水.11

14、4日齡采用紅外燈保溫.全日制光照。1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)雛雞飼養(yǎng)至14日齡（平均體質(zhì)雖95g/只），平均母源抗體效價3.3時,隨機(jī)選取550羽均分為II組。第19組為OAP高（OAPh）、OAP中（OAPm）、OAP低（OAPl）、（）M高（OMh）、（）M中（OMm）、OM低（）Ml）、APS高（APSh）、APS中（APSm）和APS低（APSl）.第10組為疫苗對照組,第II絹為空白對照叩隔離伺養(yǎng)。除空白對照叩外.共.他組試驗(yàn)雞于II日齡西免.用NDV-N系疫苗滴鼻、點(diǎn)眼免疫.每羽I羽份；28日齡時重復(fù)免疫。在首次免疫的同時.3個1藥復(fù)方組分別口服高、中、低劑量的OAP復(fù)方.母羽Iml,6個單味

15、藥組分別連續(xù)3d。分別于14.21,28,35和42日齡.每絹隨機(jī)取雞4羽.無菌心臟采血（4.0mL/羽）.肝素抗凝測定外周血淋巴細(xì)胞增殖；每叩隨機(jī)另取雞10羽翼掙脈采血，分離血清.用伏微吊:法測定HI抗休效價。在14,21.28和35日齡.每組隨機(jī)取雞4羽.稱體質(zhì)雖，剖殺.摘取法氐囊和脾臟并稱其質(zhì)量.iI算免疫器官指數(shù)（免疫器官質(zhì)量/體質(zhì)量X100%）。1.3淋巴細(xì)胞增殖的測定采用MTT法口將抗凝血樣用Hank's液稀釋1倍.小心加在淋巴細(xì)胞分離液上層.2000r/min離心20min.吸取中間云霧狀白細(xì)胞層.用無血清RPM11640培養(yǎng)液洗2遍.1500r/min離心15mine臺

16、盼藍(lán)染色.細(xì)胞計(jì)數(shù)活細(xì)胞大于90%后.用RPM1I64O培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞密度為2.5X1（）6個/mL,加入到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板（德國Nundcn公司生產(chǎn)）中，80/,/孔，每孔再加20“1.PHA.每個樣品重夏4孑L.然后'置于39.5°C、體積分?jǐn)?shù)5%CO2條件b（CO2培養(yǎng)箱.美國Revco公司產(chǎn)品）培養(yǎng)44h.然后每孔加入MTT溶液20繼續(xù)培養(yǎng)4h后.每孔加裂解液100將細(xì)胞板置于微量振蕩器（75-2A型.上海醫(yī)用分析儀器廠牛產(chǎn)）上振蕩5min使沉淀完全溶解在酶聯(lián)免疫儀（DG-3022型.中國華東電子管廠生產(chǎn)）上于570nm處檢測吸光值（A57。）作為丁淋巴細(xì)胞增殖的指標(biāo)

17、。1.4抗體效價的測J定在96孔微量血凝板上.從左到右每孔各加5（）MPBS液.再向每排的第I孔加入50待檢血清.依次向后倍比稀釋宜至第12孔.然后向每孔加入50“L4單位抗原.在微量振蕩器上振蕩混勻后皆于溫箱中感作20min。取出血凝板向每孔加入50雞紅細(xì)胞懸液.同時設(shè)陽性血清、陰性血清及空|'|對照孔，振蕩混勻后置于37°C溫箱中感作30min,待對照孔紅細(xì)胞已經(jīng)沉淀時觀察結(jié)果o1.5數(shù)據(jù)處理淋巴細(xì)胞值、HI效價和免疫器官指數(shù)以“平均值士標(biāo)準(zhǔn)差”表示。用SPSSII.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,比較各時間點(diǎn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化、抗體效價和免疫器官指數(shù)的差異性。2結(jié)果與分析IOM.ASP和

