
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
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文檔簡介
1、TaqMan探針熒光定量PCR反應(yīng)試劑盒使用說明書(Cat#Yu-R01-2)【產(chǎn)品介紹】TaqMan熒光探針的5'末端連接熒光基團(tuán),而淬滅劑則在3'末端。PCR擴(kuò)增時(shí)在加入引物的同時(shí)加入特異性的熒光探針。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。本公司專利技術(shù)生產(chǎn)的TaqMan探針熒光定量PCR反應(yīng)試劑盒含有熒光增強(qiáng)劑,對FAM、HEX和VIC等熒光物質(zhì)的有明顯的熒光增強(qiáng)效果,靈敏度高,結(jié)果可靠,性能優(yōu)良,在許多性能上完全超越
2、國外同類產(chǎn)品?!井a(chǎn)品特點(diǎn)】1. 適用于使用Taqman-TAMRA和Taqman-BHQ1等探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR,對FAM、HEX和VIC等熒光物質(zhì)的有明顯的熒光增強(qiáng)效果。結(jié)合本公司的各種游離DNA提取試劑盒(Cat#Yu-CF-01-1,Cat#Yu-CF-01-2,Cat#Yu-CF-02-1,Cat#Yu-CF-02-2),可以進(jìn)行游離DNA的定量檢測。2. 靈敏度高:本產(chǎn)品的擴(kuò)增效率明顯高于進(jìn)口產(chǎn)品(圖1)。3. 穩(wěn)定性好:本產(chǎn)品重復(fù)好,CV值<2%。4. 操作簡單:只需在反應(yīng)體系中加入引物、探針、模板和ROX。5. 本產(chǎn)品使用熱啟動(dòng)酶,可以進(jìn)行HotStart法PCR反應(yīng)。
3、6. 本產(chǎn)品無本品無OSHA規(guī)定的危險(xiǎn)物品,安全無化學(xué)污染。【適用儀器】ThermalCycler系列熒光定量PCR儀、AppliedBiosystems系列熒光定量PCR儀、RocheDiagnosticsLightCycler系列熒光定量PCR儀、Bio-RadCFX96Real-TimePCRDetectionSystem。Mm4Ml9gbwpM.一-+一邑嵯融1叩毗=用0值PfbEftJVTX*1HIFAr*,pisdf:群312if也圖1本產(chǎn)品擴(kuò)增,globin基因結(jié)果與進(jìn)口產(chǎn)品的比較?!驹噭┖薪M成】試劑盒組成數(shù)量保存條件TaqMan探針熒光定量PCR反應(yīng)預(yù)混液(5X)250山-20
4、C保存Roxdye2(50為15pL-20C保存ddH2O1mL使用說明書1份【規(guī)格】50T/盒【貯藏與有效期】PCR反應(yīng)預(yù)混液-20C保存,有效期12個(gè)月。開蓋后,4c保存,有效期2周。Roxdye2(50X)-20C保存,有效期24個(gè)月。【有效成分】Tris-Hcl,氯化鉀,氯化鎂【自備試劑】無【注意事項(xiàng)】使用前務(wù)必認(rèn)真閱讀以下注意事項(xiàng)。1 .使用前充分融解,輕輕顛倒混勻,避免起泡,短暫離心后使用。2 .反應(yīng)液的配制和分裝務(wù)必使用無污染的尖嘴、EP管等。3 .如果配制試劑時(shí)間較長,請將融解后的反應(yīng)液于冰上放置。4 .試劑盒僅供科研使用?!静僮鞑襟E】1、在無菌潔凈PCR管中依次加入以下試劑:
5、成分加入量(山)終濃度PCR反應(yīng)預(yù)混液(5%51X上游引物(10gM)0.50.2M下游引物(10gM)0.50.2M探針(10.M)0.750.3M模板10ddH2O8Roxdye2(50%0.25總體積25注:以下僅為建議,最佳條件需要各個(gè)實(shí)驗(yàn)室摸索。通常引物濃度為0.2M可以獲得很好的結(jié)果。反應(yīng)不佳時(shí),引物濃度可以在0.11M范圍內(nèi)調(diào)整。使用的探針濃度與定量PCR儀、探針種類和熒光標(biāo)記物質(zhì)有關(guān)。通常探針終濃度在0.10.5M范圍內(nèi)調(diào)整。模板添加量因模板溶液中靶基因的拷貝數(shù)不同而不同,模板添加量最好在100ng以下。Ro娓否加入視儀器而定。2、充分混勻后短暫離心。3、擴(kuò)增:95c預(yù)變性30秒;95c變性5秒,60c退火40秒,共40個(gè)循環(huán)。注:以下僅為建議,擴(kuò)增最佳條件需要
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