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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)五實(shí)驗(yàn)五 微生物顯微計(jì)數(shù)和大小測量微生物顯微計(jì)數(shù)和大小測量 1.1 1.1 掌握使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板測定微生物數(shù)量的方法。掌握使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板測定微生物數(shù)量的方法。1.2 1.2 掌握使用顯微鏡測微尺測定微生物大小的方法。掌握使用顯微鏡測微尺測定微生物大小的方法。1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?.1 2.1 測量微生物數(shù)量的方法有哪些測量微生物數(shù)量的方法有哪些? ?為什么可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板為什么可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板來測量微生物的數(shù)量?來測量微生物的數(shù)量?2.2 2.2 測量微生物細(xì)胞大小的方法有哪些?目鏡測微尺為什么要測量微生物細(xì)胞大小的方法有哪些?目鏡測微尺為什么要校正校正? ?2 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理(通過了
2、解下列問題來掌握實(shí)驗(yàn)原理通過了解下列問題來掌握實(shí)驗(yàn)原理)3 3 材料與方法材料與方法3.1.1 藥品: 生理鹽水。生理鹽水。3.1.2 菌種: Saccharomyces cerevisiae(釀酒酵母)(釀酒酵母)2-3 d2-3 d培培養(yǎng)物。養(yǎng)物。3.1.3 儀器:顯微鏡(顯微鏡(MODEL E100MODEL E100), ,顯微測微尺(目鏡測微顯微測微尺(目鏡測微尺、鏡臺(tái)測微尺),血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,電吹風(fēng)機(jī)。尺、鏡臺(tái)測微尺),血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,電吹風(fēng)機(jī)。3.1.4 其它物品:擦鏡紙,毛細(xì)滴管,接種環(huán),酒精燈,等。擦鏡紙,毛細(xì)滴管,接種環(huán),酒精燈,等。3.1 3.1 實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材3.2 3.
3、2 方法方法 A. A. 酵母菌的顯微鏡計(jì)數(shù)酵母菌的顯微鏡計(jì)數(shù)3.2.1 3.2.1 菌懸液制備。菌懸液制備。將將5 mL5 mL的生理鹽水加到釀酒酵母的斜面培養(yǎng)的生理鹽水加到釀酒酵母的斜面培養(yǎng)物上,用接種環(huán)刮取菌苔,將菌懸液倒入盛有物上,用接種環(huán)刮取菌苔,將菌懸液倒入盛有5 mL5 mL的生理鹽水和的生理鹽水和玻璃珠的三角瓶中,振蕩使細(xì)胞分散。(集體完成)玻璃珠的三角瓶中,振蕩使細(xì)胞分散。(集體完成)3.2.2 3.2.2 檢查血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。在顯微鏡下檢查計(jì)數(shù)室,若有污物,檢查血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。在顯微鏡下檢查計(jì)數(shù)室,若有污物,用自來水沖洗,再用用自來水沖洗,再用95%95%酒精棉球輕輕擦洗后,用
4、電吹風(fēng)機(jī)吹干。酒精棉球輕輕擦洗后,用電吹風(fēng)機(jī)吹干。3.2.3 3.2.3 加樣品。在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上蓋上蓋片,用毛細(xì)滴管將搖勻加樣品。在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上蓋上蓋片,用毛細(xì)滴管將搖勻的釀酒酵母菌懸液由蓋片邊緣滴一小滴,再用鑷子輕壓蓋片,靜的釀酒酵母菌懸液由蓋片邊緣滴一小滴,再用鑷子輕壓蓋片,靜置置5 min 。3.2.4 3.2.4 顯微鏡計(jì)數(shù)。將加有樣品的備細(xì)胞計(jì)數(shù)板置于載物臺(tái)上,顯微鏡計(jì)數(shù)。將加有樣品的備細(xì)胞計(jì)數(shù)板置于載物臺(tái)上,先用低倍鏡觀察計(jì)數(shù)室位置,再換高倍鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)。要求稀釋度先用低倍鏡觀察計(jì)數(shù)室位置,再換高倍鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)。要求稀釋度為每小格內(nèi)為每小格內(nèi)5 51010個(gè)菌體為宜。個(gè)菌體為宜。3
5、.2 3.2 方法方法 B. B. 微生物大小的測定微生物大小的測定3.2.1 3.2.1 目鏡測微尺安裝:將目鏡透鏡旋下,將目鏡測微尺刻度目鏡測微尺安裝:將目鏡透鏡旋下,將目鏡測微尺刻度朝下放在目鏡鏡筒內(nèi)的隔板上。(教師示范)朝下放在目鏡鏡筒內(nèi)的隔板上。(教師示范)3.2.2 3.2.2 校正目鏡測微尺。將鏡臺(tái)測微尺放載物臺(tái)上,在低倍鏡下校正目鏡測微尺。將鏡臺(tái)測微尺放載物臺(tái)上,在低倍鏡下觀察刻度,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測微尺,使兩尺在某一區(qū)域內(nèi)完全重合。觀察刻度,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測微尺,使兩尺在某一區(qū)域內(nèi)完全重合。數(shù)出兩重合線間鏡臺(tái)測微尺和目鏡測微尺格數(shù)。數(shù)出兩重合線間鏡臺(tái)測微尺和目鏡測微尺格數(shù)。目鏡測微尺每格長度(m)兩重合刻度間鏡臺(tái)測微尺格數(shù)10/兩重合刻度間目鏡測微尺格數(shù)3.2.5 3.2.5 清洗。清洗。自來水沖洗自來水沖洗95%95%酒精棉球擦洗酒精棉球擦洗吹干吹干放入盒中放入盒中實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告1 1 用文字描述實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒉牧吓c方法用文字描述實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒉牧吓c方法. .
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