18、CAP對雞淋巴細(xì)胞增殖的影響OM、ASP和OAP不同劑量和免疫對照叩各時間點(diǎn)A列值均顯著高于空白對照m（P<0.05）；與免疫對照組相比較OAPh、（）.APm、（）Mh、OMm、APSh、APSm在各時間點(diǎn).OAPl和APSl在21.28.35和42日齡,OMl在21,28和42日齡的A570值顯著升高（表DoOAPh在各時間點(diǎn)心。值均顯著高于（）Mh和APSh（PV0.05）：（）APm在28日齡人灑值高于APSm.但差異不顯著.其余各時間點(diǎn)其A洌值均顯著高于（）Mm和APSm（P<0.05）；不同劑妣復(fù)方組和OMh、APSh在21日齡.膏。值達(dá)到高峰.其余各單味藥及對照組在2

19、8日齡達(dá)到高峰（表1）。表1()M、ASP和CAP高、中、低劑量對雞淋巴細(xì)胞增殖的影響Table1InfluenceofOM.ASPandOAPathigh,mediumandlowdoesonTlymphocyteproliferation組別Group日畛dDayage1421283542CAPh0.342±O.O4Oa0.395±0.086a0.384±0.051a0.366士0.083a0.318±0.040aOAPm0.334士0.073a0.386±0.061a0.375士0.055ab0.352士0.047a0.3】2士0.049

20、aCAPl0.2】l士0.065de0.309±0.041be0.308士0.078c0.284±0.063b0.258士0.032beOMh0.240士0.022h0.343士0.087b0.3】2士0.041c0.282士0.059bO.254±O.048beOMm0.23l±0.028cd0.305±0.052be0.331±0.041c0.289±0.054b0.268士0.032bOMl0.208±0.044de0.284士0.066c0.304±0.042c0.262士0.042be0.234

21、±0.064cAPSh0.255士0.019be0.340±0.034b0.324士0.070c0.301±0.044b0.263±0.040beAPSm0.238士0.044bed0.331士0.091be0.340士0.042be0.291±0.029b0.275±0.048bAPSl0.209士0.034de0.296士0.047be0.306±0.055c0.273士0.048b0.251士0.036be免疫對照Vaccinationcontrol0.188士0.027e0.236士0.068d0.239士0.041

22、d0.224±0.093c0.171±0.024d空白對照Blankcontrol0.155士0.016f0.174士0.019e0.187士0.031e0.173士0.036d0.130士0.029e注：同列數(shù)據(jù)后標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著（PV0.05）。下同。Note：Differentlowercaselettersineachcolumnindicatesignificantdifference(P<Z0.05).I'hesamebelow.2.2 ()M、ASP和OAP對雞抗體效價的影響對照組(PV0.05)；()APh和OAPm在1442日士nk

23、fA-n,、"Ad、AZz51"IZz.21日齡抗休效價顯著高于免疫對照ffl（P<0.05）oOAPh的抗休效價在各時間點(diǎn)均顯著高于OMh和APSh（P<0.05）：（）APm抗休效價在21.28.35和42日齡顯著高于（）Mm.在21.28和35日齡顯著高于APSm（PV0.05）,OAPl抗體效價在28日齡顯著高于C）Ml（P<0.05）（表2）。表2OM.ASP和（）AP高，中、低劑量對雞血清抗體效價的影響Table2Influenceof()M.ASPandOAPathigh.mediumandlowdocsonserumantibodytite

24、r組別GroupOAPh()APm()APl()Mh()MmOMlAPShAPSmAPSl免技對照Vaccinationcontrol空白對照Blankcontro7士0.48a7.5士0.52a8.7士0.67a7.9±0.56a7.0±0.67a6.5士0.71ah7.2士0.42ab8.4士0.51a7.4士0.6.9a6.8士0.63ab5.6±0.69cd6.8士0.42be7.5±0.71be6.3±0.67be5.5±0.52de5.5±0.75d6.6±0.52c6.7&#

25、177;0.48e6.1±0.56bed5.5±0.72de6.0±0.70bed6.4±0.69c7.7±O.67b6.4±0.51be5.7±0.67d5.6±0.69cd6.2±0.79cd6.8士0.63de6.2±0.78bed5.6士0.51de6.0±0.66bed6.5士0.84c7.0士0.67cde6.6士0.69b6.1士0.73cd6;2±0.42abc6.6士0.5】c7.8+0.42b6.7±0.48b6.3士0.67be6.1±

