實(shí)驗(yàn)室方法確認(rèn)PPT

1、CNAS-CL09 實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場評審核查表檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測領(lǐng)域的應(yīng)用說明 5.4.2* 實(shí)驗(yàn)室在采用新的方法進(jìn)行檢測前，是否對方法進(jìn)行驗(yàn)證并保留驗(yàn)證記錄？依據(jù)CNAS-CL01準(zhǔn)則 實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場評審核查表 5.4 檢測和校準(zhǔn)方法及方法確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室制定的方法或被實(shí)驗(yàn)室采用的方法，如果滿足預(yù)期用途并經(jīng)過驗(yàn)證，是否也予以使用？在引入檢測或校準(zhǔn)前，是否確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室能夠正確地運(yùn)用這些標(biāo)準(zhǔn)方法？如果標(biāo)準(zhǔn)方法有改變，實(shí)驗(yàn)室是否重新進(jìn)行證實(shí)？ 應(yīng)證實(shí)能力應(yīng)證實(shí)能力 依據(jù)CNAS-CL01準(zhǔn)則 實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場評審核查表5.4.5方法的確認(rèn)5.4.5.1.實(shí)驗(yàn)室是否通過檢查并提供客觀證據(jù)，證實(shí) 某一特

2、定預(yù)期用途的特定要求得到滿足?5.4.5.2實(shí)驗(yàn)室是否對非標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)（制 定）的方法、超出其預(yù)定范圍使用的標(biāo)準(zhǔn)方法、 擴(kuò)充和修改過的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行確認(rèn)，以證實(shí)該方 法適合于預(yù)期的用途？ 確認(rèn)是否盡可能全面，以滿足預(yù)定用途或應(yīng)用領(lǐng) 域的需要？ 實(shí)驗(yàn)室是否記錄所獲得的結(jié)果、使用的確認(rèn)程序 以及該方法是否適于預(yù)期用途的聲明？CNAS-CL10:2012檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在化學(xué)檢測領(lǐng)域的應(yīng)用說明5.4.2 b) 實(shí)驗(yàn)室是否對首次采用的檢測方法進(jìn)行技術(shù)能力的驗(yàn)證，如檢出限、回收率、正確度和精密度等？5.4.5 b) 實(shí)驗(yàn)室是否通過試驗(yàn)方法的檢出限、精密度、回收率、適用的濃度范圍和樣品基

3、體等特性來對檢測方法進(jìn)行確認(rèn)？實(shí)驗(yàn)室是否能解釋和說明檢出限和報(bào)告限的獲得？報(bào)告限是否設(shè)定在一定置信度下可獲得定量結(jié)果的水平？ 依據(jù)CNAS-CL01準(zhǔn)則 實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場評審核查表5.4.3實(shí)驗(yàn)室制定的方法 實(shí)驗(yàn)室為采用自己應(yīng)用而制定檢測和校準(zhǔn)方法過程的活動，是否是一種有計(jì)劃的活動？ 是否指定具有足夠資源的有資格的人員來進(jìn)行該項(xiàng)活動？ 是否隨著方法制定的進(jìn)度加以更新計(jì)劃，并確保在所有有關(guān)人員之間中有效溝通？CNAS-CL10:2012 / 5.6 測量溯源性5.6.1總則實(shí)驗(yàn)室是否按檢測方法的要求建立校準(zhǔn)曲線？所用標(biāo)樣是否覆蓋被測樣品的濃度范圍？最低濃度的標(biāo)樣是否在接近檢測方法報(bào)告限的水平,并建立和

