土壤中有效磷的測定

1、土壤中有效磷的測定 徐磊徐磊0208107802081078一、概述一、概述土壤中的磷大部分不能被植物直接吸收利用，易土壤中的磷大部分不能被植物直接吸收利用，易被吸收利用的有效磷通常含量很低。土壤中的有被吸收利用的有效磷通常含量很低。土壤中的有效磷是指能為當季作物吸收的磷量。效磷是指能為當季作物吸收的磷量。土壤中有效磷的測定方法有：生物方法、同位素土壤中有效磷的測定方法有：生物方法、同位素方法、陰離子交換樹脂方法及化學方法等。其中方法、陰離子交換樹脂方法及化學方法等。其中應用最普遍的是應用最普遍的是化學方法化學方法。它是用浸取劑提取土。它是用浸取劑提取土壤中的一部分有效磷。浸取劑種類很多，它的

2、選壤中的一部分有效磷。浸取劑種類很多，它的選擇主要根據(jù)各種土壤的性質(zhì)而定。酸性土壤中磷擇主要根據(jù)各種土壤的性質(zhì)而定。酸性土壤中磷酸鐵和磷酸鋁形態(tài)的有效磷可用酸性氟化銨提取，酸鐵和磷酸鋁形態(tài)的有效磷可用酸性氟化銨提取，形成氟鋁化銨和氟鐵化銨配合物，少量的鈣離子形成氟鋁化銨和氟鐵化銨配合物，少量的鈣離子形成氟化鈣沉淀，磷酸根離子被提取到溶液中來，形成氟化鈣沉淀，磷酸根離子被提取到溶液中來，石灰性土壤則采用碳酸氫鈉溶液浸取。石灰性土壤則采用碳酸氫鈉溶液浸取。實驗目的實驗目的實驗原理實驗原理 主要儀器和試劑主要儀器和試劑實驗步驟實驗步驟 注意事項注意事項 一、實驗目的 1、了解光度法測定土壤中有、了解

3、光度法測定土壤中有效磷的原理及方法效磷的原理及方法 2、熟悉分光光度計的使用、熟悉分光光度計的使用二、實驗原理 在含磷的溶液中，加入鉬酸銨，在一定酸度條在含磷的溶液中，加入鉬酸銨，在一定酸度條件下，溶液中的磷酸與鉬酸絡合形成黃色的磷鉬件下，溶液中的磷酸與鉬酸絡合形成黃色的磷鉬雜合酸雜合酸磷鉬黃。磷鉬黃。H3PO4+12H2MoO4=H3PMo12O40+12H2O在適宜的試劑濃度下，加入適當?shù)倪€原劑（在適宜的試劑濃度下，加入適當?shù)倪€原劑（SnCl2或抗壞血酸），使磷鉬酸中的一部分或抗壞血酸），使磷鉬酸中的一部分Mo（）還）還原為原為Mo（生成磷鉬藍（磷鉬雜多藍）生成磷鉬藍（磷鉬雜多藍）H H3

4、 3POPO4 410MoO10MoO3 3MoMo2 2O5O5或或H H3 3PO48MoOPO48MoO3 32Mo2Mo2 2O O5 5。在。在一定的范圍內(nèi)，藍色的深度與磷含量成正比，這一定的范圍內(nèi)，藍色的深度與磷含量成正比，這是鉬藍比色法的基礎。是鉬藍比色法的基礎。 三、主要儀器和試劑 1、 儀器：儀器：721分光光度計，分光光度計，25mL容量瓶，容量瓶，吸量管，振蕩機，漏斗，濾紙。吸量管，振蕩機，漏斗，濾紙。2、 試劑：試劑：（1） HCl溶液（溶液（0.5mol/L）（2） NH4F溶液（溶液（1mol/L）（ 3 ） 提 取 劑 ： 分 別 移 取提 取 劑 ： 分 別 移

5、 取 1 5 m L 1mol/LNH4F溶液和溶液和25mL 0.5mol/LHCl溶液，溶液，假如假如460mL蒸餾水中，配制成蒸餾水中，配制成0.03mol/L NH4F-0.025mol/L HCl溶液。溶液。（4） H3BO3溶液（溶液（100g/L） （5） 15g/L鉬酸銨鉬酸銨-3.5mol/L鹽酸溶液：溶解鹽酸溶液：溶解15g鉬酸銨于鉬酸銨于300mL蒸餾水中，加熱至蒸餾水中，加熱至60左右，如左右，如有沉淀，將溶液過濾，待溶液冷卻之后，慢慢加有沉淀，將溶液過濾，待溶液冷卻之后，慢慢加入入350mL 10mol/L HCl溶液，并用玻璃棒迅速攪動，溶液，并用玻璃棒迅速攪動，待

