第1章天然藥物化學(xué)

1、天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)第一章第一章 總總 論論主講：陳欲云主講：陳欲云E-mailE-mail： 天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分2 第一章第一章 總總 論論n第一節(jié)第一節(jié) 緒論緒論n第二節(jié)第二節(jié) 生物合成生物合成n第三節(jié)第三節(jié) 提取分離的方法提取分離的方法n第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n抗腫瘤藥物抗腫瘤藥物天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n抗菌藥物抗菌藥物天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n選用人民衛(wèi)生出版社，吳立軍主選用人民衛(wèi)生出版社，吳立軍主編，第六版教材編，第六版教材n45學(xué)時(shí)學(xué)時(shí)n考試課考試課n包括十一章內(nèi)容，其

2、中第十一章包括十一章內(nèi)容，其中第十一章自學(xué)自學(xué)n考核方式：平時(shí)成績(jī)考核方式：平時(shí)成績(jī)40%+60%卷面成績(jī)卷面成績(jī)n平時(shí)成績(jī)：出勤平時(shí)成績(jī)：出勤+文獻(xiàn)匯報(bào)文獻(xiàn)匯報(bào)50%+作業(yè)作業(yè)50%天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)第一章第一章 總總 論論n1.掌握掌握：天然藥物常用的：天然藥物常用的提取方法和分離方法提取方法和分離方法；各類；各類吸附吸附劑劑的特點(diǎn)及分離化合物的基本原理及其影響因素；的特點(diǎn)及分離化合物的基本原理及其影響因素；1H-NMR、13C-NMR譜特征及其解析方法。譜特征及其解析方法。n2.熟悉熟悉：天然藥物化學(xué)研究范圍和課程的學(xué)習(xí)重點(diǎn)；各類：天然藥物化學(xué)研究范圍和課程的學(xué)習(xí)重點(diǎn)；各類化合物的

3、化合物的生物合成途徑生物合成途徑。n3.了解：了解：常見二維核磁共振譜的分類及應(yīng)用；常見二維核磁共振譜的分類及應(yīng)用；ORD譜的應(yīng)譜的應(yīng)用范圍和八區(qū)律的使用方法；天然藥物化學(xué)的發(fā)展簡(jiǎn)史及用范圍和八區(qū)律的使用方法；天然藥物化學(xué)的發(fā)展簡(jiǎn)史及其最新研究進(jìn)展。其最新研究進(jìn)展。天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分7 第一章第一章 總總 論論n第一節(jié)第一節(jié) 緒論緒論n第二節(jié)第二節(jié) 生物合成生物合成n第三節(jié)第三節(jié) 提取分離的方法提取分離的方法n第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分8 第一節(jié)第一節(jié) 緒緒 論論 天然藥物化學(xué)是藥物化

4、學(xué)的一個(gè)分支學(xué)天然藥物化學(xué)是藥物化學(xué)的一個(gè)分支學(xué)科。它主要用現(xiàn)代科學(xué)理論和技術(shù)方法研究天科。它主要用現(xiàn)代科學(xué)理論和技術(shù)方法研究天然藥物中化學(xué)成分的一門學(xué)科；具體內(nèi)容包括然藥物中化學(xué)成分的一門學(xué)科；具體內(nèi)容包括主要類型的天然藥物的化學(xué)成分的主要類型的天然藥物的化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、物理化學(xué)性質(zhì)、物理化學(xué)性質(zhì)、提取分離方法提取分離方法、結(jié)構(gòu)測(cè)定等結(jié)構(gòu)測(cè)定等。 天然藥物來源天然藥物來源: 植物（為主）、動(dòng)物、礦植物（為主）、動(dòng)物、礦物、微生物等天然藥物中的活性成分是其藥效物、微生物等天然藥物中的活性成分是其藥效的物資基礎(chǔ)。的物資基礎(chǔ)。一、定義一、定義天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日

5、13時(shí)09分9l-ephedrine 左旋麻黃素平喘、解痙CCHNHCH3HCH3HO（麻黃 Ephedra spp.中 第一節(jié)第一節(jié) 緒緒 論論天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)OOHOOHrutinoseOHOHRutin 蘆丁降低血管脆性、防高血壓和動(dòng)脈硬化的治療輔助藥（槐花米 Sophora japonica 的花蕾中 第一節(jié)第一節(jié) 緒緒 論論天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)曲克蘆?。呵颂J?。?，47-三三0-(2-羥乙基羥乙基)-5羥羥基黃酮基黃酮-3-蕓香苷蕓香苷 第一節(jié)第一節(jié) 緒緒 論論天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分12n1769年，舍勒年，舍勒 酒石酒石 鈣鹽鈣鹽 酒

