天然藥物化學(xué)

1、第七章第七章 糖類糖類糖的理化性質(zhì)糖的理化性質(zhì)2糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定4糖的分類糖的分類3 1糖的提取分離3 3糖的提取分離三、糖的提取分離三、糖的提取分離1溶于冷水和溫乙溶于冷水和溫乙醇醇用醇溫浸，用醇溫浸，鉛鹽沉淀，除去鉛鹽沉淀，除去其他物質(zhì)后結(jié)晶其他物質(zhì)后結(jié)晶溶于溫水，難溶溶于溫水，難溶于冷水，不溶于于冷水，不溶于乙醇乙醇溫水浸，溫水浸，鉛鹽沉淀蛋白質(zhì)鉛鹽沉淀蛋白質(zhì)后脫鉛，乙醇沉后脫鉛，乙醇沉淀淀溶于冷水不溶于溶于冷水不溶于乙醇乙醇水提，水提，鉛鹽沉淀，脫鉛鉛鹽沉淀，脫鉛后乙醇沉淀后乙醇沉淀難溶于水，可溶難溶于水，可溶于稀堿于稀堿用稀用稀NaOH提取，加提取，加醇沉淀析出醇沉淀析出1.

2、 糖的提取糖的提取234三、糖的提取分離三、糖的提取分離Sevag 法法酶解法酶解法三氟三氯乙烷法三氟三氯乙烷法三氯三氯醋酸法醋酸法脫除蛋白脫除蛋白質(zhì)的方法質(zhì)的方法三、糖的提取分離三、糖的提取分離化學(xué)沉淀法化學(xué)沉淀法離子交換法離子交換法鉛鹽和鉛鹽和活性炭法活性炭法雜質(zhì)的去除雜質(zhì)的去除主要有主要有3種種2. 糖的分離糖的分離三、糖的提取分離三、糖的提取分離糖的糖的分離分離方法方法鈣、鍶及鋇鈣、鍶及鋇復(fù)鹽形式法復(fù)鹽形式法鉛鹽沉淀法鉛鹽沉淀法分級(jí)沉淀或分級(jí)沉淀或 分級(jí)溶解法分級(jí)溶解法活性炭柱色譜活性炭柱色譜纖維素柱色譜纖維素柱色譜淀粉柱色譜淀粉柱色譜離子交換法離子交換法季銨鹽沉淀法季銨鹽沉淀法 凝膠

3、柱色譜凝膠柱色譜制備型區(qū)域電泳制備型區(qū)域電泳第七章第七章 糖類糖類糖的理化性質(zhì)糖的理化性質(zhì)2糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定4糖的分類糖的分類3 1糖的提取分離糖的提取分離3 3糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定 多糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定與常見天然產(chǎn)物有許多不同之多糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定與常見天然產(chǎn)物有許多不同之處，本節(jié)不做詳細(xì)介紹。天然產(chǎn)物中的苷類成分多處，本節(jié)不做詳細(xì)介紹。天然產(chǎn)物中的苷類成分多為固體化合物。其結(jié)構(gòu)鑒定應(yīng)通過以下各項(xiàng)程序進(jìn)為固體化合物。其結(jié)構(gòu)鑒定應(yīng)通過以下各項(xiàng)程序進(jìn)行：行： 四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定12345純度的測(cè)定純度的測(cè)定分子量的測(cè)定分子量的測(cè)定單糖種類的鑒定單糖種類的鑒定連接

4、位置的鑒定連接位置的鑒定苷鍵構(gòu)型的鑒定苷鍵構(gòu)型的鑒定基基本本步步驟驟四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定( (一一) ) 純度的測(cè)定純度的測(cè)定 超離心法，高壓電泳法，凝膠柱色譜法，旋超離心法，高壓電泳法，凝膠柱色譜法，旋光測(cè)定法光測(cè)定法四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定( (二二) ) 分子量的測(cè)定分子量的測(cè)定 近年來廣泛應(yīng)用質(zhì)譜分析的方法測(cè)定分子量和近年來廣泛應(yīng)用質(zhì)譜分析的方法測(cè)定分子量和分子式。苷類化合物一般極性較大，無揮發(fā)性，遇分子式。苷類化合物一般極性較大，無揮發(fā)性，遇熱氣化時(shí)易于分解，采用電子轟擊質(zhì)譜熱氣化時(shí)易于分解，采用電子轟擊質(zhì)譜( (EI- -MS) )常常常不能獲得分子離子峰。常不

