液質(zhì)聯(lián)用操作及注意事項課件

1、hystar；hystarhystar；hystar軟件培訓(xùn)資料；布魯克公司北京應(yīng)用技術(shù)培訓(xùn)中心； hystar軟件介紹；軟件功能：軟件功能：；液質(zhì)聯(lián)用儀器控制和維護液質(zhì)聯(lián)用數(shù)據(jù)采集液質(zhì)聯(lián)用方； 軟件啟動界面；簡潔的軟件啟動界面，簡潔的軟件啟動界面，按操作流； 第一步：第一步：HardwareSetup硬件；調(diào)用已配置好并保存的硬件配置文件*.hss；或者；hystarhystar hystarhystar 軟件培訓(xùn)資料布魯克公司北京應(yīng)用技術(shù)培訓(xùn)中心hystar 軟件介紹軟件功能： 軟件功能：液質(zhì)聯(lián)用儀器控制和維護 液質(zhì)聯(lián)用數(shù)據(jù)采集 液質(zhì)聯(lián)用方法編輯軟件啟動界面簡潔的軟件啟動界面， 簡潔的軟件

2、啟動界面，按操作流程， 按操作流程，一步一步設(shè)置。 一步一步設(shè)置。第一步： 第一步：Hardware Setup 硬件配置調(diào)用已配置好并保存的硬件配置 文件*.hss； 或者新建硬件配置文件； 或者新建硬件配置文件； 建議將配置文件保存在C盤以外 的路徑下； 的路徑下； 只有在硬件發(fā)生改動時， 只有在硬件發(fā)生改動時，才有必 要進行硬件配置， 要進行硬件配置，日常實驗可忽略 這一步； 這一步；Agilent 液相硬件配置模塊化設(shè)置， 模塊化設(shè)置，分別選擇泵、 分別選擇泵、進樣器、 進樣器、柱溫 箱、檢測器等模塊的型號， 檢測器等模塊的型號，特殊型號需安 裝相應(yīng)的插件， 裝相應(yīng)的插件，請與工程師聯(lián)

3、系。 請與工程師聯(lián)系。Waters 和Dionex 液相硬件配置整 體 設(shè) 置 ， Waters UPLC 系 列 和 Dionex Ultimate系列在安裝插件后 才能在Hystar中顯示。 中顯示。第二部： 第二部：Method 方法文件配置調(diào)用已配置好并保存的方法配 置文件*.m； 方法文件應(yīng)包含所有硬件對應(yīng) 的方法； 的方法； 方法可在下一步Sample Table（樣品表） 樣品表）中分別設(shè)置。 中分別設(shè)置。第三步： 第三步：Sample Table 樣品表編輯調(diào)用已編輯好并保存的樣品表文件*.xml； 或者新建樣品表文件； 或者新建樣品表文件； 建議按不同日期建立樣品表文件； 建

4、議按不同日期建立樣品表文件；樣品表編輯界面- General樣品表以Exel表形式列出， 表形式列出，界面整潔； 界面整潔； 支持Windows 常用的復(fù)制、 常用的復(fù)制、粘貼等命令， 粘貼等命令，方便修改； 方便修改； 樣品名進樣體積樣品盤位置 數(shù)據(jù)保存路徑樣品表編輯界面- Methods液相方法編輯 選擇液相方法選擇質(zhì)譜方法對每個樣品， 對每個樣品，可分別調(diào)用不同的液相方法、 可分別調(diào)用不同的液相方法、質(zhì)譜方法、 質(zhì)譜方法、數(shù)據(jù)處理方法等等； 數(shù)據(jù)處理方法等等； 建議不同硬件的方法， 建議不同硬件的方法，如液相方法、 如液相方法、質(zhì)譜方法等， 質(zhì)譜方法等，分別保存在不同的路徑下； 分別保存

5、在不同的路徑下； 可以將所有方法合并保存， 可以將所有方法合并保存，生成Super method，即第二步中可調(diào)用的方法； 即第二步中可調(diào)用的方法； 質(zhì)譜方法的編輯在 micrOTOFcontrol 中 ， 編輯好后保存為質(zhì)譜方法文件， 編輯好后保存為質(zhì)譜方法文件 ， hystar 中 只能調(diào)用文件； 只能調(diào)用文件；液相方法編輯- General方法的描述信息方法編輯后， 方法編輯后，可保存成單獨的液相色 譜文件， 譜文件，以備調(diào)用。 以備調(diào)用。液相方法編輯- LC parametersLC parameters又細(xì)分為四個頁面； 又細(xì)分為四個頁面； LC Pump 定義了液相方法的流速、 定

6、義了液相方法的流速、流動相初始比例、 流動相初始比例、 運行時間和采集時間等參數(shù)液相方法編輯- AutosamplerAutosampler 定義了自動進樣器的參數(shù)設(shè)置， 定義了自動進樣器的參數(shù)設(shè)置，包括吸取和 排出的速度， 排出的速度，進樣針深度， 進樣針深度，洗瓶的位置； 洗瓶的位置；液相方法編輯- Column Oven設(shè)置柱溫箱溫度液相方法編輯- Detector設(shè)置檢測器采樣頻率液相方法編輯- LC Timetable設(shè)置流動相變化梯度液相方法編輯- Signal設(shè)置 hystar 中顯示的檢測信號， 中顯示的檢測信號 ， 包括紫外信 號和質(zhì)譜信號； 號和質(zhì)譜信號； 可最大支持8個信