6、石酸酒石酸 苯甲酸（苯甲酸（1775）、乳酸（）、乳酸（1780）、）、 蘋果酸（蘋果酸（1785）、沒食子酸（）、沒食子酸（1786）n1575年，年，醫(yī)學(xué)入門醫(yī)學(xué)入門記載，用發(fā)記載，用發(fā)酵法從五倍子中得到?jīng)]食子酸的過酵法從五倍子中得到?jīng)]食子酸的過程。程。 第一節(jié)第一節(jié) 緒緒 論論二、天然藥物化學(xué)的簡(jiǎn)要發(fā)展歷程二、天然藥物化學(xué)的簡(jiǎn)要發(fā)展歷程天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分13n天然藥物化學(xué)的發(fā)展離不開現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步天然藥物化學(xué)的發(fā)展離不開現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步1804年年-1806年發(fā)現(xiàn)嗎啡，年發(fā)現(xiàn)嗎啡，1925年提出正確結(jié)構(gòu)，年提出正確結(jié)構(gòu)，1952年人工合成，耗時(shí)

7、年人工合成，耗時(shí)150年年 第一節(jié)第一節(jié) 緒緒 論論天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分14 近近3030多年的科學(xué)技術(shù)進(jìn)步，特別是將波譜解析方法多年的科學(xué)技術(shù)進(jìn)步，特別是將波譜解析方法（NMR、MS、IR、UV）用于推導(dǎo)化合物的結(jié)構(gòu)，甚至用用于推導(dǎo)化合物的結(jié)構(gòu)，甚至用X X晶體衍射來確晶體衍射來確定化合物結(jié)構(gòu)的發(fā)展，以及分離手段的進(jìn)步，天然藥化的發(fā)展速定化合物結(jié)構(gòu)的發(fā)展，以及分離手段的進(jìn)步，天然藥化的發(fā)展速度大為加快，發(fā)現(xiàn)的新化合物數(shù)目大為增加，微量成分、水溶性度大為加快，發(fā)現(xiàn)的新化合物數(shù)目大為增加，微量成分、水溶性成分的分離、提純；穩(wěn)定性差的活性物資的分離等也不再是難題

8、成分的分離、提純；穩(wěn)定性差的活性物資的分離等也不再是難題了。了。 天然藥物化學(xué)本身也已不再是原先的分離提取、結(jié)構(gòu)鑒定，天然藥物化學(xué)本身也已不再是原先的分離提取、結(jié)構(gòu)鑒定，而是逐步發(fā)展成生測(cè)指導(dǎo)下的分離提取、結(jié)構(gòu)鑒定，及半合成修而是逐步發(fā)展成生測(cè)指導(dǎo)下的分離提取、結(jié)構(gòu)鑒定，及半合成修飾和全合成緊密結(jié)合的一門學(xué)科飾和全合成緊密結(jié)合的一門學(xué)科。 第一節(jié)第一節(jié) 緒緒 論論天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分15 第三章第三章 提取分離方法提取分離方法n1)提取前文獻(xiàn)查閱綜述和藥材生藥鑒定提取前文獻(xiàn)查閱綜述和藥材生藥鑒定n2)提取方法提取方法 粉碎成粗粉粉碎成粗粉 有機(jī)溶劑法和水提法

9、有機(jī)溶劑法和水提法 原理：根據(jù)原理：根據(jù)“相似相溶相似相溶”原理，選擇適當(dāng)溶劑原理，選擇適當(dāng)溶劑 根據(jù)溶劑法分類：根據(jù)溶劑法分類： a.浸漬法（常溫或低溫）浸漬法（常溫或低溫） b.滲漉法滲漉法 c.煎煮法煎煮法 d.回流提取法回流提取法 e.連續(xù)回流提取法連續(xù)回流提取法 f.超臨界流體萃取技術(shù)超臨界流體萃取技術(shù) g.超聲波提取技術(shù)超聲波提取技術(shù)天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分16第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法索氏提取器索氏提取器天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分17第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法n超臨界流體萃取技術(shù)超臨界流體萃取技

