第十三章革蘭氏陽性無芽孢桿菌

1、軍團菌屬（軍團菌屬（LegionellaLegionella）嗜肺軍團菌嗜肺軍團菌（L.pneumophilaL.pneumophila）o 1976年，美國退伍軍人在費城召開軍團軍團會議時突然爆發(fā)原因不明的肺炎，次年在死者體內(nèi)分離出該菌，1979年建立軍團菌屬。o 嗜肺軍團菌是該屬中致病性最強的。一、生物學特性一、生物學特性o 不同生長階段形態(tài)不同，對數(shù)生長期長絲狀成團，隨時間延長變成短絲、桿狀、球狀；o 無芽孢、無莢膜、端生鞭毛o 營養(yǎng)要求苛刻，需L半胱氨酸、甲硫氨酸和鐵鹽半胱氨酸、甲硫氨酸和鐵鹽；活性炭酵母浸液（BCYE）o 需氧、CO2、生長緩慢o 圓形、灰色、邊緣整齊的菌落o 革蘭氏

2、染色陰性，鍍銀染色呈黑色o抗原性抗原性n 具有O抗原和H抗原，15個血清型，1和6型最常見o抵抗力抵抗力n 對化學消毒劑、干燥、紫外線等較敏感二、致病性二、致病性o 廣泛存在于天然水環(huán)境和土壤中，以及冷、熱水管道系統(tǒng)內(nèi)o毒力因子毒力因子n 多種酶類如磷脂酶、氨基肽酶、內(nèi)切酶；細胞毒素、溶血素、T4SS等n 細胞內(nèi)寄生（單核細胞和巨噬細胞內(nèi)增殖）n 復制生境（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡），由繁殖型變?yōu)槌墒煨退录膊∷录膊?軍團菌病軍團菌病o 經(jīng)呼吸道吸入帶菌飛沫、原蟲等媒介傳播，人與人之間不傳播o 只感染人，癥狀有：n 流感樣癥狀（輕癥型）n 肺炎（重癥型）彎曲菌屬（彎曲菌屬（C Campylobactera

3、mpylobacter）o 胎兒弧菌，自牛腸道中發(fā)現(xiàn)o 16個種，對人類致病的主要是空腸彎曲菌和胎空腸彎曲菌和胎兒彎曲菌胎兒亞種兒彎曲菌胎兒亞種，前者是人類腹瀉腹瀉最常見的病原菌之一，后者在免疫功能低下時可引起敗敗血癥、腦膜炎等血癥、腦膜炎等o 空腸彎曲菌一、一、生物學性狀生物學性狀1. 形態(tài)與染色形態(tài)與染色 菌體輕度彎曲似逗點狀、海鷗狀，長1.55 m，寬0.20.8 m。菌體一端或兩端有鞭毛，運動活潑，在暗視野鏡下觀察似飛蠅。有莢膜，不形成芽胞。革蘭氏陰性。2.2.培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 為微需氧菌為微需氧菌，在含2.55%O2和10%CO2的環(huán)境中生長最好。最適溫度為3742。在正常大氣或無氧

4、環(huán)境中均不能生長 本菌營養(yǎng)要求高營養(yǎng)要求高，需加入血液、血清才能生長需加入血液、血清才能生長 兩種菌落，一種蔓延生長、邊緣不整齊；一種小菌落，圓形、隆起、半透明3. 生化反應(yīng)生化反應(yīng) 空腸彎曲生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類，不分解尿素，不液化明膠，靛基質(zhì)陰性； 可還原硝酸鹽，氧化酶和過氧化氫酶為陽性； 甲基紅和VP試驗陰性； 枸椽酸鹽培養(yǎng)基中不生長。 4.4.抗原性抗原性 本菌抗原構(gòu)造與腸道桿菌一樣具有具有O O、H H和和K K抗抗原原。 根據(jù)O抗原，可把空腸彎曲菌分成60個血清型。 5.5.致病性致病性在環(huán)境及健康動物體內(nèi)廣泛存在；污染食物和飲水，可引起人類急性腸炎和食物中毒；綿羊等動物流產(chǎn)；

