臨床分子生物學(xué)檢驗復(fù)習(xí)題

1、臨床分子生物學(xué)檢驗練習(xí)題及答案一，名詞解釋1、基因能夠表達(dá)和產(chǎn)生蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列,是決定遺傳性狀的功能單位.2、端粒：以線性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒.該結(jié)構(gòu)br是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體，僅在真核細(xì)胞染色體末端存在.3、啟動子：是RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列.4、增強子：位于真核基因中遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點，能明顯增強啟動子轉(zhuǎn)錄效率的特殊DNA序列.它可位于被增強的轉(zhuǎn)錄基因的上游或下游，也可相距靶基因較遠(yuǎn).5、基因表達(dá)：是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄，翻譯等一系列過程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能

2、和生物學(xué)效應(yīng)的全過程.6、信息分子：調(diào)節(jié)細(xì)胞生命活動的化學(xué)物質(zhì).其中由細(xì)胞分泌的調(diào)節(jié)靶細(xì)胞生命活動的化學(xué)物質(zhì)稱為細(xì)胞間信息分子；而在細(xì)胞內(nèi)傳遞信息調(diào)控信號的化學(xué)物質(zhì)稱為細(xì)胞內(nèi)信息分子.7、受體：是存在于靶細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)能特異識別生物活性分子并與之結(jié)合，進(jìn)而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)的的特殊蛋白質(zhì).8、分子克?。涸隗w外對DNA分子按照即定目的和方案進(jìn)行人工重組，將重組分子導(dǎo)入合適宿主，使其在宿主中擴增和繁殖，以獲得該DNA分子的大量拷貝.9、載體：能在連接酶的作用下和外源DN*段連接并運送DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子.10、 轉(zhuǎn)化：指質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組DNA導(dǎo)入細(xì)菌的過程.11、 感染

3、：以噬菌體，粘性質(zhì)粒和真核細(xì)胞病毒為載體的重組DNA分子，在體外經(jīng)過包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適當(dāng)?shù)募?xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)擴增.12、 轉(zhuǎn)導(dǎo)：指以噬菌體為載體，在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過程，有時也指在真核細(xì)胞之間通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細(xì)胞DNA的過程.13、 轉(zhuǎn)染：指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程.14、 DNA變性：在物理或化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價鍵則不受影響.15、 DNA復(fù)性：當(dāng)促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過堿基互補配對結(jié)合形成16、 癌基因：是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長的基因，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化

4、的特性.當(dāng)癌基因17、 核酶：是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組成的酶，可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑.18、 DNA變性：在物理或化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價鍵則不受影響.19、 反義RNA:堿基序列正好與有意義的mRNA互補的RNA稱為反義RNA.可以作為一種調(diào)控特定基因表達(dá)的手段20、 DNA復(fù)性：當(dāng)促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過堿基互補配對結(jié)合形成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu).21、 退火：指將溫度降至引物的TM值左右或以下，引物與DNA摸板互補區(qū)域結(jié)合形成雜交鏈.22、 定量PCR:基因表達(dá)涉及的轉(zhuǎn)錄水平的研究常需要

5、對mRNA進(jìn)行定量測定，對此采用的PCR技術(shù)就叫定量PCR.23、 基因表達(dá)：是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄，翻譯等一系列過程合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能和生物學(xué)效應(yīng)的全過程.24、 基因治療：一般是指將限定的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入患者特定的靶細(xì)胞，以最終達(dá)到預(yù)防或改變特殊疾病狀態(tài)為目的治療方法.25、 管家基因：在生物體生命的全過程都是必須的，且在一個生物個體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)的基因.26、 SD序列：轉(zhuǎn)錄出的mRNA要進(jìn)入核糖體上進(jìn)行翻譯，需要一段富含喋吟的核甘酸序列與大腸桿菌16SrRNA3,末端富含喀噬的序列互補，是核糖體的識別位點.27、 核酸探針：探針

6、是指能與某種大分子發(fā)生特異性相互作用，并在相互作用之后可以檢測出來的生物大分子.核酸探針是指能識別特異堿基順序的帶有標(biāo)記的一段DNA或RNA分子.28、 周期蛋白：是一類呈細(xì)胞周期特異性或時相性表達(dá)，累積與分解的蛋白質(zhì)，它與周期素依賴性激酶共同影響細(xì)胞周期的運行.二，問答題1、影響DNA穩(wěn)定性的因素有哪些氫鍵，磷酸酯鍵，堿基堆積力，疏水作用力2、受體的特點有哪些？1,高度專一性；2,高度親和性；3,可逆性;4,可飽和性;5,特定的作用模式3、什么是基因組？細(xì)胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和.4、基因工程的定義是什么？有目的的通過分子克隆技術(shù)，人為的操作改造基因，改變生物遺傳性狀的系列