10、術(shù) 原理：原理：超臨界流體超臨界流體對(duì)脂肪酸、植物堿、醚類、酮類、甘油酯等具有特對(duì)脂肪酸、植物堿、醚類、酮類、甘油酯等具有特殊溶解作用，利用殊溶解作用，利用 壓力壓力和和溫度溫度對(duì)超臨界流體溶解能力的影響而進(jìn)行對(duì)超臨界流體溶解能力的影響而進(jìn)行的。在的。在超臨界狀態(tài)超臨界狀態(tài)下，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)接觸，使其有選下，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)接觸，使其有選擇性地把擇性地把極性極性大小、大小、沸點(diǎn)沸點(diǎn)高低和高低和分子量分子量大小的成分依次萃取出來。大小的成分依次萃取出來。 超臨界流體超臨界流體是指當(dāng)一種物質(zhì)處于臨界溫度和臨界壓力以上的狀態(tài)下，是指當(dāng)一種物質(zhì)處于臨界溫度和臨界壓力以上的狀態(tài)下，

11、形成既非液體又非氣體的單一狀態(tài)，稱為形成既非液體又非氣體的單一狀態(tài)，稱為“SF”。此時(shí)其流體密度近。此時(shí)其流體密度近似液體、黏度近似氣體，其擴(kuò)散力比液體大增，介電常數(shù)也隨壓力增似液體、黏度近似氣體，其擴(kuò)散力比液體大增，介電常數(shù)也隨壓力增加而增加。其浸透性優(yōu)于液體，因而比液體有更佳的溶解力，有利于加而增加。其浸透性優(yōu)于液體，因而比液體有更佳的溶解力，有利于溶質(zhì)的萃取，特別是性質(zhì)不穩(wěn)定、易熱分解的物質(zhì)的提取。溶質(zhì)的萃取，特別是性質(zhì)不穩(wěn)定、易熱分解的物質(zhì)的提取。天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分18第三節(jié)提取分離方法第三節(jié)提取分離方法 常見的常見的SF：有二氧化碳、一氧化亞氮、

12、六氟化硫、乙烷、庚烷、氨、有二氧化碳、一氧化亞氮、六氟化硫、乙烷、庚烷、氨、二氯二氟甲烷等。其中二氯二氟甲烷等。其中最常用的為二氧化碳最常用的為二氧化碳。 二氧化碳的特點(diǎn)：二氧化碳的特點(diǎn)：臨界溫度接近室溫（臨界溫度接近室溫（Tc=31.3），臨界壓力也較），臨界壓力也較低（低（Pc=7.37Mpa），無(wú)色、無(wú)毒、無(wú)味，不易燃，化學(xué)惰性，廉價(jià)，），無(wú)色、無(wú)毒、無(wú)味，不易燃，化學(xué)惰性，廉價(jià)，易制成高純度氣體。故在易制成高純度氣體。故在SFE中最常用。中最常用。 二氧化碳二氧化碳-超臨界流體的溶解能力規(guī)律：超臨界流體的溶解能力規(guī)律： 在超臨界狀態(tài)下，在超臨界狀態(tài)下，CO2對(duì)不同溶質(zhì)的溶解能力差別很大

13、。其取決對(duì)不同溶質(zhì)的溶解能力差別很大。其取決于溶質(zhì)的極性、沸點(diǎn)、分子量。于溶質(zhì)的極性、沸點(diǎn)、分子量。 (1)對(duì)親脂性、低沸點(diǎn)成分溶解能力強(qiáng)，如揮發(fā)油、烴類、醚類、酯對(duì)親脂性、低沸點(diǎn)成分溶解能力強(qiáng)，如揮發(fā)油、烴類、醚類、酯類等。類等。 (2)成分極性基團(tuán)（如成分極性基團(tuán)（如OH、COOH）越多，越難提取。如糖類、氨基）越多，越難提取。如糖類、氨基酸的萃取壓力要酸的萃取壓力要4104Pa以上。以上。 (3)成分分子量越大，越難提取。成分分子量越大，越難提取。天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分19超聲波逆流提取機(jī)組超聲波逆流提取機(jī)組 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥

14、物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分20第三節(jié)提取分離方法第三節(jié)提取分離方法 水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法n適用于具有揮發(fā)性、能隨水蒸汽蒸餾而不適用于具有揮發(fā)性、能隨水蒸汽蒸餾而不被破壞、難溶或不溶于水的成分的提取，被破壞、難溶或不溶于水的成分的提取，如揮發(fā)油、小分子的香豆素類小分子的醌如揮發(fā)油、小分子的香豆素類小分子的醌類成分。類成分。 升華法升華法n固體物質(zhì)受熱不經(jīng)過熔融，直接汽化，遇固體物質(zhì)受熱不經(jīng)過熔融，直接汽化，遇冷后又凝固為固體化合物，稱為冷后又凝固為固體化合物，稱為升華升華。中。中草藥中有一些成分具有升華的性質(zhì)，可以草藥中有一些成分具有升華的性質(zhì)，可以利用升華法直接自中