5、其致病因素與腸毒素、內(nèi)毒素、細胞毒素、侵襲力有關(guān)。6.6.微生物學診斷微生物學診斷（一）標本采集： 取腹瀉病人新鮮糞便或肛拭子、流產(chǎn)胎兒、胎衣、陰新鮮糞便或肛拭子、流產(chǎn)胎兒、胎衣、陰道分泌物等道分泌物等立即送檢。如不能及時送檢，應(yīng)將標本接種于卡布運送培養(yǎng)基。（二）檢驗程序：第第1313章章 革蘭氏陽性無芽孢桿菌革蘭氏陽性無芽孢桿菌主要包括李氏桿菌屬、主要包括李氏桿菌屬、丹毒絲菌屬丹毒絲菌屬及腎桿菌屬。及腎桿菌屬。均為形態(tài)規(guī)則、不產(chǎn)生芽孢、需氧、兼性厭氧的均為形態(tài)規(guī)則、不產(chǎn)生芽孢、需氧、兼性厭氧的革蘭氏陽性桿菌，非抗酸性。革蘭氏陽性桿菌，非抗酸性。李氏桿菌屬李氏桿菌屬 7個種，代表種是個種，代表

6、種是產(chǎn)單核細胞李氏桿產(chǎn)單核細胞李氏桿菌菌（L. monocytogenes)，引致人和動物的，引致人和動物的李氏桿菌病。李氏桿菌病。一、形態(tài)及染色特性一、形態(tài)及染色特性o 短桿菌，兩端鈍圓，多單在，短桿菌，兩端鈍圓，多單在，有時呈有時呈“V”形形o G+，無芽孢、莢膜，有周鞭毛（，無芽孢、莢膜，有周鞭毛（4根，根，20-25），老），老齡培養(yǎng)物或粗糙型菌落呈長絲狀齡培養(yǎng)物或粗糙型菌落呈長絲狀二、培養(yǎng)特性二、培養(yǎng)特性o 需氧或兼性厭氧菌，需氧或兼性厭氧菌，1-45均可生長，均可生長，30-37 最適，最適，4可緩慢增殖（冰箱菌）可緩慢增殖（冰箱菌）；o 營養(yǎng)要求不高，加入血清、全血、營養(yǎng)要求不高

7、，加入血清、全血、0.2-1%葡萄葡萄糖或糖或2-3%的甘油生長更佳；的甘油生長更佳；o 血液瓊脂培養(yǎng)基上可見其周圍狹窄的血液瓊脂培養(yǎng)基上可見其周圍狹窄的溶血環(huán)溶血環(huán)；o 半固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng)，沿穿刺線呈云霧狀或半固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng)，沿穿刺線呈云霧狀或倒立樹木倒立樹木狀生長。狀生長。三、生化特性三、生化特性1. 可分解多種糖可分解多種糖2. 觸酶：觸酶：（具有過氧化氫酶的細菌具有過氧化氫酶的細菌,能催化過氧化氫生成水和新生態(tài)氧能催化過氧化氫生成水和新生態(tài)氧,繼而形成繼而形成分子氧出現(xiàn)氣泡分子氧出現(xiàn)氣泡）3. H2S： 4. 尿素酶：尿素酶： 5. 不還原硝酸鹽不還原硝酸鹽四、抵抗力四、抵抗

8、力1. 在土壤、牛奶、青貯飼料和糞便中能長期存活；在土壤、牛奶、青貯飼料和糞便中能長期存活；2. 在在60-70 5-10min可被殺死菌；可被殺死菌；3. 對消毒劑的抵抗力不強：對消毒劑的抵抗力不強：2.5%石炭酸、石炭酸、70%乙醇、乙醇、2.5%氫氧化鈉、氫氧化鈉、2.5%福爾馬林均可有效殺滅。福爾馬林均可有效殺滅。五、抗原性五、抗原性 具有具有O抗原（阿拉伯數(shù)字表示）及抗原（阿拉伯數(shù)字表示）及H抗原抗原 （?。ㄐ懹⑽淖帜副硎荆懹⑽淖帜副硎荆? 常見常見1/2a、4b型。與多種細菌型。與多種細菌存在共同抗原，故血清學診斷意義不大存在共同抗原，故血清學診斷意義不大。 六、致病性六、致病