4、執(zhí)行線性校準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)的準(zhǔn)則？在分析測試中常會遇到處理兩個變量之間的關(guān)系，例如在建立校準(zhǔn)曲線時需要了解被測組分的濃度和響應(yīng)值之間的關(guān)系。兩個變量x與y之間的關(guān)系存在著函數(shù)關(guān)系，y值隨著x值按照確定的規(guī)律變化，由一個 xi值可以精確地求出yi值。值。 見圖： (x,y)的散布圖 y=f(x) 如回歸函數(shù)是一個線性函數(shù)，則稱變量間是線性相關(guān)的。一元線性回歸方程：y=a+bx 由于存在測定誤差， x與y不是函數(shù)關(guān)系，而是相關(guān)關(guān)系（相關(guān)關(guān)系是統(tǒng)計(jì)關(guān)系）。 a -截距 b-斜率 1.校準(zhǔn)曲線的繪制 每種應(yīng)用校準(zhǔn)曲線的分析方法在初次使用時，可通過繪制校準(zhǔn)曲線以確定它的檢測上限，并結(jié)合檢測下限確定其檢測范

5、圍。繪制校準(zhǔn)曲線應(yīng)注意：1）校準(zhǔn)曲線一般可根據(jù)4-6個濃度及其測量信號響應(yīng)值繪制；2）測量信號值的最小分度應(yīng)與縱坐標(biāo)的最小分格相適應(yīng)；3）濃度的整數(shù)值應(yīng)落在橫坐標(biāo)的中格或大格的粗線上，以便于分小格查閱，并盡量使校準(zhǔn)曲線的幾何斜率接近于1（與橫坐標(biāo)約成45度角），以使在兩個軸上的讀數(shù)誤差相近。 4）校準(zhǔn)曲線的斜率常因溫度、試劑批號等條件的變化而變化。在測定未知樣品的同時測繪校準(zhǔn)曲線是最理想的。否則，應(yīng)在測定未知樣品的同時，平行測定線性范圍內(nèi)的中等濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和空白溶液各二份，取均值相減后，與以前繪制的校準(zhǔn)曲線上相同點(diǎn)進(jìn)行核對，二者的相對差值根據(jù)方法精度要求=0.999。否則可參照上述 影響線性關(guān)

6、系的諸因素，找出原因并盡可能加以糾正，重新測定和繪制新的校準(zhǔn)曲線。 對于成熟的分析方法和熟練的分析人員如能細(xì)心操作能使校準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)絕對值IrI=0.999,在實(shí)驗(yàn)條件不變情況下校準(zhǔn)曲線的斜率一般很穩(wěn)定，其截距等于零。例：用原子吸收分光光度法測定微量鈷，得到下列一組數(shù)據(jù)：鈷含量（c）0.28 0.56 0.84 1.12 2.24 (ug)吸光度（A）3.0 5.5 8.2 11.0 21.5試由上述數(shù)據(jù)確定A與C得線性回歸方程式，該關(guān)系式是否有意義？解：分別求出斜率b和截距ab=Sxy/Sxx=21.70/2.29=9.48a=y平均-bx平均=9.48-9.48x1.008=0.28吸

7、光度A和鈷濃度c的線性回歸方程： A=0.28+9.48c 相關(guān)系數(shù)r=Sxy/Sxx X Syy =1.000查相關(guān)系數(shù)臨界值表，r0.05,5=0.878,r r0.05,5 ,說明確立的回歸方程是有意義的。 注： Sxy=xy - (x) ( y) ； Sxx=x平方-（x）平方/n Syy=y平方-（y）平方/n 提取效率與樣品的前處理有關(guān)： 由于食品本身（如蛋白質(zhì)、脂肪、糖類等）對分析測定 常產(chǎn)生干擾，因此在定量分析測定之前必須對樣品進(jìn)行前 處理。樣品在處理過程中，既要排除干擾的因素，又不致于使被測物受到損失，而且還應(yīng)能使被測物達(dá)到一定濃度，從而使測定得到理想結(jié)果。 所以在分析過程中，樣品的前處理是分析測定的重要步驟。在分析化學(xué)中，常用的分離方法有沉淀分離法、液-液萃取分離法、離子交換分離法、色譜分離法、蒸