15、草藥中提取出來。如利用升華法直接自中草藥中提取出來。如樟腦、咖啡因。樟腦、咖啡因。天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n3)分離純化法分離純化法 根據(jù)物質(zhì)溶解度的不同進(jìn)行分離根據(jù)物質(zhì)溶解度的不同進(jìn)行分離 1)溫度不同溫度不同,溶解度不同（結(jié)晶、重結(jié)晶）溶解度不同（結(jié)晶、重結(jié)晶）原理原理: : 一個(gè)固體成分達(dá)到一定純度，在某種條件下就會(huì)有結(jié)晶析出。一個(gè)固體成分達(dá)到一定純度，在某種條件下就會(huì)有結(jié)晶析出。溶劑的選擇：對(duì)所需成分加熱時(shí)溶解度大，遇冷時(shí)溶解度小；而雜質(zhì)冷溶劑的選擇：對(duì)所需成分加熱時(shí)溶解度大，遇冷時(shí)溶解度??；而雜質(zhì)冷熱均不溶或均溶于該溶劑。熱均不溶或均溶于該溶劑。 2022年3月15日13時(shí)09分21

16、 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2)改變?nèi)芤旱臉O性去雜改變?nèi)芤旱臉O性去雜na.通過加入另一種溶劑以改變?nèi)軇┑臉O性，使一部分物質(zhì)沉淀析出，通過加入另一種溶劑以改變?nèi)軇┑臉O性，使一部分物質(zhì)沉淀析出，從而實(shí)現(xiàn)分離。如：水提醇沉法從而實(shí)現(xiàn)分離。如：水提醇沉法水水/醇法：醇法：除去糖類，蛋白質(zhì)等水溶性雜質(zhì)。除去糖類，蛋白質(zhì)等水溶性雜質(zhì)。醇醇/水法：水法：除去樹脂，葉綠素等水不溶性雜質(zhì)。除去樹脂，葉綠素等水不溶性雜質(zhì)。醇醇/醚法和醇醚法和醇/丙酮法：丙酮法：可使皂苷成分沉淀析出，而脂溶性的樹脂等類雜可使皂苷成分沉淀析出，而脂溶性的樹脂等類雜 質(zhì)則留在母液中質(zhì)則留在母液中3)

17、酸堿法（生物堿酸提堿沉淀，黃酮堿提酸沉淀）酸堿法（生物堿酸提堿沉淀，黃酮堿提酸沉淀）nb.酸性、堿性或兩性化合物，通過加入酸或堿來調(diào)節(jié)溶劑的酸性、堿性或兩性化合物，通過加入酸或堿來調(diào)節(jié)溶劑的pH值，改值，改變分子的存在狀態(tài)（游離型或離解型），從而改變?nèi)芙舛榷鴮?shí)現(xiàn)分離變分子的存在狀態(tài)（游離型或離解型），從而改變?nèi)芙舛榷鴮?shí)現(xiàn)分離出，而脂溶性的樹脂等類雜質(zhì)則留在母液中出，而脂溶性的樹脂等類雜質(zhì)則留在母液中。2022年3月15日13時(shí)09分22 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)4)沉淀法沉淀法n酸性或堿性化合物通過加入某種酸性或堿性化合物通過加入某種沉淀試劑沉淀試劑使之生

18、成水不溶性的鹽類等使之生成水不溶性的鹽類等 沉淀析出而實(shí)現(xiàn)分離。如生物堿加入有機(jī)酸可生成不溶于水的有機(jī)酸沉淀析出而實(shí)現(xiàn)分離。如生物堿加入有機(jī)酸可生成不溶于水的有機(jī)酸 鹽沉淀，酸性化合物可加入鈣鹽、鉛鹽、鋇鹽等生成不溶性的沉淀。鹽沉淀，酸性化合物可加入鈣鹽、鉛鹽、鋇鹽等生成不溶性的沉淀。酸性：酸性：鉛鹽（醋酸鉛）、鈣鹽、鋇鹽。鉛鹽（醋酸鉛）、鈣鹽、鋇鹽。堿性：堿性：苦味酸鹽、苦酮酸鹽、磷鉬酸鹽、雷氏鹽等苦味酸鹽、苦酮酸鹽、磷鉬酸鹽、雷氏鹽等2022年3月15日13時(shí)09分23 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分24第三節(jié)提取分離方法第三