26、;0.56abed6.7士0.67be7.4士0.84bed5.9±0.73cd5.6±0.51de5.6±0.70cd5.8士0.42d6.8士0.78de5.6±0.69d5.0±0.47e2.9士0.32c2.9士0.57e2.8士0.422.7±0.67e2.6±0.42f日嶺/dDayage2.3 （）M、ASP和OAP對雞免疫器官指數(shù)的影響2.3.I法氏囊指數(shù)的變化由表3可知.OAP-OMH、OMl、免疫對照組和空白對照叩的法氏囊指數(shù)在21日齡達(dá)到峰值,其他各組在28日齡達(dá)到峰值；各藥物絹及免疫對照組法氏卷指數(shù)均

27、顯著高于空白對照（FV（）.05）；OAPh、（）APm、OMm.OML、APSh、APSm、APSl在各時間點(diǎn),OMH在21和28日齡及OAPl在14.21和28日齡法氏囊指數(shù)顯著高于免疫對照組（P<0.05）o（）APh的法氏囊指數(shù)在各時間點(diǎn)均顯著高于（）Mh.在28和35日齡顯著高于APSh.（）APm的法氏囊指數(shù)在35日齡顯著高于OMm和APSm（PV0.05）°表3（）M、ASP和CAP高，中、低劑量對雞法氏it指數(shù)的影響Table3InfluenceofOM.ASPandOAPathigh,mediumandlowdoesonbursaindex%組別Group日齡

28、/dDayage14212835OAPh0.56士0.030a0.58士0.041a0.63士0.021a0.52±0.035aOAPm0.54±0.012ab0.55士0.037ab0.58士0.014b0.50士0.011abOAPl0.45±0.022d0.50±0.020cd0.48士0.024cd0.36±0.040d()Mh0.43±0.018de0.48士0.024d0.46±0.024d0.34±0.019dOMm0.52士0.037abc0.54±0.033alx-0.56±0

29、.028b0.46±0.038beOM,.0.50士0.035c0.54士0.015be0.51±0.029c0.44±0.017cAPSh0.53±0.024abc0.55士0.031abc0.57=0.009b0.47士0.031beAPSm0.54士0.035ab0.56士0.034abO.57±O.O11b0.45±0.042cAPSl0.51±0.026be0.53±O.025al)c0.57±0.036b0.44±0.022c免疫對照Vaccinationcontrol0.40士0.

30、013e0.43±0.024e0.42±0.036e0.33±0.020d空白對照Blankcontrol0.36±0.028f0.38±0.030f0.34士0.040(0.26士0.015e2.3.2脾指數(shù)的變化山表4可知.OAP各劑量組、0Mm、APSh、APSm在各時間點(diǎn)J）MH在14和35日齡、OMl和APSl在14.21和35日齡脾指數(shù)顯著高于空白對照組<P<0.05）；OAP各劑量組、OMm.APSh、APSm在各時間點(diǎn)及OMl在21日齡和APSl在14和21日齡的脾指數(shù)均顯著高于免疫對照組（PV0.05）。（）APh

31、在各時間點(diǎn)的脾指數(shù)均顯著高于（）Mh；OAPm在21.28和35日齡的牌指數(shù)顯著高于3討論1中藥成分復(fù)方及其組分藥對淋巴細(xì)胞增殖的影響淋巳細(xì)胞增殖是反映機(jī)體細(xì)胞免疫水平的一個章要指標(biāo)細(xì)胞免疫是通過致敏淋巴細(xì)胞與相應(yīng)抗原作用而發(fā)揮抗病原休感染、抗腫瘤、幫助B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗休等作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明.9個試驗(yàn)藥物組中.除（）APl、（）Ml、APSl在II日齡，OAPh的效果最好。fflo提示（）AP、APS和OM在合適的劑量均能刺激淋巴細(xì)胞增殖.促進(jìn)細(xì)胞免疫.且以O(shè)APm、表4（）M、ASP和CAP高、中、低劑量對雞脾指數(shù)的影響Table4InfluenceofOM.ASPandOAPathigh

