臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢2011.91

1、臨床微生物標(biāo)本的采集與送臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢檢主主要要內(nèi)內(nèi)容容J標(biāo)本采集的意義和原則J標(biāo)本的運(yùn)送與拒收原則J血液標(biāo)本采集J尿標(biāo)本采集J糞便標(biāo)本采集J痰標(biāo)本采集J咽拭子標(biāo)本采集臨床感染性疾病的診斷和治療臨床感染性疾病的診斷和治療應(yīng)用良好的檢測(cè)技術(shù)和方法，提供準(zhǔn)確的結(jié)果或報(bào)告應(yīng)用良好的檢測(cè)技術(shù)和方法，提供準(zhǔn)確的結(jié)果或報(bào)告正確規(guī)范的采集和運(yùn)送標(biāo)本正確規(guī)范的采集和運(yùn)送標(biāo)本正確地選擇檢查目的和方法正確地選擇檢查目的和方法 標(biāo)本采集是指采集患者體內(nèi)的一小部分血液、體液、排泄物、分血液、體液、排泄物、分泌物以及組織細(xì)胞泌物以及組織細(xì)胞等標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，以反映機(jī)體正常的生理現(xiàn)象和病理改變。 標(biāo)標(biāo) 本本 采

2、采 集集 標(biāo)標(biāo) 本本 采采 集集標(biāo)本采集正確與否與檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性有密切的關(guān)系因此，我們應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法。協(xié)助明確疾病診斷協(xié)助明確疾病診斷推測(cè)病程進(jìn)展推測(cè)病程進(jìn)展 制定治療措施制定治療措施觀察病情觀察病情 遵照醫(yī)囑遵照醫(yī)囑充分準(zhǔn)備充分準(zhǔn)備 嚴(yán)格查對(duì)嚴(yán)格查對(duì) 正確采集正確采集 及時(shí)送檢及時(shí)送檢一、按醫(yī)囑采集標(biāo)本n醫(yī)生填寫(xiě)檢驗(yàn)申請(qǐng)單n檢驗(yàn)單應(yīng)標(biāo)明姓名、性別、住院號(hào)、床號(hào)、標(biāo)本種類(lèi)、檢驗(yàn)?zāi)康暮退蜋z日期等。二、評(píng)估(充分準(zhǔn)備、嚴(yán)格查對(duì))采集標(biāo)本前應(yīng)先評(píng)估患者的病情、 心理反應(yīng)與合作程度。根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇相應(yīng)的標(biāo)本容器在容器外貼上檢驗(yàn)單的副聯(lián)二、評(píng)估(充分準(zhǔn)備、嚴(yán)格查對(duì))向患者解釋采集標(biāo)本的目的

3、方法、 以消除顧慮，取得合作。采集時(shí)認(rèn)真核對(duì)床號(hào)、姓名、檢 驗(yàn)項(xiàng)目等三、掌握正確的標(biāo)本采集方法 為保證標(biāo)本的質(zhì)量，獲得陽(yáng)性結(jié)果，應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法、采集量和采集時(shí)間并應(yīng)及時(shí)送檢，特殊標(biāo)本還需注明采集時(shí)間。 四、及時(shí)送檢 采集標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)送檢，一般情況下，用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本保存時(shí)間不應(yīng)超過(guò)24h，最好2h內(nèi)能送檢，越快越好，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。標(biāo)本的運(yùn)送原則所有的標(biāo)本都必須立即送往實(shí)驗(yàn)室，最好在2h內(nèi),保存時(shí)間不應(yīng)超過(guò)24h.最佳的臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本的量.量少的標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.對(duì)環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對(duì)低溫敏感）應(yīng)立即處理，禁

4、止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本。標(biāo)本的拒收原則n無(wú)標(biāo)簽無(wú)標(biāo)簽不檢測(cè)，并與送檢的醫(yī)生和護(hù)士聯(lián)系。n送檢延誤送檢延誤不接收，提醒送檢者，要求重新采集。n送檢容器不當(dāng)或滲漏送檢容器不當(dāng)或滲漏不接收，告知送檢者，要求重新采集。標(biāo)本的拒收原則n標(biāo)本不符合要求標(biāo)本不符合要求不接收，聯(lián)系送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗(yàn)要求的標(biāo)本.n同一天內(nèi)收到同一檢測(cè)目的的相同標(biāo)本同一天內(nèi)收到同一檢測(cè)目的的相同標(biāo)本（血液標(biāo)本除外）不檢測(cè)，與送檢者聯(lián)系并說(shuō)明標(biāo)本重復(fù)不予處理，并在報(bào)告單上注明 標(biāo)本拒收原則制訂的目的n我們必須重視標(biāo)本的質(zhì)量，對(duì)不規(guī)范采集、保存和運(yùn)送的標(biāo)本要采取糾正措施。如果檢測(cè)不合格的