5、能獲得分子離子峰。 四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定 現(xiàn)多采用化學(xué)電離質(zhì)譜現(xiàn)多采用化學(xué)電離質(zhì)譜( (CI- -MS) )、場(chǎng)解吸質(zhì)、場(chǎng)解吸質(zhì)譜譜( (FD- -MS) )、快原子轟擊質(zhì)譜、快原子轟擊質(zhì)譜( (FAB- -MS) )和電噴和電噴霧質(zhì)譜霧質(zhì)譜( (ESI- -MS) )等方法來獲得分子離子蜂，尤其等方法來獲得分子離子蜂，尤其是是ESI- -MS及及FAB- -MS兩種質(zhì)譜法更是目前測(cè)定苷兩種質(zhì)譜法更是目前測(cè)定苷類分子量常用的方法。類分子量常用的方法。四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定( (三三) ) 單糖的鑒定單糖的鑒定1. 多糖的完全水解多糖的完全水解 常用稀酸水解，注意掌握適合的

6、條件使多聚糖常用稀酸水解，注意掌握適合的條件使多聚糖完全水解，又不使水解下來的單糖變化或重新聚合。完全水解，又不使水解下來的單糖變化或重新聚合。四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定2. 糖的紙色譜（糖的紙色譜（ PC ） 糖類的糖類的PC常用的展開劑大多為含水的溶劑系統(tǒng)，常用的展開劑大多為含水的溶劑系統(tǒng)，其中以正丁醇其中以正丁醇- -醋酸醋酸- -水和用水飽和的苯酚兩種系統(tǒng)水和用水飽和的苯酚兩種系統(tǒng)應(yīng)用得最普遍，如正丁醇應(yīng)用得最普遍，如正丁醇- -醋酸醋酸- -水水( (4:1:5) )，乙酸乙乙酸乙酯酯- -吡啶吡啶- -水水( (2:1:2) )等。等。四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定 糖類的

7、糖類的Rf 值與溶劑的含水量有關(guān)，因此配制值與溶劑的含水量有關(guān)，因此配制展開劑時(shí)必須注意，尤其對(duì)于三元組成的展開劑，展開劑時(shí)必須注意，尤其對(duì)于三元組成的展開劑，其混合比例更應(yīng)力求準(zhǔn)確，并需用標(biāo)準(zhǔn)品同時(shí)點(diǎn)其混合比例更應(yīng)力求準(zhǔn)確，并需用標(biāo)準(zhǔn)品同時(shí)點(diǎn)樣作為對(duì)照。樣作為對(duì)照。四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定展開劑展開劑薄層色譜薄層色譜顯色劑顯色劑吸附劑吸附劑3. 糖的薄層色譜糖的薄層色譜四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定 糖類的糖類的TLC常選用硅膠薄層，由于糖的極性強(qiáng)，常選用硅膠薄層，由于糖的極性強(qiáng)，一般點(diǎn)樣量不能大于一般點(diǎn)樣量不能大于5 ug，但這一缺點(diǎn)在用硼酸溶，但這一缺點(diǎn)在用硼酸溶液或一些無機(jī)鹽

8、的水溶液代替水調(diào)制吸附劑進(jìn)行鋪液或一些無機(jī)鹽的水溶液代替水調(diào)制吸附劑進(jìn)行鋪板時(shí)得到克服，顯著提高了上樣量，并改善分離效板時(shí)得到克服，顯著提高了上樣量，并改善分離效果。果。吸附劑吸附劑四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定 制備這種硅膠薄層板時(shí)，所用的鹽一般是強(qiáng)制備這種硅膠薄層板時(shí)，所用的鹽一般是強(qiáng)堿弱酸堿弱酸( (或中強(qiáng)酸或中強(qiáng)酸) )鹽，如鹽，如0.3mol/L的磷酸氫二鈉的磷酸氫二鈉或磷酸二氫鈉的水溶液?；蛄姿岫溻c的水溶液。 四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定 糖類硅膠薄層色譜常用的展開劑為正丁醇糖類硅膠薄層色譜常用的展開劑為正丁醇- -丙丙酮酮- -水、正丁醇水、正丁醇- -醋酸醋酸- -水或

