微生物及人員衛(wèi)生基本知識培訓(xùn)

1、張張 明明2016-04-22一一、什么是微生物什么是微生物二、微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)二、微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu) 三、微生物的分布三、微生物的分布及特點及特點四、微生物的益處與危害四、微生物的益處與危害 五、藥品微生物的控制五、藥品微生物的控制六、滅菌方法六、滅菌方法主要內(nèi)容什么是微生物w微生物是一類形體微小、結(jié)構(gòu)簡單、進(jìn)化低級、肉眼微生物是一類形體微小、結(jié)構(gòu)簡單、進(jìn)化低級、肉眼直接看不見或看不清，必須借助于顯微鏡才能觀察到直接看不見或看不清，必須借助于顯微鏡才能觀察到的微小生物。的微小生物。w它們對營養(yǎng)的要求非常低。它們對營養(yǎng)的要求非常低。w它們是一類繁殖非常快的生物。它們是一類繁殖非常快的生物。w它們

2、非常容易發(fā)生變異。它們非常容易發(fā)生變異。w它們無處不在。它們無處不在。w大多數(shù)微生物對人類有益。大多數(shù)微生物對人類有益。w有些微生物對人類有害。有些微生物對人類有害。 微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（一）w細(xì)菌細(xì)菌：是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡單、細(xì)胞壁堅韌，以二分裂是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡單、細(xì)胞壁堅韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛，主要有球狀、桿狀和螺方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛，主要有球狀、桿狀和螺旋狀三種形態(tài)。旋狀三種形態(tài)。葡萄球菌棒狀桿菌螺旋菌微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（二）w真菌真菌：是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)

3、為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢物。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（三）w病毒病毒：屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動物、屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡單的植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡單的微生物，它僅

4、有一種核酸（微生物，它僅有一種核酸（DNA或或RNA）作其遺傳物質(zhì)。）作其遺傳物質(zhì)。w病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約75是由病毒引起的。有是由病毒引起的。有些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。愛滋病病毒微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)（四）w菌落形成單位（菌落形成單位（cfu）w菌落菌落：就是在固體培養(yǎng)基上（內(nèi)）以母細(xì)胞為中心而形成的一堆肉眼就是在固體培養(yǎng)基上（內(nèi)）以母細(xì)胞為中心而形成的一堆肉眼可見的，具有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)，常以可見的，具有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)，

5、常以cfu（菌落形（菌落形成單位）為計數(shù)單位。成單位）為計數(shù)單位。微生物特點微生物分布廣種類多體積小繁殖快易變異代謝強(qiáng)特征w1.種類繁多 微生物的數(shù)量和種類是十分驚人的。一滴水，一顆土粒往往都是一個微生物“社會”。自然界已知的微生物就有10萬種左右。有人估計，這個數(shù)僅占自然界微生物種類的1/10。 特征w以土壤內(nèi)的生存密度最大，1克較肥活的土壤常含有幾億到幾十億個微生物；貧瘠土壤每克也含有幾百萬到幾千萬個，一只骯臟的蒼蠅，全身能攜帶5億多個細(xì)菌，三對足能粘附700萬至1000萬個細(xì)菌，可見微生物的密集度之大。 特征w2.分布廣泛 微生物是地球上分布最廣泛的一類生物。在遼闊的自然界中，無論土壤、

6、水域、空氣以及動物、植物、人體內(nèi)外都有大量微生物存在。從炎熱的赤道，到酷寒的極地；從陽光強(qiáng)烈的萬米高空，到終年不見陽光的萬米海底；從綠色無邊的平原，到荒蕪人煙的沙漠；從冰雪高山到泥濘沼澤，到處都有微生物的蹤跡。 特征3.繁殖迅速 微生物的繁殖速度也是同樣驚人的，比高等動植物快得多，有些細(xì)菌，在適宜條件下每20分鐘就可以繁殖一次，例如大腸桿菌，1個細(xì)菌經(jīng)20分鐘就分裂成2個，每小時可分裂3次，這樣，1個細(xì)菌繁殖3代就產(chǎn)生8個細(xì)菌。 特征w1小時 =8個2小時 823=64個3小時 6423=512個4小時 51223=4096個24小時 12 =4.7*102172特征w4.代謝旺盛w物體分割得

