高效液相色譜儀校驗方案

1、登 記 號：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01儀器編號：QC-0072高效液相色譜儀校驗方案JSALPHARMPage 13 of 13題 目Title高效液相色譜儀校驗方案方 案 號Document #PQP-QC072-02設(shè)備編號Equipment #QC-0072安裝地點Location高效液相色譜室生產(chǎn)廠家Manufacturer日本島津（Shimadzu）公司方案審批：Approved By姓名Name職位Position簽名Signature日期Date陳凱QC分析人員于勇QC主管莫遠(yuǎn)略質(zhì)量部長江蘇阿爾法藥業(yè)有限公司Jiangsu Alpha Pharma

2、ceutical Co., Ltd.目 錄1. 目的2. 確認(rèn)人員及職責(zé) 3. 確認(rèn)前確認(rèn)4. 確認(rèn)依據(jù)及判定標(biāo)準(zhǔn)5. 確認(rèn)內(nèi)容6. 再確認(rèn)要求7. 確認(rèn)結(jié)果匯總8. 結(jié)果評價1. 目的明確穩(wěn)定性試驗箱的校驗項目、校驗條件、校驗方法、接受標(biāo)準(zhǔn)、校驗周期等，便于檢驗人員按規(guī)程進(jìn)行穩(wěn)定性試驗箱的校驗操作。 保證實驗室使用的稱量點稱量的準(zhǔn)確性。2確認(rèn)人員及職責(zé) QC分析人員：負(fù)責(zé)起草確認(rèn)方案和報告、組織協(xié)調(diào)開展確認(rèn)；QC主管：審核確認(rèn)報告和報告；質(zhì)量部長：批準(zhǔn)確認(rèn)報告和報告。3. 確認(rèn)前確認(rèn)3.1人員確認(rèn)姓名職務(wù)職責(zé)簽名日期陳 凱QC分析人員起草確認(rèn)方案和報告，執(zhí)行確認(rèn)、組織培訓(xùn)趙家寬QC分析人員協(xié)

3、助執(zhí)行確認(rèn)于 勇QC主管監(jiān)督確認(rèn)的進(jìn)行3.2文件培訓(xùn)序號培訓(xùn)內(nèi)容是否培訓(xùn)1 LC-2040C型高效液相色譜儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（QC-3079）是 否2LC-2040C型高效液相色譜儀維護(hù)保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（QC-3080）是 否3液相色譜儀的校驗操作規(guī)程（QC-4002）是 否4高效液相色譜儀校驗方案（PQP-QC072）是 否5檢驗室安全管理規(guī)程（QC-1018）是 否3.3 校驗設(shè)備確認(rèn)序號設(shè)備及要求是否符合1秒表： 分度值不大于0.1 s是 否2分析天平： 最大稱量200g,最小分度值0.1mg   是 否3容量瓶： 10.0ml A級 不少于10支是

4、否4溫度計： 分度值不大于0.1是 否5以上設(shè)備應(yīng)在校驗有效期內(nèi)是 否3.4 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和試劑確認(rèn)序號標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、試劑及要求是否符合1甲醇： HPLC級是 否2純水： HPLC級 是 否3丙酮： 分析級是 否4萘： 是 否 檢測人： 日期： 年 月 日 復(fù)核人： 日期： 年 月 日4. 確認(rèn)依據(jù)及判斷標(biāo)準(zhǔn)4.1 確認(rèn)依據(jù) 4.1.1LC-2040C型高效液相色譜儀安裝使用說明 4.1.2液相色譜儀校驗規(guī)程 JJG 705-2014 4.1.3中國藥典2010年版二部附錄 4.1.4藥品GMP指南2010年版4.2 評判標(biāo)準(zhǔn)4.2.1性能確認(rèn)(PQ)系 統(tǒng)校驗項目標(biāo) 準(zhǔn)輸液系統(tǒng)1、 泵耐壓