32、.mediumandlowdoesonspleenindex%組別Group日齡/dDayage14212835OAPh0.19士0.017ab0.21±0.014ab0.22士0.015ab0.20士0.015abOAPm0.20±0.011a0.23±0.014a0.24±0.017a0.22士0.014aOAPl0.18士0.016ab0.20±0.034abc0.20±0.016be0.18±0.027beOMh0.14±0.019d0.14±0.024d0.17±0.015d0.】6士

33、0.015cdOMm0.19±0.018ah0.19±0.023be0.20士0.012be0.18士0.016beOM,.0.15±0.010cd0.18士().023c0.16士0.009d0.】6士0.020cdAPSh0.18士0.022ab0.20士0.016abc0.21士0.0151)0.18士0.026beAPSm0.19士0.019ab0.21士0.019ab0.21±0.019b0.20±0.020abAPSl0.17±0.019be0.18二0.017be0.18±0.013cd0.17±0.

34、013cd免疫對照Vaccinationcontrol0.13士0.020de0.14*0.012d0.16士0.013d0.】4±0.012d空口對照Blankcontrol0.H±0.013c0.14±0.021d0.】4士0.0J4d0.12±0.0)7e3.2中藥成分復(fù)方及其組分藥對新城疫苗免疫應(yīng)答的影響血清抗體效價反映機(jī)體體液免疫狀態(tài).體液免疫是機(jī)體抗御感染的主要因素之.通過抗原-抗休結(jié)合反應(yīng)而起到抗菌、抗病毒、抗外毒素等多種作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明.OAPh、（）APm在5個時間點(diǎn)、（）Mm和APSm在4個時間點(diǎn)、CAPl和APSh在3個時間點(diǎn)、

35、（）Mh和APSl在I個時間點(diǎn)的抗休效價均顯著高于免疫對照組。表明OAIAPS和OM在合適的劑量均能刺激抗體產(chǎn)生,提高機(jī)體體液免疫水平.其中以O(shè)APh、（）APm和AP%的作用較強(qiáng)。3.3中藥成分復(fù)方及其組分藥對免疫器官指數(shù)的影響一般認(rèn)為.免疫器官指數(shù)降低為免疫抑制所致.而免疫器官指數(shù)增加則為免疫增強(qiáng)的表現(xiàn)M。本試驗(yàn)中（）APh、OAPm在各時間點(diǎn)的法氏囊指數(shù)、牌指數(shù)均顯著高于免疫對照和空II對照m.（）APl在14,21和28日齡的法氏囊指數(shù)和各時間點(diǎn)的脾指數(shù)顯著高于免疫對照組。除（）Mh在14和35日齡以及OAPl在35日齡的法氏囊指數(shù)高于免疫對照叩但差異不顯著外.其余各藥物組法氏囊指數(shù)均

36、顯著高于免疫對照組。在脾指數(shù)方-面.（_）Mh在各時間點(diǎn).OMl在14.28和35日齡.APSl在28和35日齡與免疫對照組無顯著差異.其余各絹、各時間點(diǎn)均顯著高于免疫對照叩。表明中藥成分復(fù)方及其叩分藥能增加免疫糖官質(zhì)量.從而增強(qiáng)機(jī)休的免疫功能。3.4中藥成分復(fù)方及其組分藥增強(qiáng)免疫作用的量關(guān)系。在促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖方面,OAPh、OAPm在各時間點(diǎn)均顯著高于免疫對照組，而OAPl在14日齡與免疫對照組無顯著差異。（）M和APS的高、中劑量緝各時間點(diǎn)的A570值與免疫對照組相比較差異顯著.而低劑量組在14日齡與免疫對照組無顯著差異.這可能是因?yàn)閯┳钸^小.不足以刺激機(jī)休產(chǎn)牛.致敏淋巳細(xì)胞所致，具體

37、原因還有待于進(jìn)-步研究；在提高血清抗體效價方面,（）APh、（）APm在各個時間點(diǎn)均顯著高于免疫對照組；OAPl在21,28和35日齡顯著高于免疫對照組。在提高法氏囊指數(shù)方面.OAPh、OAPm各時間點(diǎn)的法氏囊指數(shù)顯著高于免疫對照組;OAPl在14.21和28日齡顯著高于免疫對照組.在35日齡與免疫對照組相比較差異不顯著。Kong等皿在觀察9種中藥成分對新城疫|系疫苗免疫雛雞血清中血凝抑制抗體水平影響的研究中.也得到了類似結(jié)果。3.5中藥成分復(fù)方與其單味組分藥增強(qiáng)免疫作用的比較在促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖方面,OAPh的板值顯著商于C）Mh和APSh;在提高血清抗體效價方面-OAPh抗體效價顯著高于O

