薄層板的鋪制活化點(diǎn)板展層顯色及Rf的計(jì)算

1、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一1、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱：薄層板的鋪制、活化、點(diǎn)板、展層、顯色及Rf的計(jì)算。2、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目性質(zhì)：驗(yàn)證性。3、實(shí)驗(yàn)要求：必修。4、計(jì)劃學(xué)時(shí)數(shù)：6學(xué)時(shí)。5、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：（1）硅膠薄層板的鋪制薄層層析是將吸附劑或者支持劑（有時(shí)加入固化劑）均勻地鋪在一塊玻璃上，形成薄層。把欲分離的樣品點(diǎn)在薄層板的一端，然后將點(diǎn)樣端浸入適宜的展開劑中, 在密閉的層析缸中展開，使混合物得以分離的方法。由于層析在薄層上進(jìn)行故而得名。薄層層析是一種微量、快速的層析方法。它不僅可以用于純物質(zhì)的鑒定，也可用于混合物的分離、提純及含量的測定，還可以通過薄層層析來摸索和確定柱層析時(shí)的洗脫條件。先做一下準(zhǔn)備工作：玻板（約10×

2、6cm）羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液 配成0.5%溶液，CMC-Na一般是要煮的，煮的時(shí)候應(yīng)該緩緩加入CMC-Na，否則容易結(jié)成團(tuán)塊，影響濃度；煮好后一般放個(gè)兩三天后，取上層清液使用，如果急著使用，也可以用過濾的方法。硅膠H（小于260目）硅膠：CMC-Na=1g：3mL 研磨勻漿的時(shí)間，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來定，與空氣濕度有關(guān)，一般通過拿起研棒時(shí)勻漿下滴的情況來判斷，越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑外，也影響板涂層的厚度，進(jìn)一步影響上樣量。鋪好的板，用手捏起來，平著一放，摔一摔，讓玻板上的硅膠鋪得更均勻。（2）硅膠薄層板的活化鋪好的硅膠板，放置過夜，就可使用，想活化的也可活化。即移入烘箱，緩

3、慢升溫至105-110恒溫活化半小時(shí)，取出放入干燥器中備用。（3）硅膠薄層板的展層用點(diǎn)樣毛細(xì)管取少量溶液點(diǎn)于硅膠板（離板底部大約0.5cm ）。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，浸入展開劑的深度為距原點(diǎn)2-3mm為宜（切勿將樣點(diǎn)侵入展開劑中），密封頂蓋，待展開至溶劑前沿達(dá)到規(guī)定的展距，取出薄層板，晾干。（4）硅膠薄層板的顯色及Rf的計(jì)算分離的化合物若有顏色，很容易識(shí)別出來各個(gè)樣點(diǎn)。但多數(shù)情況下化合物沒有顏色，要識(shí)別樣點(diǎn)，必須使樣點(diǎn)顯色。通用的顯色方法有顯色劑顯色（碘蒸氣顯色）、紫外線顯色和熒光薄層板顯色和硫酸-乙醇溶液顯色。碘蒸氣顯色：將展開的薄層板揮發(fā)干展開劑后，放在盛有碘晶體的封閉容

4、器中，升華產(chǎn)生的碘蒸氣能與有機(jī)物分子形成有色的締合物，完成顯色。紫外線顯色：用摻有熒光劑的固定相材料（如硅膠F，氧化鋁F等）制板，展開后在用紫外線照射展開的干燥薄層板，板上的有機(jī)物會(huì)吸收紫外線，在板上出現(xiàn)相應(yīng)的色點(diǎn)，可以被觀察到。熒光薄層板檢測：熒光薄層是在硅膠中摻入少量熒光物質(zhì)制成的板，在254nm紫外燈，整個(gè)薄層板顯黃綠色熒光，被測物質(zhì)由余吸收了部分照射在此斑點(diǎn)位置的紫外線，而呈現(xiàn)各種顏色。硫酸乙醇溶液顯色劑：用乙醇-硫酸液顯色時(shí)，配制方法為把10ml濃硫酸加入在90ml乙醇中。注意要少量地慢慢混合。均勻噴在薄層板上，然后通過加熱，不同的化合物則顯示不同的顏色。比移值Rf的計(jì)算：Rf =原點(diǎn)至組分點(diǎn)中心的距離/原點(diǎn)至流動(dòng)前沿的距離組分1的Rf =d1/d組分2的Rf =d2/d 柱層析條件的選擇：以薄層層析第一個(gè)點(diǎn)的Rf為0.3左右的展開系統(tǒng)為柱層析的洗脫條件。6、項(xiàng)目需用儀器設(shè)備名稱：涂布器、層析缸、紫外燈、噴霧器、加熱烤板。7、所需主要元器件及耗材：薄層層析硅膠、柱層析硅膠、層析柱、層析缸、點(diǎn)樣毛細(xì)管、硫酸、乙醇。8、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目目的和任務(wù)：掌握薄層板的鋪制、活化以及點(diǎn)樣技術(shù)，掌握利用薄層