5、2、 泵流量設(shè)定值誤差SS3、 泵流量穩(wěn)定性SR4、梯度誤差Gi符合規(guī)定±2%2%±3%柱溫箱系統(tǒng)1、 溫度設(shè)定最大誤差2、 溫度穩(wěn)定性±21/h檢測器系統(tǒng)1、 基線噪音2、 基線漂移3、 最小檢測限5×10-4AU5×10-3AU/30min5×10-6g/ml(萘/甲醇溶液)整機(jī)性能1、 定性重復(fù)性2、 定量重復(fù)性 3、 線性測定1.0%3.0%相關(guān)系數(shù)R0.9995. 確認(rèn)內(nèi)容5.1性能確認(rèn)(PQ)5.1.1 輸液系統(tǒng)確認(rèn)5.1.1.1泵耐壓：儀器連接完好后，以100%甲醇為流動相，流速0.2ml/min.啟動儀器，待壓力平穩(wěn)后

6、，觀察10分鐘，應(yīng)無漏液現(xiàn)象。卸下色譜柱，堵住泵出口（壓力傳感器以下），使壓力達(dá)到最大允許值的90%，保存5分鐘，應(yīng)無漏液現(xiàn)象。5.1.1.2泵流量設(shè)定值誤差SS、穩(wěn)定性誤差SR：啟動儀器，按上表的要求設(shè)定流量，壓力穩(wěn)定后，用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動相，同時用秒表計時，收集上表規(guī)定時間流出的流動相，在分析天平上稱重，按式（1）、（2）計算SS、SR 流量（ml/min）次數(shù)W1W2W2-W1SSSR0.51231.01232.0123表1注： Fm=(W2-W1)/(t) Ss=(-Fs)/Fs×100% 式（1） SR=(Fmax-Fmin)/ ×100% 式（2）

7、 式中：Fm 實測流速； W2 容量瓶+流動相的質(zhì)量，g； W1 容量瓶的質(zhì)量，g； 試驗溫度下流動相的密度，g/mL； t 收集流動相的時間，min； 同一組測量的算術(shù)平均值，mL/min； FS 流量設(shè)定值，mL/min； Fmax 同一組測量中流量最大值，mL/min； Fmin 同一組測量中流量最小值，mL/min。5.1.1.3 梯度誤差Gi： 色譜條件： 色譜柱：限流阻尼管 流速：2.0ml/min 檢測波長：265nm 流動相A：純化水 流動相B：0.1%丙酮水溶液 以流動相A平衡系統(tǒng)，按表2梯度程序測試2次，記錄色譜圖。畫出B溶劑經(jīng)5段階梯從0%到100%B梯度變化曲線（如圖1

8、），求出由B溶劑變化所產(chǎn)生的每一段階梯對應(yīng)的響應(yīng)信號的變化值Li；按下列公式（1）計算每一段階梯對應(yīng)的響應(yīng)信號值的變化平均值；按下列公式（2）計算五段階梯對應(yīng)的響應(yīng)信號值的總平均值；按下列公式（3）計算每一段階梯的誤差Gi，取Gi的最大值作為儀器梯度誤差報告。表2 梯度程序時間(分)流動相A%流動相B%1.00100.00.01.0180.020.04.0080.020.04.0160.040.07.0060.040.07.0140.060.010.0040.060.010.0120.080.013.0020.080.013.010.0100.016.000.0100.021.00100.00

9、.026.00100.00.0圖1 梯度組成準(zhǔn)確度示意圖 = 公式（1） = 公式（2） Gi= 公式（3） 式中： 第i段階梯響應(yīng)信號值的平均值； L1i第i段階梯第1組響應(yīng)信號值； L1（i-1） 第（i-1）段階梯第1組響應(yīng)信號值； L2i第i段階梯第2組響應(yīng)信號值； L2（i-1） 第（i-1）段階梯第2組響應(yīng)信號值； 5段階梯響應(yīng)信號值的總平均值； Gi第i段階梯的梯度誤差表3iL1iL1（i-1）（）L2iL2（i-1）Gi1 2 3455.1.2 柱溫箱系統(tǒng)確認(rèn)依次設(shè)定柱溫箱溫度為25，35，45值進(jìn)行校驗，這些溫度應(yīng)覆蓋實驗室使用的柱溫范圍,當(dāng)使用柱溫超出該范圍時，需要增加該溫