5、標(biāo)本，那么得出的結(jié)果會(huì)給醫(yī)生提供錯(cuò)誤的信息，導(dǎo)致誤診和治療不當(dāng)。因此，實(shí)驗(yàn)室必須制訂并嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)本接收和拒收準(zhǔn)則 臨床常見(jiàn)標(biāo)本n血液血液（生化、免疫及生化、免疫及微生物檢驗(yàn)微生物檢驗(yàn)）n尿液尿液n糞便糞便n痰及上呼吸道標(biāo)本痰及上呼吸道標(biāo)本n穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）n膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本n生殖道標(biāo)本n組織標(biāo)本血標(biāo)本檢驗(yàn)的意義n血液是臨床最常見(jiàn)的檢驗(yàn)項(xiàng)目n它可以反映血液系統(tǒng)本身的病變n還可判斷病人病情進(jìn)展程度n為治療疾病提供參考。 血標(biāo)本采集方法（一）靜脈血標(biāo)本（最常用）（二）動(dòng)脈血標(biāo)本(血?dú)夥治?（三）毛細(xì)血管標(biāo)本（血常規(guī)） 靜脈血標(biāo)本分類(lèi)及目的靜脈血標(biāo)本分類(lèi)及目的全血標(biāo)本全血標(biāo)

6、本血清標(biāo)本血清標(biāo)本血培養(yǎng)標(biāo)本血培養(yǎng)標(biāo)本 血沉、血常規(guī)、血沉、血常規(guī)、凝血機(jī)制檢測(cè)等凝血機(jī)制檢測(cè)等血清酶、脂類(lèi)、血清酶、脂類(lèi)、電解質(zhì)、肝功能電解質(zhì)、肝功能血中的致病血中的致病菌菌靜脈血采集操作步驟及要點(diǎn) n攜用物至床邊，核對(duì)床號(hào)、姓名、解釋 n戴手套，選擇靜脈，常規(guī)系止血帶、 n消毒皮膚，囑患者握拳 n行靜脈穿刺、取血、松止血帶、n囑患者松拳、按壓針眼、迅速拔針n穿刺點(diǎn)按壓23min 血液注入標(biāo)本瓶?jī)?nèi)方法 血清標(biāo)本： 取下針頭取下針頭，將血液順試管壁緩慢注入干燥試管（干燥試管（最常最常用用）內(nèi)。 注入血標(biāo)本的方法注意事項(xiàng)（1）嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。（最好在對(duì)側(cè)采集）

7、注意事項(xiàng)（2）若同時(shí)抽取幾個(gè)項(xiàng)目的血標(biāo)本，一般注入容器的順序?yàn)椋貉囵B(yǎng)瓶血培養(yǎng)瓶抗凝瓶抗凝瓶干燥試管干燥試管. 動(dòng)作要迅速準(zhǔn)確，避免溶血。 血標(biāo)本的微生物學(xué)檢查n1.采血時(shí)間及次數(shù)：一般應(yīng)在抗生素治療前，抗生素治療前，發(fā)熱初期或高峰時(shí)抽血發(fā)熱初期或高峰時(shí)抽血。 a.傷寒傷寒患者應(yīng)在發(fā)熱1-2周內(nèi)抽血 b.化膿性腦膜炎、鼠疫或野兔熱化膿性腦膜炎、鼠疫或野兔熱患者應(yīng)在發(fā)熱1-2d內(nèi)抽血 c.急性敗血癥急性敗血癥應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)抽血3次或更多次，并可在不同部位，如左、右手臂或頸部 采血時(shí)間及次數(shù)d.不明原因發(fā)熱應(yīng)不定期多次、多部位采樣送檢。24小時(shí)內(nèi)不超過(guò)3次，如培養(yǎng)陰性應(yīng)繼續(xù)采樣送檢 e.急性心內(nèi)膜

8、炎應(yīng)在治療前1-2小時(shí)內(nèi)分別在3個(gè)不同部位抽血，分別進(jìn)行培養(yǎng)。f.亞急性心內(nèi)膜炎及布魯菌感染的患者，除在發(fā)熱采血外，并要多次抽血（24h內(nèi)3-4次）和增加抽血量（可增至10ml）。 血標(biāo)本n2.抽血部位及抽血量 以無(wú)菌方法從患者肘靜脈采血。采血量以培養(yǎng)基的1/51/10為宜，成人一次采血5-10ml，兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml。血液抽出后，立即以無(wú)菌手續(xù)注入血培養(yǎng)瓶，充分混合后送檢。骨髓標(biāo)本的微生物學(xué)檢查 n采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標(biāo)本。 n采集時(shí)間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期 當(dāng)骨髓炎時(shí)或長(zhǎng)期使用抗菌藥物患者，當(dāng)骨髓炎時(shí)或長(zhǎng)期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng)抽取