7、越細(xì)，其單位體積所占有的表面積值就越大 。w微生物的個體雖然微小，但卻有很大的表面積與體積的比值 ，能迅速地和周圍環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換 。特征w5.容易變異w由于微生物的個體小，對外界環(huán)境條件直接接觸而表面特別敏感，因此，當(dāng)環(huán)境劇烈變化時，多數(shù)個體容易死亡而被淘汰，少數(shù)個體則發(fā)生變異而適應(yīng)新的環(huán)境。w這種易變性，從利用微生物的角度講，既有利又不利。 微生物的作用w絕大多數(shù)微生物對人和動物是有益的，有些還是必不可少的。 w微生物已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè)，發(fā)揮了越來越重要的作用。w抗生素、酸奶、疫苗、酒類等等；微生物的危害w微生物中也有一部分能引起人或動植物病害，這些

8、具有治病性的微生物，稱為病原微生物。如人類的許多傳染病（如感冒、傷寒、痢疾、結(jié)核、脊髄灰質(zhì)炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 w從藥品生產(chǎn)的衛(wèi)生學(xué)而言，微生物對藥品原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格、直接或間接對人類造成危害的重要因素。 藥品微生物的控制w為什么要對藥品生產(chǎn)進(jìn)行微生物控制？為什么要對藥品生產(chǎn)進(jìn)行微生物控制？w（1）有些微生物可以致病。）有些微生物可以致病。w（2）微生物對藥物的影響）微生物對藥物的影響 藥物物理形狀的改變：藥物的物理形狀可因染菌而藥物物理形狀的改變：藥物的物理形狀可因染菌而 改變。改變。 藥物化學(xué)成份的變化藥物化學(xué)成份的變化。 造成藥

9、品的污染和交叉污染。造成藥品的污染和交叉污染。潔凈車間內(nèi)微生物在哪里？空氣 表面水設(shè)備原輔料人污染介質(zhì)（一）w潔凈區(qū)的主要污染源：空氣潔凈區(qū)的主要污染源：空氣w由于人們的生產(chǎn)和生活活動，使空氣中存在某些微生物，包括一些病原由于人們的生產(chǎn)和生活活動，使空氣中存在某些微生物，包括一些病原微生物，使其附著于空氣中的塵埃、飛沫上進(jìn)入人體或藥品而引起疾病微生物，使其附著于空氣中的塵埃、飛沫上進(jìn)入人體或藥品而引起疾病 和污染。和污染。潔凈度測定包括：潔凈度測定包括：w 懸浮粒子懸浮粒子w 微生物微生物 - 浮游菌浮游菌 - 沉降菌沉降菌 - 表面微生物表面微生物污染介質(zhì)（一）w懸浮粒子：懸浮粒子：w泛指懸

10、浮在氣體當(dāng)中的微細(xì)固體或液體粒子（直徑小泛指懸浮在氣體當(dāng)中的微細(xì)固體或液體粒子（直徑小于于100m的顆粒物的顆粒物 ）。在環(huán)境科學(xué)中，懸浮粒子特指）。在環(huán)境科學(xué)中，懸浮粒子特指懸浮在空氣當(dāng)中的微細(xì)污染物，為空氣污染的其中一懸浮在空氣當(dāng)中的微細(xì)污染物，為空氣污染的其中一個主要來源。個主要來源。 懸浮粒子計數(shù)器懸浮粒子計數(shù)器污染介質(zhì)（一）w微生物微生物w沉降菌：是收集到的活微生物粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適宜沉降菌：是收集到的活微生物粒子，通過專用的培養(yǎng)基，在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。 w本測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生本測試方法采