9、性1. 本菌可細胞內(nèi)寄生；本菌可細胞內(nèi)寄生；2. 可自然感染多種家畜：豬、馬、牛、綿羊；可自然感染多種家畜：豬、馬、牛、綿羊； 3. 病畜表現(xiàn)神經(jīng)癥狀病畜表現(xiàn)神經(jīng)癥狀“轉(zhuǎn)圈病轉(zhuǎn)圈病”、妊畜流產(chǎn)、血液、妊畜流產(chǎn)、血液中單核細胞增多；中單核細胞增多；4. 孕婦流產(chǎn)，成人腦膜炎，新生兒腦膜炎孕婦流產(chǎn)，成人腦膜炎，新生兒腦膜炎(10%)。o毒力因子毒力因子n 內(nèi)化素：含有亮氨酸的蛋白質(zhì)，與宿主細胞表內(nèi)化素：含有亮氨酸的蛋白質(zhì)，與宿主細胞表面的糖蛋白作用，使細菌進入細胞面的糖蛋白作用，使細菌進入細胞n 李氏桿菌溶血素（李氏桿菌溶血素（LLO）：促使細菌在細胞內(nèi)）：促使細菌在細胞內(nèi)的擴散的擴散七、微生物學

10、診斷七、微生物學診斷病原學檢查病原學檢查o 接種血液葡萄糖瓊脂，露滴狀菌落，接種血液葡萄糖瓊脂，露滴狀菌落，溶血溶血；o 肝、脾、腦組織等涂片、革蘭氏染色鏡檢可見肝、脾、腦組織等涂片、革蘭氏染色鏡檢可見G呈呈字排列字排列的小桿菌；的小桿菌； o 病料眼內(nèi)接種家兔或豚鼠，病料眼內(nèi)接種家兔或豚鼠，1d后發(fā)生結(jié)膜炎，不后發(fā)生結(jié)膜炎，不久敗血癥死亡；妊娠久敗血癥死亡；妊娠2w的動物被接種后可發(fā)生流的動物被接種后可發(fā)生流產(chǎn)。產(chǎn)。八、免疫與治療八、免疫與治療o 滅活強毒菌株接種小鼠產(chǎn)生數(shù)月免疫力；無毒滅活強毒菌株接種小鼠產(chǎn)生數(shù)月免疫力；無毒力活菌接種產(chǎn)生惡免疫力不強。力活菌接種產(chǎn)生惡免疫力不強。o 控制污

11、染，避免用污染的青儲飼料飼喂動物。控制污染，避免用污染的青儲飼料飼喂動物。丹毒絲菌屬丹毒絲菌屬o 有有3個種個種o 豬丹毒絲菌豬丹毒絲菌（E. rhusiopathiae）是本屬唯是本屬唯一一種致病性的細菌。一一種致病性的細菌。o 它是豬丹毒病的病原體，通稱豬丹毒桿它是豬丹毒病的病原體，通稱豬丹毒桿菌。菌。一、形態(tài)與染色特征一、形態(tài)與染色特征o 本菌本菌為直或稍彎曲的細桿菌，兩端鈍圓，為直或稍彎曲的細桿菌，兩端鈍圓，單在或呈單在或呈V形、形、堆狀或短鏈排列，易形成長絲狀；堆狀或短鏈排列，易形成長絲狀；o G+，但老齡培養(yǎng)物中菌體著色能力較差，呈陰性，但老齡培養(yǎng)物中菌體著色能力較差，呈陰性二、培

12、養(yǎng)特性二、培養(yǎng)特性o 本菌為微需氧菌，本菌為微需氧菌，實驗室培養(yǎng)是兼性厭氧；實驗室培養(yǎng)是兼性厭氧；o pH在在6.7-9.2范圍內(nèi)均可生長，最適范圍內(nèi)均可生長，最適pH為為7.2-7.6，生長溫度，生長溫度為為5-42，最適溫度為，最適溫度為30-37 ；o 在普通瓊脂培養(yǎng)基和普通肉湯中生長不良，如加入在普通瓊脂培養(yǎng)基和普通肉湯中生長不良，如加入0.2-0.5% (W/V)葡萄糖或葡萄糖或5%-10%血液、血清則生長茂盛；血液、血清則生長茂盛；o 在麥康凱培養(yǎng)基不生長；在麥康凱培養(yǎng)基不生長；o 在肉湯中呈輕度渾濁，有少量白色粘稠沉淀。不形成菌膜在肉湯中呈輕度渾濁，有少量白色粘稠沉淀。不形成菌膜