19、節(jié)提取分離方法 根據(jù)物質(zhì)分配比不同極性分離根據(jù)物質(zhì)分配比不同極性分離 a.液液-液萃取法液萃取法 原理：原理：利用混合物中各單體組分在兩相溶劑中的分配系數(shù)（利用混合物中各單體組分在兩相溶劑中的分配系數(shù)（K）不同而達(dá)到分）不同而達(dá)到分離的方法。離的方法。 溶劑分配法的兩相往往是互相飽和的水相與有機(jī)相?；旌衔镏懈鞒煞衷趦上嘀腥軇┓峙浞ǖ膬上嗤腔ハ囡柡偷乃嗯c有機(jī)相?；旌衔镏懈鞒煞衷趦上嘀蟹峙湎禂?shù)相差越大，則分離效果越高。分配系數(shù)相差越大，則分離效果越高。n1.分配系數(shù)分配系數(shù) K值值:一種溶質(zhì)在兩相溶劑中的分配比。一種溶質(zhì)在兩相溶劑中的分配比。K值在一定的溫度和壓力值在一定的溫度和壓力下為一常

20、數(shù)。下為一常數(shù)。 K=CU/CL天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分25 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n3.分配比與分配比與pH：溶劑系統(tǒng)溶劑系統(tǒng)pH的變化影響酸性、堿性、及的變化影響酸性、堿性、及兩性有機(jī)化合物的存在狀態(tài)（游離型或離解型），從而影兩性有機(jī)化合物的存在狀態(tài)（游離型或離解型），從而影響在溶劑系統(tǒng)中的分配比。響在溶劑系統(tǒng)中的分配比。2022年3月15日13時(shí)09分26游離型極性小的溶劑離解型極性大的溶劑 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分27一般pH12，則酸性物質(zhì)呈離

21、解狀態(tài)（A）、堿性物質(zhì)以非離解狀態(tài)（B）存在。 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)方法：方法： 1）簡(jiǎn)單萃取法：儀器，實(shí)驗(yàn)室用分液漏斗或下口瓶。一）簡(jiǎn)單萃取法：儀器，實(shí)驗(yàn)室用分液漏斗或下口瓶。一般在水和親脂性有機(jī)溶劑中進(jìn)行，根據(jù)情況，也可用酸水般在水和親脂性有機(jī)溶劑中進(jìn)行，根據(jù)情況，也可用酸水或堿水。天然藥物中成分比較復(fù)雜，一般一次萃取分離不或堿水。天然藥物中成分比較復(fù)雜，一般一次萃取分離不出來純品，需要再配合其他方法。出來純品，需要再配合其他方法。 由于成分的復(fù)雜性及相互作用，萃取中易發(fā)生乳化。破由于成分的復(fù)雜性及相互作用，萃取中易發(fā)生乳化。破壞乳化的方法有：（壞

22、乳化的方法有：（1）加熱敷；（）加熱敷；（2）將乳化層抽濾；）將乳化層抽濾；（3）長(zhǎng)時(shí)間放置（）長(zhǎng)時(shí)間放置（24小時(shí)以上）。小時(shí)以上）。2022年3月15日13時(shí)09分28 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分29第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法 2）pH度萃取法：是分離酸性或堿性成分的常用方法。以度萃取法：是分離酸性或堿性成分的常用方法。以pH成梯度的酸成梯度的酸水溶液依次萃取以親脂性有機(jī)溶劑溶解的堿性成梯度的混合生物堿，或水溶液依次萃取以親脂性有機(jī)溶劑溶解的堿性成梯度的混合生物堿，或者以者以 pH成梯度的堿水溶液依次萃取以親脂

23、性有機(jī)溶劑溶解的酸性成梯度成梯度的堿水溶液依次萃取以親脂性有機(jī)溶劑溶解的酸性成梯度的混合酚、酸類成分，使后者分離的方法。的混合酚、酸類成分，使后者分離的方法。 天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分30 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)3） 連續(xù)萃取法：采用連續(xù)萃取器萃取。利用兩溶液比重不連續(xù)萃取法：采用連續(xù)萃取器萃取。利用兩溶液比重不同自然分層和同自然分層和 分散相液滴穿過連續(xù)相溶劑時(shí)發(fā)生傳質(zhì)。分散相液滴穿過連續(xù)相溶劑時(shí)發(fā)生傳質(zhì)。此法可克服用分液漏斗多次萃取此法可克服用分液漏斗多次萃取 操作的麻煩。操作的麻煩。2022年3月15日13時(shí)09分3

24、1 流動(dòng)相溶劑流動(dòng)相溶劑(比重大比重大)固定相溶劑固定相溶劑（比重?。ū戎匦。〤CD 法的分離過程示意圖 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n4）液滴逆流分配法（）液滴逆流分配法（DCCC法）：是利用流動(dòng)相形成液法）：是利用流動(dòng)相形成液滴，通過作為固定滴，通過作為固定 相的液柱而達(dá)到分離純化的目的。相的液柱而達(dá)到分離純化的目的。2022年3月15日13時(shí)09分32該裝置儀器不易破損，分配用的兩相溶劑不該裝置儀器不易破損，分配用的兩相溶劑不必振蕩，故不易乳化和產(chǎn)生泡沫，特別適用于必振蕩，故不易乳化和產(chǎn)生泡沫，特別適用于皂苷類的分離。皂苷類的分離。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：DCCC