11、用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。 污染介質(zhì)（一）w浮游菌：即懸浮在空氣中的活微生物粒浮游菌：即懸浮在空氣中的活微生物粒子。子。 w本測試方法采用計數(shù)濃度法，即通過收集懸浮在空氣中的生物性本測試方法采用計數(shù)濃度法，即通過收集懸浮在空氣中的生物性粒子于專門的培養(yǎng)基，經(jīng)

12、若干時間，在適宜的生長條件下讓其繁粒子于專門的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時間，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評定潔凈室的活微生物數(shù)，以此來評定潔凈室(區(qū)區(qū))的潔凈度。的潔凈度。浮游菌采樣器浮游菌采樣器污染介質(zhì)（一）10版GMP污染介質(zhì)（二）w表面微生物：包括設(shè)備、車間、人員、表面微生物：包括設(shè)備、車間、人員、包裝材料等表面微生物。包裝材料等表面微生物。w本測試方法采用接觸碟法和棉簽擦拭法。本測試方法采用接觸碟法和棉簽擦拭法。棉簽棉簽接觸碟接觸碟污染介質(zhì)（三）w潔凈區(qū)的主要污染源：水

13、潔凈區(qū)的主要污染源：水w工藝用水在制藥企業(yè)防止污染及作為制藥用水方面至關(guān)重要 。因為它不僅作為產(chǎn)品的一個成分，而且需用其洗滌或冷卻。w藥品的微生物污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)在于工藝用水，因為水是微生物生長代謝的一個必要成分。 w措施：措施：對工藝用水系統(tǒng)采用濕熱滅菌。污染介質(zhì)（四）w潔凈區(qū)主要的污染源：設(shè)備潔凈區(qū)主要的污染源：設(shè)備w幾乎沒有細(xì)菌不“吃”的東西，設(shè)備表面、容器內(nèi)外表面等，都可能是微生物寄存的地方。w設(shè)備和器具與藥品直接接觸 設(shè)備和器具的清洗w清潔程序必須經(jīng)過驗證w按清洗周期清洗w清洗和存放設(shè)備、器具處應(yīng)與生產(chǎn)區(qū)域潔凈等級相同污染介質(zhì)（五）w潔凈區(qū)的主要污染源：原輔料潔凈區(qū)的主要污染源：原輔料

14、w原輔料可能將大量的微生物帶入到藥物制劑中。因此，選用符合標(biāo)準(zhǔn)的原輔料，將有助于控制藥品和環(huán)境的污染水平。 w措施：原輔料在貯藏過程中必須注意環(huán)境條件 ；清潔或消毒處理，進(jìn)行合理封裝。 污染介質(zhì)（六）w潔凈區(qū)的主要污染源：人員潔凈區(qū)的主要污染源：人員w人體散發(fā)的塵粒數(shù)（萬個/每分鐘） : 1050100-250污染介質(zhì)（六）w人員不良行為所產(chǎn)生的污染人員不良行為所產(chǎn)生的污染:w當(dāng)有如下行為時將相應(yīng)增加微粒的產(chǎn)生量當(dāng)有如下行為時將相應(yīng)增加微粒的產(chǎn)生量:w吸煙者的呼吸吸煙者的呼吸 500%w噴嚏噴嚏 2000%w搓手搓手 200%w行走行走 200%w跺腳跺腳 5000%w靜止時散發(fā)的塵粒數(shù)最少。

