HPLC各個部件基本原理

1、reserviorinjectorpumpcolumndetectorData systemreserviorinjectorpumpcolumndetectorData system流動相脫氣流動相脫氣吹氦脫氣法吹氦脫氣法加熱回流法加熱回流法抽真空脫氣法抽真空脫氣法超聲波脫氣法超聲波脫氣法在線真空脫氣法在線真空脫氣法HP-1100HPLCHP-1100HPLC在線脫氣結(jié)構(gòu)示意圖在線脫氣結(jié)構(gòu)示意圖1- 1-高壓輸液泵高壓輸液泵; ;2- 2-貯液罐貯液罐; ;3- 3-膜過濾器膜過濾器; ;4- 4-塑料膜管線塑料膜管線; ;5- 5-傳感器傳感器; ;6- 6-控制電路控制電路; ;7- 7

2、-電磁閥電磁閥; ;8- 8-真空泵真空泵; ;9- 9-脫氣后流動相脫氣后流動相至過濾器至過濾器; ;10-10-脫氣單元脫氣單元溶劑過濾頭的清洗溶劑過濾頭的清洗1.取下過濾頭放在取下過濾頭放在(1:4,V/V)的硝酸溶液燒杯中的硝酸溶液燒杯中超聲清洗超聲清洗15分鐘分鐘;2.取出后用蒸餾水超聲清洗取出后用蒸餾水超聲清洗10分鐘分鐘;3.用吸球吹出過濾頭中的液體用吸球吹出過濾頭中的液體;4.再用蒸餾水超聲清洗再用蒸餾水超聲清洗10分鐘分鐘;5.用吸球吹凈過濾頭中的水份用吸球吹凈過濾頭中的水份;6.將過濾頭重新插入溶劑瓶中將過濾頭重新插入溶劑瓶中(正相系統(tǒng)注意將正相系統(tǒng)注意將過濾頭烘干過濾頭烘

3、干)泵體材料耐腐蝕泵體材料耐腐蝕泵腔的體積要小，泵腔的體積要小，以便快速更換以便快速更換溶劑溶劑能在高壓下連續(xù)能在高壓下連續(xù)工作工作, ,耐壓耐壓40-40-50MPa. cm50MPa. cm2 2壓力平穩(wěn)，無壓力平穩(wěn)，無脈沖脈沖高壓輸液泵高壓輸液泵輸出流量穩(wěn)定，輸出流量穩(wěn)定，重復(fù)性高重復(fù)性高, ,輸出輸出流量范圍寬流量范圍寬高壓輸液泵高壓輸液泵恒流泵恒流泵恒壓泵恒壓泵注射型泵注射型泵往復(fù)型泵往復(fù)型泵雙泵頭往復(fù)雙泵頭往復(fù)式柱塞泵式柱塞泵雙柱塞往復(fù)雙柱塞往復(fù)式串聯(lián)泵式串聯(lián)泵往復(fù)型泵工作原理圖往復(fù)型泵工作原理圖雙泵頭往復(fù)式柱塞泵雙泵頭往復(fù)式柱塞泵1- 1-流動相入口流動相入口; ;2,3-2,3

4、-帶有單向閥帶有單向閥的泵頭的泵頭; ;4- 4-脈沖緩沖器脈沖緩沖器; ;5- 5-偏心輪偏心輪; ;6- 6-活塞活塞; ;7- 7-電動機電動機; ;8- 8-單向閥單向閥; ;9- 9-至進樣口至進樣口雙柱塞往復(fù)式串聯(lián)泵雙柱塞往復(fù)式串聯(lián)泵1- 1-貯液罐貯液罐; ;2- 2-泵泵I( I(柱塞柱塞I);I);3- 3-單向閥單向閥; ;4- 4-阻尼器阻尼器; ;5- 5-泵泵II(II(柱塞柱塞II);II);6- 6-至色譜柱至色譜柱; ;為什么為什么要沖洗要沖洗泵頭呢泵頭呢? ?1- 1-低壓計量泵低壓計量泵; ;1A,1B-1A,1B-時間比例電磁時間比例電磁閥閥; ;2- 2