25、DCCC及及HSCCCHSCCC均可克服因固體載體引起的不可均可克服因固體載體引起的不可逆吸附消耗，樣品變性污染及色譜峰畸形拖尾等逆吸附消耗，樣品變性污染及色譜峰畸形拖尾等弊病，樣品還可以定量回收；弊病，樣品還可以定量回收； 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分33 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分34第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法 b.反流分布法反流分布法 c.液滴逆流色譜法液滴逆流色譜法 d.高速逆流色譜法高速逆流色譜法 e.GC法法 f.LC法法:LC分配層析載

26、體主要有分配層析載體主要有-硅膠硅膠,硅藻土硅藻土,纖維素等纖維素等;有正反相之分有正反相之分;壓力有低、中、高之分壓力有低、中、高之分;載量有分析、制備之分。載量有分析、制備之分。天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分35第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法n根據(jù)物質(zhì)吸附性不同極性分離根據(jù)物質(zhì)吸附性不同極性分離 a.吸附柱色譜吸附柱色譜 極性吸附劑極性吸附劑（如（如SiO2,Al2O3.)極性強(qiáng)，吸附力大極性強(qiáng)，吸附力大 非極性吸附劑非極性吸附劑 (如如活性炭活性炭 對(duì)非極性化合物的吸附力強(qiáng)對(duì)非極性化合物的吸附力強(qiáng)( (洗脫時(shí)洗洗脫時(shí)洗脫力隨洗脫劑的極性降低而增大脫力隨洗

27、脫劑的極性降低而增大) )。 化合物的極性大小依化合物的官能團(tuán)的極性大小而定化合物的極性大小依化合物的官能團(tuán)的極性大小而定; ; 溶劑的極性大小可按其介電常數(shù)溶劑的極性大小可按其介電常數(shù)( )大小排列（大小排列（ 極性漸大極性漸大 ） : 己烷己烷 苯苯 無(wú)水乙醚無(wú)水乙醚 CHCl3 AcOEt 乙乙 甲醇甲醇 水水 1.88 2.29 4.47 5.20 6.11 26.0 31.2 81.0天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分36化合物化合物極性及其強(qiáng)弱判斷極性及其強(qiáng)弱判斷極性是表示分子中電荷不對(duì)稱的程度。極性是表示分子中電荷不對(duì)稱的程度。官能團(tuán)極性強(qiáng)弱判斷官能團(tuán)極性強(qiáng)

28、弱判斷RCOOHArOHROHRRNH2, RNHR, RNR”RRCONR”RCHORCORRCOORRORRXRH大小 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分37 化合物的極性則由分子中所含官能團(tuán)的種類、數(shù)化合物的極性則由分子中所含官能團(tuán)的種類、數(shù)目及排列方式所決定。目及排列方式所決定。4 2 3 1 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n吸附吸附柱色譜法柱色譜法的應(yīng)用的應(yīng)用n成分的濃縮與精制：成分的濃縮與精制：活性炭脫色：活性炭脫色： 除去除去脂溶性脂溶性色素色素從大量稀從大量稀水溶液水溶液中濃縮微量成分：

29、活性炭分離一葉中濃縮微量成分：活性炭分離一葉萩萩堿堿n成分的分離：實(shí)際工作應(yīng)用最多。成分的分離：實(shí)際工作應(yīng)用最多。薄層色譜法（薄層色譜法（Thin Layer Chromatography,TLC)柱色譜法（柱色譜法（Column Chromatography,CC)2022年3月15日13時(shí)09分38 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n薄層色譜法薄層色譜法:用途：摸索柱色譜色譜的分離條件用途：摸索柱色譜色譜的分離條件鑒定化合物的純度鑒定化合物的純度混合物的分離混合物的分離n原理：原理：2022年3月15日13時(shí)09分39 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天