7、過程.5、請問哪些條件可促使DNA復(fù)性（退火）降低溫度.pH值和增加鹽濃度可以促進(jìn)DNA復(fù)性（退火）6、原核基因組的特點有哪些？為一條環(huán)狀雙鏈DNA;只有一個復(fù)制起點；具有操縱子結(jié)構(gòu)；絕大部分為單拷貝;基因一般是連續(xù)的，無內(nèi)含子：重復(fù)序列很少.7、病毒基因組的特點有哪些種類單一：單倍體基因組：每個基因組在病毒中只出現(xiàn)一次；形式多樣；大小不一；基因重疊；動物/細(xì)菌病毒與真核/原核基因相似：內(nèi)含子;具有不規(guī)則的結(jié)構(gòu)基因;基因編碼區(qū)無間隔：通過宿主及病毒本身酶切；無帽狀結(jié)構(gòu)；結(jié)構(gòu)基因沒有翻譯起始序列.8、真核基因組的特點有哪些真核生物基因組遠(yuǎn)大于原核生物基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因數(shù)龐大，具有多個復(fù)制起點

8、;基因組DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成染色體，儲存于細(xì)胞核內(nèi)；真核基因為單順反子,而細(xì)菌和病毒的結(jié)構(gòu)基因多為多順反子；基因組中非編碼區(qū)多于編碼區(qū)；真核基因多為不連續(xù)的斷裂基因，由外顯子和內(nèi)含子鑲嵌而成；存在大量的重復(fù)序列;功能相關(guān)的基因構(gòu)成各種基因家族；存在可移動的遺傳因素；體細(xì)胞為雙倍體，而精子和卵子為單倍體.9、乳糖操縱子的組成有哪些？大腸桿菌乳糖操縱子含Z,Y,A三個結(jié)構(gòu)基因，分別編碼半乳糖甘酶，透酶和半乳糖甘乙酰轉(zhuǎn)移酶，此外還有一個操縱序列O,一個啟動子P和一個調(diào)節(jié)基因I.10、什么是轉(zhuǎn)基因動物？是指用人工方法將外源基因?qū)牖蛘系交蚪M內(nèi)，并能穩(wěn)定傳代的一類動物11、什么是限制性核酸內(nèi)切酶是細(xì)

9、菌產(chǎn)生的一類能識別和切割雙鏈DNA分子內(nèi)特定的堿基順序的核酸水解酶.12、基因突變的類型有哪些？點突變:DNA大分子上一個堿基的變異.分為轉(zhuǎn)換和顛換.缺失:一個堿基或一段核甘酸鏈從DNA大分子上消失.插入:一個原來沒有的堿基或一段原來沒有的核甘酸鏈插入到DNA大分子中問.倒位:DNA鏈內(nèi)重組，使其中一段方向倒置.12、簡述轉(zhuǎn)基因動物的主要應(yīng)用有哪些(1)建立用于研究外源基因表達(dá)調(diào)控體系；(2)建立醫(yī)學(xué)中常用的疾病模型；(3)培育動物新品種；13、什么是細(xì)胞癌基因？存在于正常的細(xì)胞基因組中，與病毒癌基因有同源序列，具有促進(jìn)正常細(xì)胞生長增殖，分化和發(fā)育等生理功能.在正常細(xì)胞內(nèi)未激活的細(xì)胞癌基因叫原

10、癌基因，當(dāng)其受到某些條件激活時，結(jié)構(gòu)和表達(dá)發(fā)生異常，能使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化.14、什么是病毒癌基因？存在于病毒(大多是逆”$錄病毒)基因組中能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因.它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分，對病毒無復(fù)制作用，但是當(dāng)受到外界的條件激活時可產(chǎn)生誘導(dǎo)月中瘤發(fā)生的作用.15、RFLP的定義是什么？RFLP即限制性片段長度多態(tài)性，個體之間DNA的核甘酸序列存在差異，稱為DNA多態(tài)性.若因此而改變了限制性內(nèi)切酶的酶切位點則可導(dǎo)致相應(yīng)的限制性片段的長度和數(shù)量發(fā)生變化，稱為RFLP.三、綜合題1、實時PCR中兩種熒光檢測方法各有什么優(yōu)缺點？(1)染料技術(shù)優(yōu)點：成本較低，無須對引物或探針進(jìn)行特殊的熒光標(biāo)記，操作