6、溶液冷卻至室溫，用蒸餾水稀釋至待溶液冷卻至室溫，用蒸餾水稀釋至1L，充分搖，充分搖勻，儲存于棕色瓶中。放置時間不得超過兩個月。勻，儲存于棕色瓶中。放置時間不得超過兩個月。 （6）氯化亞錫溶液（）氯化亞錫溶液（25g/L）：稱取氯化亞錫）：稱取氯化亞錫2.5 g溶于溶于10mL濃鹽酸中，溶解后加入濃鹽酸中，溶解后加入90mL蒸餾水，蒸餾水，混合均勻置于棕色瓶中，此溶液現(xiàn)配現(xiàn)用?；旌暇鶆蛑糜谧厣恐校巳芤含F(xiàn)配現(xiàn)用。 （7 7）磷標準溶液（）磷標準溶液（50g/ /mL）：準確稱?。簻蚀_稱取105烘干的烘干的KH2PO4（A.R）0.2195g，溶解于，溶解于400mL水中加濃水中加濃H2SO4

7、5mL(防止溶液長霉菌防止溶液長霉菌)，轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)入入1L容量瓶中，加水稀釋至刻度，要勻。準確移容量瓶中，加水稀釋至刻度，要勻。準確移取上述磷標準溶液取上述磷標準溶液25.00mL于于250mL容量瓶中，稀容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即為釋至刻度，搖勻，即為5g/m L-1（此溶液不宜（此溶液不宜久存）。久存）。 四、實驗步驟1、土壤樣品預處理、土壤樣品預處理 稱取風干土壤樣品稱取風干土壤樣品1g（精確至（精確至0.01g）,放入放入50100mL小塑料瓶（或小塑料瓶（或50mL帶塞比色管）中，帶塞比色管）中，加入加入0.03molL-1NH4F-0.25molL-1HCl溶液溶液20mL，稍搖勻

8、，立即放在振蕩機上，振蕩，稍搖勻，立即放在振蕩機上，振蕩30分鐘。用無磷干濾紙過濾，濾紙承接于盛有分鐘。用無磷干濾紙過濾，濾紙承接于盛有100gL-1H3BO3溶液溶液15滴的滴的50mL 三角瓶中，三角瓶中，搖動瓶內(nèi)溶液（加搖動瓶內(nèi)溶液（加H3BO3防止防止F-1對顯色的干擾對顯色的干擾和腐蝕玻璃儀器）。和腐蝕玻璃儀器）。 2、土壤中有效磷的測定、土壤中有效磷的測定 準確移取上述土壤濾液準確移取上述土壤濾液510mL容量容量瓶中，用吸量管加入瓶中，用吸量管加入15gL-1鉬酸銨鉬酸銨-鹽鹽酸溶液酸溶液5mL，搖勻，加入蒸餾水至瓶頸，搖勻，加入蒸餾水至瓶頸刻度，滴加刻度，滴加25gL-1.氯化

9、亞錫氯化亞錫3滴后，再滴后，再用水稀釋至刻度，充分搖勻。顯色用水稀釋至刻度，充分搖勻。顯色15min后，再分光光度計上，以試劑為空白，后，再分光光度計上，以試劑為空白，用用1cm比色皿在比色皿在680nm處測其吸光度值。處測其吸光度值。 3工作曲線的制作工作曲線的制作 分別準確移取分別準確移取5 gmL-1磷標準溶液磷標準溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL于于6個個25mL容量瓶中，容量瓶中，加入加入0.03molLL-1-1NHNH4 4F-0.025molLF-0.025molL-1-1HClHCl溶液溶液5-10 mL5-10 mL（按所取濾液毫升數(shù)而定），用吸量（按所取

10、濾液毫升數(shù)而定），用吸量管加鉬酸銨管加鉬酸銨- -鹽酸溶液鹽酸溶液5mL5mL，加蒸餾水至瓶頸刻，加蒸餾水至瓶頸刻度，并滴加度，并滴加25gL25gL-1-1氯化亞錫氯化亞錫3 3滴，搖動后，滴，搖動后，至溶液有深藍色出現(xiàn)，用水稀釋至刻度，搖勻，至溶液有深藍色出現(xiàn)，用水稀釋至刻度，搖勻，放置放置1515分鐘，與土樣溶液同時顯色，測其吸光分鐘，與土樣溶液同時顯色，測其吸光度。度。 以磷的微克數(shù)為橫坐標，相應的吸光度為以磷的微克數(shù)為橫坐標，相應的吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，并從標準曲線上查出縱坐標，繪制標準曲線，并從標準曲線上查出土樣中磷的含土樣中磷的含量。量。五、注意事項 用氯化亞錫作還原劑作還原劑用氯化亞錫作還原劑作還原劑生成磷鉬鹽，溶液的顏色不夠穩(wěn)定，生成磷鉬鹽，溶液的顏色不夠穩(wěn)定，必須嚴格控制比色時間，一般在顯必須嚴格控制比色時間，一般在顯色后的色后的15-2015-20