30、然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n基本操作：基本操作：薄層板的制備薄層板的制備點(diǎn)樣點(diǎn)樣展開展開顯色：顯色：UV燈下觀察；顯色劑顯色燈下觀察；顯色劑顯色計(jì)算計(jì)算Rf值值2022年3月15日13時(shí)09分40 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n注意：注意： RfRf值是化合物的一種物理常數(shù)，即在值是化合物的一種物理常數(shù)，即在 特定的色譜條件下，同一化合物應(yīng)具有同特定的色譜條件下，同一化合物應(yīng)具有同RfRf值。值。n影響影響RfRf值的主要因素：值的主要因素： 展開劑展開劑 化合物結(jié)構(gòu)化合物結(jié)構(gòu) 吸附劑吸附劑2022年3月15日13時(shí)09分41 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方

31、法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)n柱色譜法：柱色譜法：硅膠、氧化鋁柱色譜應(yīng)注意的問題：硅膠、氧化鋁柱色譜應(yīng)注意的問題：吸附劑的用量一般為試樣量的吸附劑的用量一般為試樣量的30-6030-60倍（特殊可達(dá)倍（特殊可達(dá)100-200100-200倍倍），色譜柱的徑），色譜柱的徑/ /高比為（高比為（1:15-1:201:15-1:20）裝柱：干法裝柱、濕法裝柱（極性小的溶劑）裝柱：干法裝柱、濕法裝柱（極性小的溶劑）上樣：干法上樣、濕法上樣（極性小的溶劑）上樣：干法上樣、濕法上樣（極性小的溶劑）2022年3月15日13時(shí)09分42 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)洗脫劑的極性

32、增加：梯度洗脫洗脫劑的極性增加：梯度洗脫常用溶劑系統(tǒng)：常用溶劑系統(tǒng)：石油醚丙酮、石油醚乙酸乙酯、氯仿甲醇石油醚丙酮、石油醚乙酸乙酯、氯仿甲醇避免發(fā)生化學(xué)吸附：合理選用吸附劑及洗脫劑避免發(fā)生化學(xué)吸附：合理選用吸附劑及洗脫劑可以利用可以利用TLCTLC來選擇柱色譜的色譜系統(tǒng)：來選擇柱色譜的色譜系統(tǒng)：Rf:0.2-0.3Rf:0.2-0.32022年3月15日13時(shí)09分43 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分44第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法 b.氫鍵力吸附氫鍵力吸附聚酰胺吸附層析聚酰胺吸附層析-洗脫劑的洗脫力由小到大為洗脫劑的洗

33、脫力由小到大為: 水水 甲醇甲醇 丙酮丙酮 NaOH液液 甲酰胺甲酰胺 尿素水液尿素水液特別適合分離酚類、醌類、黃酮類化合物特別適合分離酚類、醌類、黃酮類化合物聚酰胺的性質(zhì)：聚酰胺的性質(zhì)：高分子聚合物，不溶于水和常用有機(jī)溶劑，對(duì)堿較穩(wěn)定高分子聚合物，不溶于水和常用有機(jī)溶劑，對(duì)堿較穩(wěn)定對(duì)酸不穩(wěn)定。對(duì)酸不穩(wěn)定。吸附原理吸附原理: :酰胺酰胺羰基羰基與酚類、黃酮類的與酚類、黃酮類的酚羥基酚羥基，或酰胺鍵上游離，或酰胺鍵上游離胺基胺基與與醌類、脂肪羧酸上的醌類、脂肪羧酸上的羰基羰基形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附。形成氫鍵締合而產(chǎn)生吸附。含水溶劑中的洗脫規(guī)律：含水溶劑中的洗脫規(guī)律： 形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目越多，則吸

34、附能力越強(qiáng)形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目越多，則吸附能力越強(qiáng), Rf值越小值越小。天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué) 成鍵位置對(duì)吸附力影響成鍵位置對(duì)吸附力影響:易形成分子內(nèi)氫鍵，吸附減小易形成分子內(nèi)氫鍵，吸附減小, Rf 值增大值增大。2022年3月15日13時(shí)09分45 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分46分子內(nèi)芳香化程度高，吸附作用增強(qiáng)，分子內(nèi)芳香化程度高，吸附作用增強(qiáng)， Rf值減小值減小。 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué) 苷元相同時(shí)，苷元相同時(shí)，Rf值：三糖苷值：三糖苷二糖苷二糖苷糖苷糖苷苷元苷元2022年3月15日