11、亦比較簡單。缺點：特異性不夠，染料分子會結(jié)合到非特異性擴增產(chǎn)生的雙鏈分子和引物二聚體中，使反應(yīng)體系中的熒光本底較高。(2)探針技術(shù)優(yōu)點：高度特異性；重復(fù)性好；靈敏度高；可進(jìn)行多重定量缺點：只適合一個特定的目標(biāo)；委托公司標(biāo)記，價格較高；不易找到本底低的探針。2、簡述真核生物轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機制答1),5，端力口帽和3,端多聚腺甘酸化的調(diào)控意義：5,端加帽和3,端多聚腺甘酸化是保持mRNA穩(wěn)定的一個重要因素，它至少保證mRNA在轉(zhuǎn)錄過程中不被降解.(2),mRNA選擇性剪接對基因表達(dá)調(diào)控的作用(3),mRNA運輸?shù)目刂?、簡述良好載體具有的條件1,必須有自身的復(fù)制子；2,載體分子上必須有多克隆位點

12、，以供外源DNA插入；3,載體應(yīng)具有可供選擇的遺傳標(biāo)志，以區(qū)別陽性重組子和陰性重組子；4,載體分子必須有足夠的容量；5,可通過特定的方法導(dǎo)入細(xì)胞；6,對于表達(dá)載體還應(yīng)具備與宿主細(xì)胞相適應(yīng)的啟動子等DNA調(diào)控元件.4、簡述核酸分子雜交的原理答:具有互補序列的兩條單鏈核酸分子在一定的條件下(適宜的溫度及離子強度等)堿基互補配對結(jié)合，重新形成雙鏈；在這一過程中，核酸分子經(jīng)歷了變性和復(fù)性的變化，以及在復(fù)性過程中個分子間鍵的形成和斷裂.雜交的雙方是待測核酸和已知序列.5、簡述探針的種類和優(yōu)缺點答:1)cDNA探針:通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA后,將其克隆于適當(dāng)?shù)目寺≥d體，通過擴增重組質(zhì)粒而使cDNA得到大量的

13、擴增.提取質(zhì)粒后分離純化作為探針使用.它是目前應(yīng)用最為廣泛的一種探針.2）基因組探針：從基因組文庫里篩選得到一個特定的基因或基因片段的克隆后，大量擴增，純化，切取插入片段，分離純化為探針.3）寡核甘酸探針：根據(jù)已知的核酸順序，采用DNA合成儀合成一定長度的寡核昔酸片段作為探針.4） RNA探針:采用基因克隆和體外轉(zhuǎn)錄的方法可以得到RNA或反義RNA作為探針.6、簡述PCR反應(yīng)的原理及步驟PCR反應(yīng)，是體外合成特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。反應(yīng)分為三步：1 .變性：在高溫條件下，DNA雙鏈解離形成單鏈2 .退火：溫度突然降低，引物與其互補的模板在局部形成雜交鏈3 .延伸：聚合酶催化以引物為起始

14、點的DNA鏈延伸反應(yīng)。7、簡述轉(zhuǎn)基因動物的概念，原理概念:是指用人工方法將外源基因?qū)牖蛘系交蚪M內(nèi)，并能穩(wěn)定傳代的一類動物.它的特點是"分子及細(xì)胞水平操作，組織及動物整體水平表達(dá)".基本原理：將目的基因或基因組片段用顯微注射等方法注入實驗動物的受精卵或著床前的胚胎細(xì)胞中，使目的基因整合到基因組中，然后將此受精卵或著床前的胚胎細(xì)胞再植入受體動物的輸卵管或子宮中，使其發(fā)育成攜帶有外源基因的轉(zhuǎn)基因動物，人們可以通過分析轉(zhuǎn)基因和動物表型的關(guān)系，揭示外源基因的功能；也可以通過轉(zhuǎn)入外源基因培育優(yōu)良的動物品種.8、簡述突變的遺傳效應(yīng)遺傳密碼的改變：錯義突變，無義突變，同義突變，移碼突變對mRNA剪接的影響：一是使原來的剪接位點消失；二是產(chǎn)生新的剪接位點.蛋白質(zhì)肽鏈中的片段缺失：9、簡述三種RNA在蛋白質(zhì)合成過程中的作用RNA有三種mRNA、tRNA、