9、骨髓培養(yǎng)陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng) 全自動(dòng)血培養(yǎng)儀BacT/Alert 120 培養(yǎng)基的選擇： 普通需氧培養(yǎng)瓶：采血量4ml,用于未使用抗菌素患者的需氧培養(yǎng)。主要用于小兒。 建 議n不管患者是否使用過(guò)抗生素，是做細(xì)菌培養(yǎng)還是真菌培養(yǎng)n成人 采血量5ml n小兒 采血量4ml注意事項(xiàng) 嚴(yán)格做好患者抽血部位的無(wú)菌操作。嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果（要在對(duì)側(cè)采集）。注入標(biāo)本后的血培養(yǎng)瓶務(wù)必立即送至臨床細(xì)菌室，如因某種原因不能立即送檢時(shí)，應(yīng)將已接種樣本的培養(yǎng)瓶放在室溫，切勿放冰箱存放。 注意事項(xiàng)每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過(guò)多，以防過(guò)期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保存（15-30），切勿放冰箱保存。

10、二、尿液標(biāo)本的采集 留取尿液標(biāo)本作物理、化學(xué)、細(xì)菌和顯微鏡等檢查以助診斷和觀察療效。 尿液標(biāo)本n采集時(shí)間： 一般原則 通常應(yīng)采集晨起第一次尿液送檢。原則上應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用之前采集尿液。尿液標(biāo)本的采集時(shí)間A.結(jié)核分枝桿菌感染 留取晨尿或24小時(shí)尿的沉渣部分10-15ml作涂片檢查，若為培養(yǎng)，患者應(yīng)停藥1-2天后再采樣，以提高陽(yáng)性率 B.沙門(mén)菌、鉤端螺旋體感染 感染后2周左右采集 采集方法 n中段尿采集方法 （最常用）n集尿法 結(jié)核分枝桿菌檢查時(shí)，可用一清潔容器，留24小時(shí)尿取其沉渣10-15ml送檢 n導(dǎo)尿法、腎盂尿采集法、膀胱穿刺采集法 中段尿采集方法 a.女性：成年女性外陰部先以肥皂水清

11、洗，再以無(wú)菌水沖洗，然后排尿棄去前段尿，留取中段尿10ml左右于無(wú)菌試管內(nèi)送檢 b.男性：先用肥皂水清洗尿道口，后用清水沖洗，留取中段尿 c.兒童、嬰兒：先以無(wú)菌生理鹽水清洗外陰部或外生殖器，將無(wú)菌試管對(duì)準(zhǔn)尿道口，待尿排出后送檢 注意事項(xiàng) v嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，因?yàn)槟蛞簶?biāo)本的采集和培養(yǎng)中最大的問(wèn)題是污染雜菌 v通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢 v多數(shù)藥物均通過(guò)尿液排泄，因此采集尿液應(yīng)在用藥前進(jìn)行 三、糞便標(biāo)本的采集 收集糞便標(biāo)本，做實(shí)驗(yàn)室檢查，有助于評(píng)估病人排泄功能及準(zhǔn)確評(píng)估疾病。糞便標(biāo)本n采集時(shí)間： n1采樣原則 腹瀉病人應(yīng)在急性期采集（3天以內(nèi)），以提高檢出率，亦最好在用藥之前。n2沙門(mén)菌感染 腸

12、熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便 采集方法 n自然排便采集法 自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保存液中送檢 n直腸拭子方法 如不易獲得糞便時(shí)，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無(wú)菌棉拭子用生理鹽水濕潤(rùn)后，插入肛門(mén)內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)取出，插入無(wú)菌試管內(nèi)送檢。注意事項(xiàng) 雖糞便含有多種雜菌，但應(yīng)盡量采用無(wú)菌容器（一次性無(wú)菌平皿）。 為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、 粘液部分。 四、痰及上呼吸道標(biāo)本的采集 采集痰標(biāo)本作細(xì)菌培養(yǎng)，或涂片后經(jīng)特殊染色以檢查細(xì)菌、真菌或抗酸桿菌等，以