7、號輸出顯示； 個信號輸出顯示；第四步： 第四步：進入Acquisition儀器控制界面編輯完樣品表后， 編輯完樣品表后，點擊 Acquisition鍵，即可進入 第四步“ 第四步“Acquisition”儀器控制界面系統(tǒng)控制和狀態(tài)區(qū)全紫外掃描數(shù)據(jù)和質(zhì)譜數(shù)據(jù)顯示區(qū)液相參數(shù)和色譜圖顯示區(qū)系統(tǒng)控制和狀態(tài)區(qū)液相系統(tǒng)狀態(tài)信息當(dāng)前樣品信息 分模塊顯示， 分模塊顯示，液相系統(tǒng)（ 液相系統(tǒng)（泵、進樣器、 進樣器、柱溫箱、 柱溫箱、檢測器等） 檢測器等），質(zhì)譜系統(tǒng)等； 質(zhì)譜系統(tǒng)等； 對于Agilent 液相， 液相，控制命令在相應(yīng)模塊的右鍵菜單中； 控制命令在相應(yīng)模塊的右鍵菜單中； 對于Dionex 液相和 W

8、aters，可進入其自身的控制軟件界面； 可進入其自身的控制軟件界面； 液相控制和操作請參考液相系統(tǒng)說明書； 液相控制和操作請參考液相系統(tǒng)說明書； hystar 狀態(tài)區(qū)顯示為綠色時， 狀態(tài)區(qū)顯示為綠色時，表示所有系統(tǒng)準(zhǔn)備就緒， 表示所有系統(tǒng)準(zhǔn)備就緒，可開始采集數(shù)據(jù)； 可開始采集數(shù)據(jù)； 點擊“ 點擊“start”開始數(shù)據(jù)采集數(shù)據(jù)采集開始批量或單次采集自定義采集結(jié)束后的系統(tǒng)設(shè)置使用批量采集可更靈活、 使用批量采集可更靈活、方便的添加或刪除樣品采集結(jié)束后的系統(tǒng)設(shè)置自動關(guān)閉泵自動關(guān)閉檢測器切換質(zhì)譜到待機狀態(tài)液質(zhì)聯(lián)用小常識1. 通訊問題有時會在液質(zhì)聯(lián)用中出現(xiàn)，一般通過重啟軟件或電腦解決； 2. 自動進樣

9、未完成時，容易出現(xiàn)通訊問題，建議不要做任何動作； 3. 建議打開hystar 前，關(guān)閉單獨運行的micrOTOFcontrol； 4. 液質(zhì)聯(lián)用，流速不要大于0.4mL/min（分流或用細(xì)內(nèi)徑的柱子i.d. <=2.1mm）； 5. 流動相中盡量避免緩沖鹽和表面活性劑； 6. 平衡柱子和沖洗柱子時，不要連質(zhì)譜； 7. 注意液相系統(tǒng)的日常維護。Divert ValveHPLCSyringe pumpBruker Daltonics micrOTOF Series Training R Veluri 08/14/06 V1.0Enabling Life Science Tools Based

10、 on Mass SpectrometryTMDivert Valve 校正模式（ 校正模式（含定量環(huán)） 含定量環(huán)）Sample flow through the divert valve with loop:Divert valve in waste position: · HPLC to nebulizer. · syringe pump via loop to waste -loop is filled with calibrant.From Syringe Pump To WasteDivert valve in source position: · HP

11、LC via loop to nebulizer - calibrant from loop is From injected to source. Syringe Pump To · Syringe pump to waste.Waste Loop To Source From HPLC ColumnLoop To Source From HPLC ColumnConclusion: · · · · constant flow, independent from valve position. loop must be filled duri

12、ng runtime of the LC analysis. filling time of loop should be optimized with flow rate of syringe. calibration is done in post processing software (not in micrOTOFcontrol).Bruker Daltonics micrOTOF Series Training R Veluri 08/14/06 V1.0Enabling Life Science Tools Based on Mass SpectrometryTMDivert V

13、alve 廢液模式（ 廢液模式（不含定量環(huán)） 不含定量環(huán)）Divert valve in source position: ? green (HPLC) to yellow (nebulizer). ? blue (calibrant) via loop to gray (waste). Divert valve in waste position: ? green (HPLC) is connected to grey (waste) -> HPLC flow is not connected to source (this is useful for flushing HPLC or

14、 column. ? blue (calibrant) is connected to yellow (nebulizer).Conclusion: ? no constant flow, flow rate is dependent on valve position (HPLC flow <-> syringe flow). ? calibration can be done in micrOTOFcontrol software or in post processing software. ? valve can be used for switching HPLC flo

15、w directly to waste. ? syringe pump can be used for infusions.Bruker Daltonics micrOTOF Series Training R Veluri 08/14/06 V1.0 Enabling Life Science Tools Based on Mass SpectrometryTM多級質(zhì)譜： 多級質(zhì)譜：Auto MS/MS 適用于定性MS/MS頁面下又細(xì)分 為四個分頁面Auto MS/MS頁面可定義自動二級質(zhì)譜相關(guān)的數(shù)據(jù)采集策略； 頁面可定義自動二級質(zhì)譜相關(guān)的數(shù)據(jù)采集策略； Smart Exclusion 會自動排除強度不變的背景； 會自動排除強度不變的背景； 動態(tài)排除是增加數(shù)據(jù)量； 動態(tài)排除是增加數(shù)據(jù)量； 根據(jù)實際背景離子添加相應(yīng)的排除離子； 根據(jù)實際背景離子添加相應(yīng)的排除離子； 根據(jù)實際背景（ 根據(jù)實際背景（基線） 基線）確定絕對信號強度的閾值。 確定絕對信號強度的閾值。方法編輯區(qū)- MS/MS頁面：