9、正丁醇水或正丁醇- -吡啶吡啶- -水。水。展開劑展開劑四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定 糖的糖的PC或或TLC所用的顯色劑有些是相同的，所用的顯色劑有些是相同的，其顯色原理主要是利用糖的還原性或由于形成糖醛其顯色原理主要是利用糖的還原性或由于形成糖醛后引起的呈色反應(yīng)。有些顯色劑不僅可以決定糖的后引起的呈色反應(yīng)。有些顯色劑不僅可以決定糖的斑點(diǎn)的位置，尚可區(qū)分其類型。斑點(diǎn)的位置，尚可區(qū)分其類型。顯色劑顯色劑四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定 常用的顯色劑有苯胺常用的顯色劑有苯胺- -鄰苯二甲酸試劑、三苯鄰苯二甲酸試劑、三苯四氮鹽試劑四氮鹽試劑( (TTC試劑試劑) )、間苯二酚、間苯二酚- -鹽酸

10、試劑、雙鹽酸試劑、雙甲酮甲酮- -磷酸試劑等。磷酸試劑等。四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定苯胺苯胺- -鄰苯鄰苯二甲酸二甲酸顯色劑對(duì)不同的糖往往顯不同的顏色顯色劑對(duì)不同的糖往往顯不同的顏色已醛糖已醛糖糖醛酸糖醛酸戊醛糖戊醛糖棕色棕色棕色棕色紅色紅色四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定 有些顯色劑中含有硫酸，因此只能用于有些顯色劑中含有硫酸，因此只能用于TLC。例如茴香醛例如茴香醛- -硫酸試劑、間苯二酚硫酸試劑、間苯二酚- -硫酸試劑、硫酸試劑、- -萘萘酚酚- -硫酸試劑、百里酚硫酸試劑、百里酚- -硫酸試劑、酚硫酸試劑、酚- -硫酸試劑等，硫酸試劑等，噴后一般要在噴后一般要在100左右加熱數(shù)分

11、鐘至斑點(diǎn)顯現(xiàn)。左右加熱數(shù)分鐘至斑點(diǎn)顯現(xiàn)。 以以CMC-Na為粘合劑的硅膠薄層板，在使用含為粘合劑的硅膠薄層板，在使用含濃硫酸的顯色劑時(shí)亦應(yīng)注意加熱的溫度與時(shí)間。濃硫酸的顯色劑時(shí)亦應(yīng)注意加熱的溫度與時(shí)間。顯色劑顯色劑四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定制備成三甲基硅醚等增加揮發(fā)性制備成三甲基硅醚等增加揮發(fā)性 難于揮發(fā)難于揮發(fā)用用NaBH4等還原成多元醇，制成乙酰等還原成多元醇，制成乙?；锘蛉阴；锘锘蛉阴；?形成端基異構(gòu)體形成端基異構(gòu)體4. 糖的氣相色譜及氣質(zhì)聯(lián)用色譜糖的氣相色譜及氣質(zhì)聯(lián)用色譜兩個(gè)不利因素兩個(gè)不利因素四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定5. 糖的離子交換色譜糖的離子交換色譜

12、 應(yīng)用糖的硼酸絡(luò)合物進(jìn)行離子交換應(yīng)用糖的硼酸絡(luò)合物進(jìn)行離子交換四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定( (四四) ) 多糖的部分酸水解多糖的部分酸水解 把大分子裂解成較小的片段，部分酸水解產(chǎn)物把大分子裂解成較小的片段，部分酸水解產(chǎn)物的基本結(jié)構(gòu)具有代表性。的基本結(jié)構(gòu)具有代表性。四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定1,3連接連接1,4連接連接生成脫生成脫氧糖酸氧糖酸生成生成3- -脫脫氧氧- -2- -羥甲羥甲基糖酸基糖酸( (五五) )多糖的堿水解多糖的堿水解速度為速度為后者后者的的10倍倍四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定多糖全甲基化多糖全甲基化90%甲酸全水解甲酸全水解H2SO4或三氟乙酸水解或三氟乙酸水解乙?；铝u基乙?；铝u基氣相色譜分析氣相色譜分析步驟步驟(六六) 多糖的甲基化多糖的甲基化四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定( (七七) )多糖的多糖的Smith降解降解 每開裂一個(gè)每開裂一個(gè)C- -C消耗一分子過碘酸消耗一分子過碘酸。測(cè)定過。測(cè)定過碘酸消耗量，甲酸生成量和剩余糖的比例可推測(cè)碘酸消耗量，甲酸生成量和剩余糖的比例可推測(cè)多糖的結(jié)構(gòu)。多糖的結(jié)構(gòu)。四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定四、糖的結(jié)構(gòu)測(cè)定Smith降解降解OOHOROHOHCH2OHIO4-OCH2OHOHCOHCORKBH4OCH2OHHOH2CH