大量制備單克隆抗體

1、lAGE-SCALE PREPARATIONlAGE-SCALE PREPARATION單克隆抗體的大量制備體內(nèi)誘生法（IN ANIMALS）體外誘生法（IN CELLS）研究進展（RESEARCH PROGRESS）CONTENTSCATALOG取Balb/c雌性經(jīng)產(chǎn)鼠若干只預(yù)處理：腹腔注射0.5ml液態(tài)石蠟或降植烷注射器抽取腹水，得到大量單克隆抗體腹腔內(nèi)接種1ml對數(shù)生長期的雜交瘤細胞懸浮液12周后體內(nèi)誘生法接種10天左右腹水的雜交瘤細胞Advantages可得到大量的腹水單抗獲的抗體濃度高操作簡便、經(jīng)濟腹腔有自然吞噬作用，避免組織污染造成的雜交瘤細胞生長不良腹腔本身為雜交瘤細胞良好培養(yǎng)壞

2、境，使其始終處于對數(shù)生長期Disadvantages腹水中?；煊行∈蟮母鞣N雜蛋白（包括Ig），提純困難有污染動物病毒的危險鼠源性單抗有抗原性，在人體內(nèi)產(chǎn)生人抗鼠抗體，降低治療效果又誘發(fā)變態(tài)反應(yīng)將雜交瘤細胞置于培養(yǎng)瓶進行培養(yǎng)得到單克隆抗體離心去除細胞及其碎片收集培養(yǎng)上清液一段時間體外誘生法Advantages 減少鼠類動物疾病給產(chǎn)物帶來的污染; 避免鼠的其它抗體的存在過程可以工程化和自動控制, 提高了重演性可以采用單元操作法培養(yǎng), 隨著規(guī)模增大, 降低生產(chǎn)成本 Disadvantages得到的單克隆抗體有限，不能超過特定的細胞濃度每天要換培養(yǎng)液，且細胞對剪切力和環(huán)境非常敏感會積累有毒的代謝產(chǎn)物血

3、清培養(yǎng)干擾抗體活性，影響抗體分離，增加成本牛初乳免疫球蛋白IgG單克隆抗體的制備 利用標(biāo)準 IgG蛋白作為免疫原，免疫 6周齡 Balb/c 雌性小鼠，運用淋巴細胞雜交瘤技術(shù)，通過間接 ELISA法篩選，采用有限稀釋法，經(jīng)過 3次克隆篩選，獲得2株穩(wěn)定分泌抗 IgG蛋白的雜交瘤細胞株，單抗細胞注射小鼠腹腔收集腹水；亞類鑒定試劑盒確定單抗細胞亞類；測定收集小鼠腹水的抗體效價?？笴PV-2a單克隆抗體的制備 純化的犬細小病毒(CPV)2a型分離株免疫Balb/c 小鼠,運用淋巴細胞雜交瘤技術(shù)，間接 ELISA方法篩選陽性雜交瘤細胞,采用有限稀釋法對陽性雜交瘤細胞進行3次亞克隆，得到4株穩(wěn)定分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞，單抗細胞注射小鼠腹腔收集腹水；亞類鑒定試劑盒確定單抗細胞亞類；測定收集小鼠腹水的抗體效價。1 隨著分子生物學(xué)的飛躍發(fā)展，人鼠嵌合抗體、人源化抗體、完全人源性單克隆抗體應(yīng)運而生2 嵌合單克隆抗體和由轉(zhuǎn)基因小鼠、噬菌體展示技術(shù)、核糖體展示技術(shù)及共價展示技術(shù)所制備的單克隆抗體取得了激蕩人心的豐碩成果體內(nèi)誘生法1 細胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器有很大的發(fā)展：空纖維固定術(shù)、徽膠囊術(shù)、空氣升液器、生物反應(yīng)大量培養(yǎng)術(shù)、恒化器培養(yǎng)、OPTICELL培養(yǎng)系統(tǒng)2 細胞表達抗體的研究在抗細胞凋亡、促細胞增殖、優(yōu)化