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1、紫外線殺菌試驗生物科學 121李萍 12640112一、實驗?zāi)康?、了解紫外線的殺菌作用原理。2、學習紫外線殺菌試驗方法。二、實驗原理1)紫外線殺菌屬于射線殺菌的一種;2)殺菌波長 240nm-280nm,265nm-266nm范圍最強,此范圍與DNA吸收光譜一致;3)其殺菌機制:短波的紫外線引起細胞核酸變性導(dǎo)致微生物死亡。不同的菌,紫外線的殺菌時間不同,殺菌的效果不同。不同的菌,紫外線的殺菌時間不同,對于一般的細菌只要很短的時間,對于有芽孢的菌,它本身抗逆性非常強,因此殺滅的時間會相對更長一些4)特點:殺菌作用強、穿透能力很弱、適用于空間消毒和表面消毒三、實驗材料和用具培養(yǎng) 24-48h的大
2、腸桿菌5 皿牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基接種環(huán)酒精燈紫外燈四、實驗步驟( 1)制平板 -取無菌平皿 5 個,將已熔化并冷卻至 50左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基按無菌操作法倒入平皿中,使冷凝成平板。( 2)標記 -在平板底部標記姓名、日期、班級、實驗室號及紫外照射時間(30s,60s,90s,120s,150s)。( 3)接種 -用接種環(huán)取細菌密集接種于培養(yǎng)基上。( 4)紫外線處理 -將紫外燈光開燈預(yù)熱 3min。再將上述平皿置于紫外燈下,將平板按照時間順序在紫外燈下方擺成一排,并用平皿蓋遮住細菌涂布面的一半。( 5)培養(yǎng) -每隔 30s取出一塊平皿,放入 37溫箱中孵育 18-24h,注意事項1.在
3、使用過程中,應(yīng)保持紫外燈表面的清潔。2 紫外線對皮膚和眼睛有損傷作用,應(yīng)注意防護。五、預(yù)期結(jié)果:1.蓋子蓋住的瓊脂表面,可見大腸桿菌形成的菌落。2.直接暴露于紫外線下的瓊脂表面無菌生長或只有少量菌生長,且隨著照射時間的延長,殺菌效果越好,殘余菌越少。六、實驗結(jié)果及分析大腸桿菌無皿蓋有皿蓋30s60s90s120s150s結(jié)果分析:紫外線對微生物有強烈的致死作用,其殺菌機制是短波的紫外線引起細胞核酸變性導(dǎo)致微生物死亡。五皿培養(yǎng)皿左半邊為無皿蓋,右半邊為有皿蓋,由圖可知,從 30s-150s,所長菌從多到少,但長得都較多。紫外燈照射時間不同,效果不同, 30s下,紫外燈照射對菌生長無明顯影響,長的菌都較多。隨著時間增加,紫外燈照射對菌生長有了抑制作用,起到的殺菌效果增強。從設(shè)置的時間上看, 90s 后效果開始明顯。對比有蓋和無蓋,當紫外燈照射相同時間,無皿蓋的菌長的比有皿蓋少。說明有蓋能減弱紫外線對菌的殺菌作用,但從 150s下的那個皿可以看出,紫外燈對菌殺菌作用即使在有皿蓋保護情況下,也會隨著時間增加而增強??偠灾?,紫外線殺菌,且隨著照射時間的延長,殺菌效果越好,殘余菌越少。加皿蓋能削弱紫外線對菌的殺菌作用。不足點:1、雖然
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