15、靜止時散發(fā)的塵粒數(shù)最少。在潔凈室內(nèi)當(dāng)操作人員穿無菌服時發(fā)菌量：微生物的污染途徑w自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生物而污染。自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生物而污染。w接觸污染：由于和非無菌的用具、器械或人的接觸而接觸污染：由于和非無菌的用具、器械或人的接觸而污染。污染。w空氣污染：由于空氣中所含微生物的沉降、附著或被空氣污染：由于空氣中所含微生物的沉降、附著或被吸入而污染。吸入而污染。w其他污染：由于其他因素（如昆蟲）而污染。其他污染：由于其他因素（如昆蟲）而污染。微生物的控制w控制微生物污染的措施控制微生物污染的措施w事前控制事前控制w（1）人員條件：體檢（直接接觸藥品人員每年至少體

16、檢一次，）人員條件：體檢（直接接觸藥品人員每年至少體檢一次，傳染病患者，體表有傷口者，皮膚病患者、藥物過敏者不得從事傳染病患者，體表有傷口者，皮膚病患者、藥物過敏者不得從事直接接觸藥品生產(chǎn)）、人員培訓(xùn)；直接接觸藥品生產(chǎn)）、人員培訓(xùn)；w（2）生產(chǎn)過程風(fēng)險分析與評估；）生產(chǎn)過程風(fēng)險分析與評估；w（3）過程設(shè)計：滅菌工藝設(shè)計、工藝審查；）過程設(shè)計：滅菌工藝設(shè)計、工藝審查；w（4）檢驗方法：設(shè)計、實驗室控制；）檢驗方法：設(shè)計、實驗室控制；w（5）設(shè)施、設(shè)備設(shè)計、安裝與驗證：潔凈等級、在線清洗與滅）設(shè)施、設(shè)備設(shè)計、安裝與驗證：潔凈等級、在線清洗與滅菌裝置、驗證（工藝、公用系統(tǒng)、檢驗方法驗證）；菌裝置、驗

17、證（工藝、公用系統(tǒng)、檢驗方法驗證）；微生物的控制w事中控制事中控制w（1）人員衛(wèi)生）人員衛(wèi)生wa.衛(wèi)生習(xí)慣衛(wèi)生習(xí)慣 w在生產(chǎn)區(qū)內(nèi)做到三個嚴(yán)禁：禁止吃東西、禁止喧嘩、禁止吸煙。在生產(chǎn)區(qū)內(nèi)做到三個嚴(yán)禁：禁止吃東西、禁止喧嘩、禁止吸煙。w勤洗手；不得戴手表、飾品和化妝；勤洗手；不得戴手表、飾品和化妝；wb.人員著裝人員著裝w人員進(jìn)入潔凈區(qū)嚴(yán)格按照人員進(jìn)入潔凈區(qū)嚴(yán)格按照SOPSOP（正確的更衣、洗手、消毒程序）（正確的更衣、洗手、消毒程序）來執(zhí)行，盡量避免人為帶入污染；來執(zhí)行，盡量避免人為帶入污染；wc. 口罩口罩w按要求帶好口罩，口罩要遮住口、鼻；口罩要經(jīng)常清洗、消毒或換新；按要求帶好口罩，口罩要遮

18、住口、鼻；口罩要經(jīng)常清洗、消毒或換新；盡量使用一次性性口罩；盡量使用一次性性口罩；微生物的控制w（2）工藝衛(wèi)生）工藝衛(wèi)生w按工藝要求進(jìn)行消毒、滅菌；控制進(jìn)入潔凈區(qū)的人數(shù)，包括進(jìn)入按工藝要求進(jìn)行消毒、滅菌；控制進(jìn)入潔凈區(qū)的人數(shù)，包括進(jìn)入房間的人數(shù)。房間的人數(shù)。w（3）環(huán)境衛(wèi)生）環(huán)境衛(wèi)生w定期做好壓差、溫濕度、風(fēng)速、塵埃粒子、沉降菌、浮游菌等空定期做好壓差、溫濕度、風(fēng)速、塵埃粒子、沉降菌、浮游菌等空氣凈化潔凈度的監(jiān)測。氣凈化潔凈度的監(jiān)測。w有效地阻止室外的污染侵入室內(nèi)。（空氣過濾、壓差）有效地阻止室外的污染侵入室內(nèi)。（空氣過濾、壓差）w迅速有效地排除潔凈區(qū)內(nèi)已發(fā)生的污染。迅速有效地排除潔凈區(qū)內(nèi)已發(fā)