10、度點校驗。設(shè)定待校驗溫度，待測溫儀顯示的溫度穩(wěn)定后，記錄溫度顯示值，每隔10分鐘記錄一次，每個溫度點記錄7次。求出平均值，設(shè)定值與平均值之差為設(shè)定值誤差T，7次測量值中最大值與最小值之差為控溫穩(wěn)定性誤差Tc。表4設(shè)定溫度（）次數(shù)測定溫度（）平均溫度（）T（）Tc2512345673512345674512345675.1.3 檢測器系統(tǒng)確認(rèn)5.1.3.1基線漂移和基線噪聲：色譜條件：色譜柱：C18柱 流速：1.0ml/min 檢測波長：254nm 流動相：甲醇 在分析界面中點擊基線檢查，設(shè)置參數(shù)后，點擊運(yùn)行，工作站會自動記錄30分鐘，運(yùn)行完畢后，機(jī)器自動計算出結(jié)果，給出是否通過的結(jié)論。將運(yùn)行界

11、面復(fù)制到Word文檔中，打印出來即可。其他型號站基線漂移和基線噪聲的測試方法：按不同的儀器配置，設(shè)定檢測器的靈敏度為最強(qiáng)靈敏度。待系統(tǒng)平衡后，調(diào)整基線在圖譜的中部位置，記錄基線30分鐘。以圖譜顯示的刻度值，計算基線噪音和基線漂移值?；€漂移：_ < 5×10-4AU 基線噪聲：_ < 5×10-3AU/30min5.1.3.2最小檢測限：按上述色譜條件，平衡系統(tǒng)。取20µl的1×10-7g/ml萘/甲醇溶液進(jìn)樣，記錄色譜圖。按下列公式計算最小檢測限：CL= 注：Nd與H的單位應(yīng)一致；分母中的20為進(jìn)樣體積，單位為µl。 式中： CL

12、 最小檢測濃度,g/ml； Nd 基線噪音高度； c 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,g/ml； V 進(jìn)樣體積，µl； H 標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高。 最小檢測限（CL）=_ 5.1.4整機(jī)性能確認(rèn)5.1.4.1定性與定量重復(fù)性：色譜條件： 色譜柱：C18柱 流速：1.0ml/min 檢測波長：254nm 流動相：甲醇取1×10-4g/ml萘/甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，以萘峰的保留時間和峰面積，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD，即為整機(jī)性能的定性與定量重復(fù)性。進(jìn)樣次數(shù)123456平均值RSDRT（min）峰面積表55.1.4.2進(jìn)樣針性能線性：取1×10-4g/ml萘/甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別以

13、5l、10l、15l、20l、30l的體積進(jìn)樣，記錄色譜圖。重復(fù)測定3次。以進(jìn)樣體積Vi為橫坐標(biāo)，以3次萘峰平均面積Ai為縱坐標(biāo)作線性回歸，得其線性方程及相關(guān)系數(shù)R。表6進(jìn)樣體積(l)510152030平均峰面積線性方程，相關(guān)系數(shù)R5.1.4.3線性：配置萘/甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，使?jié)舛确謩e為0.2×10-4g/ml、0.4×10-4g/ml、0.6×10-4g/ml、0.8×10-4g/ml、1.0×10-4g/ml、1.2×10-4g/ml以20l的體積進(jìn)樣，重復(fù)測定3次，記錄色譜圖。以進(jìn)樣體積Vi為橫坐標(biāo)，以3次萘峰平均面積Ai為縱坐標(biāo)作線性回歸，得其線性方程及相關(guān)系數(shù)R。表7樣品濃度×10-4g/ml0.20.40.60.81.01.2平均峰面積線性方程，相關(guān)系數(shù)R 6.再確認(rèn)要求6.1再驗證周期6.1.1 設(shè)備大修后需再校驗。6.1.2 由于檢修、調(diào)整、遷移或其它原因，可能對設(shè)備的安裝情況、主要技術(shù)參數(shù)和功能有影響時，應(yīng)進(jìn)行再驗證。6.1.3 高效液相色譜儀的驗證周期為12個月，更換部件或?qū)x器性能有懷疑時，應(yīng)隨時驗證。6.2 再驗證內(nèi)容進(jìn)行設(shè)備的再校驗，可針對設(shè)備性能中部分必須的項目進(jìn)行再驗證，而不一定要進(jìn)行全面的驗證。 7. 確認(rèn)結(jié)果匯總7.1性能確認(rèn)(PQ)系 統(tǒng)校驗項目標(biāo) 準(zhǔn)測試結(jié)果輸液系統(tǒng)泵耐