膿汁中球菌的分離與鑒定

1、 直接涂片鏡檢 分離培養(yǎng) 生化試驗(yàn) 血清學(xué)試驗(yàn) 動(dòng)物試驗(yàn) 藥物敏感試驗(yàn)（一）分離 常見球菌的生物學(xué)性狀 溶血現(xiàn)象的觀察葡萄球菌葡萄球菌生物學(xué)性狀：生物學(xué)性狀：G+球形或略呈橢圓球形或略呈橢圓形，形，典型的葡萄球菌排列典型的葡萄球菌排列呈呈葡萄串狀葡萄串狀。在膿汁和液。在膿汁和液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)者，常為體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)者，常為雙球或短鏈狀雙球或短鏈狀。 營(yíng)養(yǎng)要求不高營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，最適生長(zhǎng)溫度為最適生長(zhǎng)溫度為37度，度，最適最適pH為為7.4。 菌落特點(diǎn)：圓形，隆菌落特點(diǎn)：圓形，隆起，表面光滑濕起，表面光滑濕 潤(rùn)，潤(rùn)，邊緣整齊，不透明，邊緣整齊，不透明

2、，直徑約直徑約12mm。（以金葡為例，注意（以金葡為例，注意溶血環(huán)溶血環(huán)）菌落顏色菌落顏色溶血現(xiàn)象溶血現(xiàn)象致病性致病性金黃色葡金黃色葡萄球菌萄球菌多為金黃多為金黃,可可有白或檸檬有白或檸檬溶血溶血(溶血素溶血素)強(qiáng)強(qiáng),為致病為致病菌菌表皮葡萄表皮葡萄球菌球菌白色白色_弱弱,為條件為條件致病菌致病菌腐生葡萄腐生葡萄球菌球菌白色或檸檬白色或檸檬色色_不致病不致病生物學(xué)性狀：生物學(xué)性狀：G+ 球形或橢圓形，成鏈狀排球形或橢圓形，成鏈狀排列。列。 營(yíng)養(yǎng)要求高營(yíng)養(yǎng)要求高，普通培養(yǎng)基，普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)不良，需補(bǔ)充血液上生長(zhǎng)不良，需補(bǔ)充血液血清葡萄糖。血清葡萄糖。 最適宜生長(zhǎng)溫度最適宜生長(zhǎng)溫度37度，最度，

3、最適宜適宜pH為為7.47.6。 菌落特點(diǎn)：菌落呈圓形，隆起，灰白色，細(xì)小，表面光滑，邊緣整齊，直徑 0.50.75mm。溶血現(xiàn)象溶血環(huán)的特點(diǎn)致病性甲型溶血性鏈球菌溶血1-2mm,草綠色條件致病乙型溶血性鏈球菌溶血2-4mm，完全透明致病強(qiáng)丙型鏈球菌無無無甲甲 鏈鏈乙乙 鏈鏈丙丙 鏈鏈生物學(xué)性狀：生物學(xué)性狀：G+雙球菌雙球菌,菌體呈矛頭狀菌體呈矛頭狀 ,寬端寬端相對(duì)相對(duì),尖端向外尖端向外.有莢膜有莢膜. 營(yíng)養(yǎng)要求高營(yíng)養(yǎng)要求高,在含有血液或血在含有血液或血清的培養(yǎng)基中才能生長(zhǎng)清的培養(yǎng)基中才能生長(zhǎng)最適溫度為最適溫度為37度度,最適最適pH為為7.4-7.8. 在在 血瓊脂平板上血瓊脂平板上,菌落呈

4、圓形稍扁菌落呈圓形稍扁,灰白色灰白色,細(xì)小細(xì)小,半透明半透明,直徑直徑0.5-1.5mm.溶血環(huán)溶血環(huán),與甲型溶血性鏈球菌相似與甲型溶血性鏈球菌相似,孵育時(shí)間孵育時(shí)間48h,菌落中央菌落中央呈臍狀呈臍狀下陷下陷. 生物學(xué)性狀生物學(xué)性狀:G-腎形或豆形腎形或豆形雙球菌雙球菌,兩菌接觸兩菌接觸面平坦或稍向內(nèi)陷面平坦或稍向內(nèi)陷.營(yíng)養(yǎng)要求高營(yíng)養(yǎng)要求高,需在含有血清需在含有血清,血液的培養(yǎng)基中才能生長(zhǎng)血液的培養(yǎng)基中才能生長(zhǎng).最適溫度最適溫度37度度,最適最適pH7.4-7.6,在巧克力培養(yǎng)基上生在巧克力培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好長(zhǎng)良好.專性需氧專性需氧. 菌落:圓形,凸起,無色,光滑,透明,露滴狀. 大腸桿菌:

5、生物學(xué)性狀: G- 鏡下為桿狀 營(yíng)養(yǎng)要求不高,可在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng) 最適宜溫度為37度,最適宜pH為7.4 菌落特點(diǎn): 圓形,凸起,灰白色,表面光滑,濕潤(rùn),直徑2-3mm. 分類: 腸產(chǎn)毒性大腸桿菌 腸侵襲性大腸桿菌 腸致病性大腸桿菌 腸出血性大腸桿菌 腸集聚性大腸桿菌 生物學(xué)特性: G- 鏡下為桿狀 營(yíng)養(yǎng)要求不高,可在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng) 最適宜溫度為37度,最適宜pH為7.4 菌落特點(diǎn): 圓形,無色,半透明,中等大小 在普通瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入血液制備而成,是最常用的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,可供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長(zhǎng). 常用于分離培養(yǎng)和溶血現(xiàn)象觀察. 含有膽酸鹽抑制G+,枸櫞酸鈉和煌綠能部分抑制

6、大腸桿菌,致病的沙門菌和志賀菌能大量生長(zhǎng). 含有中性紅指示劑和乳糖,中性紅遇酸變粉紅. 常用于培養(yǎng)腸道致病菌. 含有乳糖和葡萄糖: 產(chǎn)酸產(chǎn)氣 含有硫酸亞鐵: 如細(xì)菌分解含硫氨基酸生成 硫化氫,可形成黑色沉淀 酚紅指示劑: 酸: 黃 堿: 紅 1)大腸桿菌發(fā)酵乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（糖發(fā)酵試驗(yàn)）,是斜面及底層均呈黃色并有氣泡. 2) 沙門菌和志賀菌只發(fā)酵葡萄糖,不發(fā)酵乳糖,分解葡萄糖產(chǎn)的酸使培養(yǎng)基pH下降,酚紅指示劑變黃,但是培養(yǎng)基中的葡萄糖僅有培養(yǎng)基中的葡萄糖僅有0.1%,在斜面的酸性物質(zhì)被氧化成揮發(fā)性酸,且細(xì)菌氧化氨基酸物質(zhì)產(chǎn)生的氨的中和作用,是斜面變紅,而底層則為黃色.雙糖鐵培養(yǎng)基的用途雙糖鐵培養(yǎng)基的用途 用于觀察細(xì)菌是否產(chǎn)生硫化氫及對(duì)糖的發(fā)酵能力. 1) 將膿汁標(biāo)本接種在血瓊脂