13、助診斷；從咽部及扁桃體采取分泌物作細(xì)菌培養(yǎng)或病毒分離痰及上呼吸道標(biāo)本 n采集時(shí)間: 痰：一般以晨痰為好；支氣管擴(kuò)張癥患者，清晨起床后進(jìn)行體位引流，可采集大量痰標(biāo)本。咽拭標(biāo)本：時(shí)間上雖無(wú)嚴(yán)格限制，但應(yīng)于抗菌藥物治療前為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜 采集方法： n痰液標(biāo)本： 自然咳痰法：患者清晨起床后，先用朵貝爾氏液（復(fù)方硼砂溶液）漱口，再以開(kāi)水或生理鹽水漱口，以減少口腔常居菌群的污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無(wú)菌痰懷內(nèi)送檢 采集方法：n小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時(shí)，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢 采集方法： n上呼吸

14、道標(biāo)本（咽拭子） 采集上呼吸道標(biāo)本通常采用無(wú)菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開(kāi)水或生理鹽水反復(fù)漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子通過(guò)舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹數(shù)次，但拭子要避免接觸口腔和舌粘膜 注意事項(xiàng)： n1 采集標(biāo)本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。n2 做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標(biāo)本若不能及時(shí)送檢，應(yīng)放4冰箱保存，以免雜菌生長(zhǎng)。（血培養(yǎng)瓶室溫）n3 作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時(shí)痰液，以提高陽(yáng)性檢出率。穿刺液標(biāo)本 n腦脊液 采集時(shí)間： 懷疑為腦膜炎的病人，應(yīng)立即采集腦脊液，最好在用藥前采集 采集方法：用腰穿方法采集腦脊液3-5m

15、l，一般放入3個(gè)無(wú)菌試管，每個(gè)試管1-2ml.如果用于檢測(cè)細(xì)菌或病毒，應(yīng)1ml，如果用于檢測(cè)真菌或抗酸桿菌，應(yīng)2ml 注意事項(xiàng)： n如果用于檢測(cè)細(xì)菌，收集腦脊液后，最好能在常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿。腦脊液標(biāo)本不可置冰箱保存，否則會(huì)使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌（能產(chǎn)生自溶素迅速自溶）、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌 。注意事項(xiàng)：n如果只采集了一管腦脊液，應(yīng)先送細(xì)菌室做細(xì)菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢查n腰穿時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌操作 n不需要加入防腐劑 n作腦脊液培養(yǎng)時(shí)，建議同時(shí)作血培養(yǎng) 穿刺液標(biāo)本n其他穿刺液（胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等） n采集時(shí)間：當(dāng)懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，一般在患者

16、使用抗菌藥物之前或停止用藥后1-2日采集 n采集方法：采用無(wú)菌方法用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位的液體，注入無(wú)菌試管立即送檢 注意事項(xiàng)： n一般要求常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿，尤其是腦脊液和心包液；除了做結(jié)核桿菌、真菌培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)在4下保存外，做其他項(xiàng)目的應(yīng)常溫保存。n 嚴(yán)格無(wú)菌穿刺。注意事項(xiàng)：n為了防止穿刺液的凝固，最好在無(wú)菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液 n盡可能采集更多的液體，至少1ml膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本 n采集方法： n開(kāi)放性膿腫和膿性分泌物 先以無(wú)菌鹽水沖洗潰瘍表面，用2支無(wú)菌棉拭子拭取潰瘍深處的分泌物后插入無(wú)菌試管送檢。一支為涂片檢查用，另一支作培養(yǎng)用 采集方法：

17、n大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物 用無(wú)菌棉拭子取多部位創(chuàng)面的膿液或分泌物，置無(wú)菌試管內(nèi)送檢 n封閉性膿腫 消毒局部皮膚或粘膜表面后，用注射器抽取，將膿液注入無(wú)菌試管內(nèi)送檢 注意事項(xiàng)： n由于燒傷的早期創(chuàng)面是無(wú)菌的，通過(guò)12小時(shí)才可出現(xiàn)大量細(xì)菌，因此在燒傷后12小時(shí)內(nèi)，勿采集創(chuàng)面的標(biāo)本，否則不能獲得陽(yáng)性結(jié)果 n不能立即送檢的標(biāo)本，應(yīng)放4保存；培養(yǎng)淋球菌、腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本除外 n用藥前采集標(biāo)本，嚴(yán)格無(wú)菌采樣 細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本采集注意事項(xiàng)： 采集標(biāo)本最好能在用藥前采樣，以提高陽(yáng)性率 采集標(biāo)本時(shí)必須注意無(wú)菌操作，使用密閉的無(wú)菌容器，避免污染雜菌 采集標(biāo)本后應(yīng)盡快送檢，否則病原菌會(huì)死亡而影響細(xì)菌檢查的正確性 采集的標(biāo)本中不得加防腐劑或消毒劑 報(bào)告時(shí)間n涂片找