5、-微處理機微處理機; ;3- 3-混合器混合器; ;4- 4-高壓輸液泵高壓輸液泵; ;5- 5-至色譜柱至色譜柱6- 6-反饋控制器反饋控制器; ;7- 7-混合室混合室; ;8- 8-流量計信號流量計信號; ;9- 9-混合溶劑出口混合溶劑出口高高壓壓梯梯度度低低壓壓梯梯度度1- 1-程序控制器程序控制器; ;2- 2-溶劑溶劑A;A;3- 3-溶劑溶劑B;B;4- 4-高壓泵高壓泵A;A;5- 5-高壓泵高壓泵B;B;恒流泵中氣泡的排除恒流泵中氣泡的排除打開放空閥打開放空閥, ,按儀器前面板的按儀器前面板的”潰洗耳恭聽潰洗耳恭聽”功能功能鍵鍵, ,用大流量溶劑沖洗系統(tǒng)直到流出的液體連續(xù)用

6、大流量溶劑沖洗系統(tǒng)直到流出的液體連續(xù), ,證明氣泡已經(jīng)排除證明氣泡已經(jīng)排除; ;如果用如果用”沖洗沖洗”狀態(tài)仍不能吸液狀態(tài)仍不能吸液, ,可以用吸耳球或可以用吸耳球或注射器在排液口抽吸注射器在排液口抽吸, ,直至液體流出直至液體流出; ;如果仍然無液體流出如果仍然無液體流出, ,可能是閥球閥座粘連可能是閥球閥座粘連, ,取出單取出單向閥向閥, ,向單向閥兩端分別吹氣向單向閥兩端分別吹氣, ,一通一堵為正常一通一堵為正常, ,兩兩端均堵說明閥球座粘連端均堵說明閥球座粘連, ,需清洗閥球閥座需清洗閥球閥座.5 5重新連接色譜柱，設(shè)定適當(dāng)流速，當(dāng)流動相流出重新連接色譜柱，設(shè)定適當(dāng)流速，當(dāng)流動相流出約

7、約3030倍于色譜柱體積，并且檢測器基線平衡后，倍于色譜柱體積，并且檢測器基線平衡后，流動相更換完畢流動相更換完畢流動相的更換流動相的更換更換互溶流動相更換互溶流動相1 1將新流動相置于儲液瓶中將新流動相置于儲液瓶中2 2打開放空閥，啟動泵使新的流動相從入空閥出打開放空閥，啟動泵使新的流動相從入空閥出口流出口流出20ml20ml左右左右3 3關(guān)閉放空閥，然后將進樣閥與色譜柱相連接端關(guān)閉放空閥，然后將進樣閥與色譜柱相連接端卸開，用小容器放置于過樣閥的出口處卸開，用小容器放置于過樣閥的出口處4 4啟動恒流泵，讓流動相從進樣閥出口流出啟動恒流泵，讓流動相從進樣閥出口流出10ml10ml左左右右流動相的更換流動相的更換換緩沖液流動相換緩沖液流動相1 1用水更換色譜系統(tǒng)中緩沖液用水更換色譜系統(tǒng)中緩沖液2 2用水含水量量用水含水量量10%60%10%60%范圍的溶劑沖洗范圍的溶劑沖洗色譜柱中的鹽色譜柱中的鹽3 3用新流動相更換水或沖洗色譜柱溶劑用新流動相更換水或沖洗色譜柱溶劑進進樣樣裝裝置置停流進樣裝置六通閥進樣裝置自動進樣器高效液相色譜檢測器高效液相色譜檢測器 紫外檢測器紫外檢測器 折光指數(shù)檢測器折光指數(shù)檢測器 電導(dǎo)檢測器電導(dǎo)檢測器 熒光檢測器熒光檢測器 蒸發(fā)激光檢測器蒸發(fā)激光檢測器可變波長的紫外吸收檢測器可變波長的紫外吸收檢測器二極管陣列檢測器工作原理二極管陣列檢