鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵-實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、邈殲由，奈七，學(xué)分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)題目：鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵學(xué) 院：專(zhuān) 業(yè)：食品科學(xué)與工程班 級(jí)：姓 名：學(xué) 號(hào)：同組者：一. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 了解分光光度法測(cè)定物質(zhì)含量的一般條件及其選定方法2. 掌握鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵的方法3. 了解722型分光光度計(jì)的構(gòu)造和使用方法二. 實(shí)驗(yàn)原理1. 光度法測(cè)定的條件：分光光度法測(cè)定物質(zhì)含量時(shí)應(yīng)注意的條件主要是顯色反響的條件和測(cè)量吸光度的條件。顯色反響的條件有顯色劑用量、介質(zhì)的酸3+ Fe2+度、顯色時(shí)溶液溫度、顯色時(shí)間及干擾物質(zhì)的消除方法等；測(cè)量吸光度的條件包括應(yīng)選擇的入射光波長(zhǎng)，吸光度范圍和參比溶液等。2. 在PH=2-9勺條件下，F(xiàn)e2

2、+與鄰二氮雜菲o-ph丨生成極穩(wěn)定的橘紅色配合物， 反響式如下：此配合物的IgK穩(wěn)=21.3摩爾吸收系數(shù)& 510 X104在顯色前，首先用鹽酸羥胺把Fe2+復(fù)原成Fe3+.其反響式如下：2Fe3+ +2NH 2 OH- HC1 = 2Fe 2+ +N 2 T +214 0+4H +2C1-測(cè)定時(shí)，控制溶液酸度在PH=£右較為適宜。酸度過(guò)高時(shí)，反響進(jìn)行較慢；酸度 太低，那么Fe 2+水解，影響顯色。三、實(shí)驗(yàn)儀器 分光光度計(jì)、容量瓶、移液管、洗瓶四、實(shí)驗(yàn)步驟1. 條件實(shí)驗(yàn)(1) 吸收曲線的測(cè)繪準(zhǔn)確吸取 20卩g mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL于50 mL容量 瓶中，參加5冊(cè)酸羥胺溶液1

3、 mL搖勻，參加1 mol L-1NaOA(溶液5 mL和 0.1% 鄰二氮雜菲溶液3 mL。以水稀釋至刻度，搖勻。放置 10 min，在722型分光光 度計(jì)上，用1 cm比色皿，以水為參比溶液，波長(zhǎng)從 570 nm到430 nm為止，每 隔10 nm測(cè)定一次吸光度。如圖1所示，其最大吸收波長(zhǎng)為510 nm,故該實(shí)驗(yàn) 選擇測(cè)定波長(zhǎng)為 510 nm。(2) 鄰二氮雜菲 -亞鐵配合物的穩(wěn)定性用上面溶液繼續(xù)進(jìn)行測(cè)定，其方法是在最大吸收波長(zhǎng)510 nm處，每隔一定時(shí)間測(cè)定其吸光度， 及再參加顯色劑后立即測(cè)定一次吸光度， 經(jīng) 10、20、30、120 min 后，再各測(cè)一次吸光度。3顯色劑濃度實(shí)驗(yàn) 取5

4、0 mL容量瓶7只，編號(hào)。每只容量瓶中準(zhǔn)確參加20 ug mL1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL以及1mL5鹽酸羥胺溶液，經(jīng)2 min后。再參加5 mL1 mol L-1 NaOA(溶液，然后分別參加0.1%鄰二氮雜菲溶液0.3mL、0.6mL、1.0 mL 1.5 mL 2.00 mL 3.0 mL和4.0 mL，用水稀釋至刻度，搖勻，在分光光度計(jì)上， 用最大吸收波長(zhǎng) 510 nm、1 cm 比色皿，以水為參比，測(cè)定上述溶液的吸光度。1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取50mL容量瓶6只，編號(hào)。分別吸取20卩g mL1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL 和 10.0 mL 于 5 只容量瓶中，另

5、一只容量瓶中不加標(biāo)準(zhǔn)溶 液配制空白溶液，作參比 。然后各加 5%鹽酸羥胺溶液，搖勻，經(jīng) 2 min 后， 再各加5 mL1 mol 匚1 NaAc溶液及3 mL1 g L-1鄰二氮雜菲溶液，以水稀釋至刻 度線，搖勻。放置10 min，在分光光度計(jì)上，用1 cm比色皿，在510 nm處， 測(cè)定各溶液的吸光度。以鐵含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。( 2)未知液中鐵含量的測(cè)定吸取 5ml 未知液代替標(biāo)準(zhǔn)溶液，其他步驟均同上測(cè)定吸光度。由未知液的 吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出 5ml 未知液中的鐵含量， 然后以每毫升未知液中含鐵多 少微克表示結(jié)果。五、記錄與計(jì)算吸光度A(1)吸收曲線的測(cè)繪波長(zhǎng)

6、nm570550530520510500490470450430吸收曲線討論：從曲線可以看出，在一定范圍內(nèi)，當(dāng)波長(zhǎng)較小時(shí)，隨波長(zhǎng)增加吸光度增加。 測(cè)定的適宜波長(zhǎng)是510nm2鄰二氮雜菲亞鐵配合物的穩(wěn)定性放置時(shí)間t /mi n05101520穩(wěn)定性穏定性曲議0.39050.39D. 33S5H. 389I 3EK55：01520討論：從曲線可以看出，配合物穩(wěn)定性較好。(3)顯色劑用量的測(cè)定容量瓶號(hào)顯色劑量/mL吸光度A10.12523530.38640.41850.42860.41570.424(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)繪與鐵含量的測(cè)定試液編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)溶液的量V/mL總含鐵量m/ug吸光度A1000.000

7、2400.1953800.35741200.47951800.67862000.831未知液標(biāo)準(zhǔn)曲線.? = o. 003?x+0.0212：鐵含S:/ ysi討論：1.再用分光光度計(jì)測(cè)量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)應(yīng)注意什么？答:再用分光光度計(jì)測(cè)量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)， 應(yīng)保持用一個(gè)比色皿測(cè)量,這樣可以減小比色皿自身對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的影響。2. 如用配置已久的鹽酸羥胺溶液，對(duì)分析結(jié)果將帶來(lái)什么影響？答：鹽酸羥胺是用來(lái)將Fe3復(fù)原成Fe2的，如果配制已久，復(fù)原能力減弱，就 會(huì)使局部鐵離子得不到復(fù)原，造成分析結(jié)果偏小3. 鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵的適宜條件是什么？答：測(cè)定時(shí)，要控制 PH=5左右較好，弱酸度較高，反響速