13、和菌環(huán)。和菌環(huán)。o 在在血瓊脂平板上血瓊脂平板上經(jīng)經(jīng)3724h培養(yǎng)可形成培養(yǎng)可形成濕潤、光滑、透明、濕潤、光滑、透明、灰白色、露珠樣的圓形小菌落，并形成灰白色、露珠樣的圓形小菌落，并形成溶血環(huán)；有光滑溶血環(huán)；有光滑型和粗糙型菌落；型和粗糙型菌落；o在麥康凱培養(yǎng)基不生長；在麥康凱培養(yǎng)基不生長；o在肉湯中呈輕度渾濁，有少量白色粘稠沉淀。不形成菌膜和菌環(huán)。在肉湯中呈輕度渾濁，有少量白色粘稠沉淀。不形成菌膜和菌環(huán)。o 發(fā)酵試驗產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；發(fā)酵試驗產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；甲基紅及甲基紅及VP試驗陰性。試驗陰性。o 明膠穿刺生長特殊，沿穿刺線橫向四周生長，明膠穿刺生長特殊，沿穿刺線橫向四周生長，如如試管刷狀試管刷狀，

14、但明膠不液化。，但明膠不液化。三、生化特性三、生化特性四、抵抗力四、抵抗力o 本菌對腐敗和干燥環(huán)境有較強的抵抗力本菌對腐敗和干燥環(huán)境有較強的抵抗力o 對常用消毒劑抵抗力不強：對常用消毒劑抵抗力不強： 甲醛、生石灰乳、過氧乙酸。本菌可耐甲醛、生石灰乳、過氧乙酸。本菌可耐0.2%苯酚。苯酚。o 對青霉素很敏感。對青霉素很敏感。五、致病性五、致病性o 分布廣泛，可寄生于哺乳動物、禽類和魚類等，以分布廣泛，可寄生于哺乳動物、禽類和魚類等，以豬分離率最高。豬分離率最高。o 本菌通過本菌通過消化道感染消化道感染，進入血液（菌血癥），而后，進入血液（菌血癥），而后定殖在局部或引致全身的感染。定殖在局部或引致

15、全身的感染。o 急性期，死亡率高；慢性豬皮膚出現(xiàn)紅疹斑塊，因急性期，死亡率高；慢性豬皮膚出現(xiàn)紅疹斑塊，因此名為此名為“丹毒丹毒”。 亞急性病例, 皮膚疹塊o 人也可經(jīng)外傷感染，發(fā)生皮膚病變。注意區(qū)分人也可經(jīng)外傷感染，發(fā)生皮膚病變。注意區(qū)分“人丹毒人丹毒”，由化膿鏈球菌所致。，由化膿鏈球菌所致。o毒力因子毒力因子n 未發(fā)現(xiàn)外毒素，細菌產(chǎn)生的未發(fā)現(xiàn)外毒素，細菌產(chǎn)生的神經(jīng)氨酸酶神經(jīng)氨酸酶是可能的毒是可能的毒力因子，酶的存在有助于菌體侵蝕宿主細胞。力因子，酶的存在有助于菌體侵蝕宿主細胞。n 感染動物能產(chǎn)生神經(jīng)氨酸酶抗體，已證實實驗動物感染動物能產(chǎn)生神經(jīng)氨酸酶抗體，已證實實驗動物通過對該酶的主動或被動免疫可獲得保護。通過對該酶的主動或被動免疫可獲得保護。六、微生物學診斷六、微生物學診斷細菌鑒定細菌鑒定o 主要考慮與李氏桿菌的鑒別診斷主要考慮與李氏桿菌的鑒別診斷血清學診斷血清學診斷o 可采用培養(yǎng)凝集試驗（可采用培養(yǎng)凝集試驗（ESCA），又稱生長凝集試），又稱生長凝集試驗，是根據(jù)豬丹毒桿菌在生長繁殖中能與該菌抗血驗，是根據(jù)豬丹毒桿菌在生長繁殖中能與該菌抗血清發(fā)生特異性凝集設(shè)計的。清發(fā)生特異性凝集設(shè)計的。o 細菌凝集現(xiàn)象。細菌凝集現(xiàn)象。七、免疫與治療七、免疫與治療o