19、生的污染。w滅菌（濕熱滅菌：衣服）、清潔、消毒（甲醛消毒最徹底，臭滅菌（濕熱滅菌：衣服）、清潔、消毒（甲醛消毒最徹底，臭氧和紫外輔助）氧和紫外輔助）w控制污染源，減少污染發(fā)生量（人、物）?？刂莆廴驹矗瑴p少污染發(fā)生量（人、物）。微生物的控制w（4）物料）物料w制定合理的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，購進(jìn)物料必須符合質(zhì)量要求；按規(guī)定制定合理的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，購進(jìn)物料必須符合質(zhì)量要求；按規(guī)定取樣，取樣過程不得污染物料；取樣，取樣過程不得污染物料； 做好物料微生物檢驗；做好物料微生物檢驗；w（5）質(zhì)量控制與記錄：）質(zhì)量控制與記錄：w嚴(yán)格按清潔操作規(guī)程操作、做好清潔記錄；嚴(yán)格按清潔操作規(guī)程操作、做好清潔記錄；w（6）包裝

20、、儲存和運輸）包裝、儲存和運輸w要有適宜的儲存條件，防止儲存過程質(zhì)變或外界污染，物料包裝要有適宜的儲存條件，防止儲存過程質(zhì)變或外界污染，物料包裝要密封；要密封；w進(jìn)入潔凈區(qū)的物料要脫包或消毒處理；進(jìn)入潔凈區(qū)的物料要脫包或消毒處理；w運輸過程確保產(chǎn)品受到污染；運輸過程確保產(chǎn)品受到污染；微生物的控制w事后控制事后控制w（1）質(zhì)量調(diào)查；）質(zhì)量調(diào)查；w（2）污染菌種的判定；）污染菌種的判定；w（3）污染產(chǎn)品處理。）污染產(chǎn)品處理。滅菌方法w滅菌法是指殺死或除去所有微生物及其芽孢的方法。一般可分為物理滅菌法和化學(xué)滅菌法。1.物理滅菌法：指采用加熱、過濾、照射等物理手段達(dá)到滅菌目的的方法。滅菌方法1.1加熱

21、滅菌法加熱可破壞微生物中酶、蛋白質(zhì)和核酸，導(dǎo)致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下，濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時，有水分存在，蛋白質(zhì)容易變性。水分又易使微生物膜壁潤濕，濕熱的穿透力比干熱大。 滅菌方法w1.2濾過除菌法系指使藥液通過除菌濾器中的適宜濾材，機(jī)械濾除（阻擋）活的或死的細(xì)菌，而得到不含細(xì)菌藥液的方法。主要用于對熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水的除菌。供滅菌用的濾器，要求能有效地從溶液中除凈微生物，溶液順暢地由濾器通過，濾液中不落入任何不需要的物質(zhì)，濾器容易清洗，操作簡便。滅菌方法w1.3紫外線滅菌法是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線波長是200300nm，滅菌力最強(qiáng)的波長是253.7nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性，同時空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。 滅菌方法2.化學(xué)滅菌法：指用化學(xué)藥品殺滅微生物的方法。 同一種化學(xué)藥品的低濃度時呈現(xiàn)抑菌作用，而在高濃度時則能起殺菌作用。 殺菌機(jī)理：能使微生物蛋白質(zhì)變性死亡，或與酶系統(tǒng)結(jié)合影響代謝，或改變膜壁通透性使微生物死亡等。 常用的方法有消毒劑消毒法和化學(xué)氣體滅菌法等。滅菌方法w2.1消毒劑消毒法消毒是指殺死病原微生物的方法。w化學(xué)消毒