38、Mh和APSh:在提商免疫器官指數(shù)方面.OAPh的法氏囊指數(shù)顯著高于OM-OAP是由（_）M和APS組成的復(fù)方.其增強(qiáng)免疫作用優(yōu)于單味組分藥，表明兩種組分藥有協(xié)同作用。王德云等KN在研究當(dāng)歸多糖、黃此多糖、淫羊覆多糖、蜂膠黃酮等提高免疫調(diào)節(jié)作用時亦發(fā)現(xiàn).中藥成分幼萬的免疫活性優(yōu)于其單味叩分。綜合以上結(jié)果可見（）AP能顯著增強(qiáng)箱雞對新參考文獻(xiàn)IU沈留紅鄧崽丹,鄧俊良等.“禽康散”對人T.感染NDV肉對紅細(xì)胞免疫功能的影響J.揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)：農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版.2013,34(2)：16-19.ShenLM,DengHI).DengJL,etal.I'hechangesofredbloodce

39、llimmunefunctionbycomplexChinesecrudedrug"Qinkan-gsan"onchickenartificiallychallengedbyNDV*J.JournalofYangzhouUniversity：AgriculturalandLifeScienceEdition，2013.34(2),1619.(inI'hinexe)2張寶康.王德云.孔祥峰.等.蜂膠黃酮增強(qiáng)免疫作用的研究口.揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào):農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版.2006,27(3):20-22.ZhangBK.WangDY.KongXF.etal.Studiesonimmu

40、noen-IvincementofpropolisflavoneJJournalofYangzhouUniversity：AgriculturalandLifeScienceEdition.2006.27(3)：20-22.(inChinese)L3J韓慶功.崔艷紅.趙玉軍.免疫增強(qiáng)劑在雞疫病防治中的應(yīng)用LJ1獸藥與飼料添加劑,2006.11(2):19-22.IIanQG»CuiYfI.ZhaoYJ.Theapplicationofimmuneen-IvuicerinchickendiseaseprovejitionJ.VeterinaryPhamiaceulicitIs&

41、.FeudAdditives.2006.11(2)：1922.(inChinese)M您曉明，吳館妹.免疫佐劑研究的現(xiàn)狀與趨勢J.中國獸匡雜志.1996,30(1)x41-43.(»ongXM.WuYM.ThepresentsituationanddevelopmenttrendofimmuneadjuvantresearchJj.ChineseJournalofVeterinaryMedicine,1996.30(1)：41-43.(inChinese)5郭振環(huán).胡元亮.馬度，等.硫酸化香菇多糖對新城疫疫苗免疫效果的影響J.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2010.33(1):76-80.Guo

42、ZH.HuYL,MaX.etal.Adjuvanticityofsulfatedlentin-anforNewcastlediseasevaccineJ.JournalofNanjingAgriculturalUniversity.2010.33(1)：76-80.(inChinese)MaX.(>uoZII.WangDYtct(iLKffectsofsulfatedpolysiccharidesandtheirprescriptionsonimmuneresponseofNDvaccineinchickenJ.CarbohydratePolymers.2010,82：9-13.6 陳玉

43、庫.邢玉婚.蔡丙彥.等.四種中藥成分復(fù)方抗NDV感染CEF細(xì)胞描選效果分析LJ:.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué).2008(5),176-179.ChenYK,XingYJ.CaiBY.etal.EffectsofCompoundChineseHerbalMedicinalingredientonDVinfectingchickembryofibroblastJ.Jiangsu.AgriculturalSciences.2008(5)176-179.(inChinese)ChenYK.WangDY.HuYL.etal.AstragaluspolysaccharideandoxyrnatrinecansynergisticallyimprovetheimmuneefficacyofNewcastlediseasevaccineinchickenJJ.InternationalJournalofBiologicalMacromolecules,