35、13時(shí)09分47 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)聚酰胺色譜的應(yīng)用：聚酰胺色譜的應(yīng)用：應(yīng)用范圍：應(yīng)用范圍：黃酮類、酚類、蒽醌類的分離，也可用于生物黃酮類、酚類、蒽醌類的分離，也可用于生物堿、萜類、甾體、糖類、氨基酸、蛋白質(zhì)的分離。但對(duì)鞣質(zhì)堿、萜類、甾體、糖類、氨基酸、蛋白質(zhì)的分離。但對(duì)鞣質(zhì)的吸附特強(qiáng)，近乎不可逆，常用于在提取物中脫去鞣質(zhì)。的吸附特強(qiáng)，近乎不可逆，常用于在提取物中脫去鞣質(zhì)。溶劑系統(tǒng)：溶劑系統(tǒng)：含水溶劑系統(tǒng)：含水溶劑系統(tǒng)：各種苷類、糖類、有機(jī)酸等水溶各種苷類、糖類、有機(jī)酸等水溶性成分的分離，及黃酮苷、苷元的分離。性成分的分離，及黃酮苷、苷元的分離。非極

36、性溶液系統(tǒng)：非極性溶液系統(tǒng)：萜類、甾體、黃酮苷元、酚類、醌類等極萜類、甾體、黃酮苷元、酚類、醌類等極較弱成分的分離。較弱成分的分離。常用溶劑系統(tǒng)：常用溶劑系統(tǒng)：甲醇水、乙醇水、丙酮水、甲醇水、乙醇水、丙酮水、NaOHNaOH溶液溶液2022年3月15日13時(shí)09分48 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)例：用聚酰胺進(jìn)行例：用聚酰胺進(jìn)行TLC,MeOH-H2OTLC,MeOH-H2O為洗脫劑，試比較下列化合為洗脫劑，試比較下列化合物的物的RfRf 。2022年3月15日13時(shí)09分49321321 4 4 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)

37、n根據(jù)物質(zhì)分子的大小進(jìn)行分離根據(jù)物質(zhì)分子的大小進(jìn)行分離如葡萄糖凝膠如葡萄糖凝膠(Sephadex G and LH-20.）n根據(jù)物質(zhì)解離程度不同的分離法根據(jù)物質(zhì)解離程度不同的分離法離子交換法：離子交換法：強(qiáng)酸：強(qiáng)酸： -SO3H強(qiáng)堿強(qiáng)堿： -N+(CH3)3Cl-弱酸：弱酸： -CO2H弱堿弱堿： -NH2(NH,N)2022年3月15日13時(shí)09分50 第三節(jié)第三節(jié) 提取分離方法提取分離方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分51 第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法n化合物的純度測(cè)定化合物的純度測(cè)定n結(jié)構(gòu)研究的主要程序結(jié)構(gòu)研究的主要程序n結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法

38、結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分52第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法n化合物的純度測(cè)定化合物的純度測(cè)定 方法：方法：檢查有無(wú)均勻一致的晶形，有無(wú)明確、檢查有無(wú)均勻一致的晶形，有無(wú)明確、敏銳的熔點(diǎn)（熔距一般為敏銳的熔點(diǎn)（熔距一般為12）及色譜法。）及色譜法。其中色譜法包括：其中色譜法包括：TLC、PC、GC、HPLC。天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分53第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法n結(jié)構(gòu)研究的主要程序結(jié)構(gòu)研究的主要程序 1.初步推斷化合物類型初步推斷化合物類型 2.測(cè)定分子式，計(jì)算不飽和度。測(cè)定分子式

39、，計(jì)算不飽和度。 3.確定分子式中含有的官能團(tuán)，或結(jié)構(gòu)片段，或基本骨架。確定分子式中含有的官能團(tuán)，或結(jié)構(gòu)片段，或基本骨架。 4.推斷并確定分子的平面結(jié)構(gòu)推斷并確定分子的平面結(jié)構(gòu) 5.推斷并確定分子的主體結(jié)構(gòu)（構(gòu)型、構(gòu)象）推斷并確定分子的主體結(jié)構(gòu)（構(gòu)型、構(gòu)象）天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分54第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法n結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法結(jié)構(gòu)研究中采用的主要方法1.確定分子式，計(jì)算不飽和度確定分子式，計(jì)算不飽和度a.元素定量分析配合分子量測(cè)定元素定量分析配合分子量測(cè)定 元素定性分析元素定性分析，如鈉融法，分析化合物中含有，如鈉融法，分析化合物中含有

40、幾種元素。幾種元素。 元素定量分析元素定量分析確定各元素百分含量，根據(jù)倍確定各元素百分含量，根據(jù)倍比定律確定分子中的原子比比定律確定分子中的原子比 分子量測(cè)定分子量測(cè)定：冰點(diǎn)下降法、沸點(diǎn)上升法、粘度：冰點(diǎn)下降法、沸點(diǎn)上升法、粘度法、凝膠濾過法及法、凝膠濾過法及質(zhì)譜法質(zhì)譜法。天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分55第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法b.同位素豐度比法同位素豐度比法c.高分辨質(zhì)譜（高分辨質(zhì)譜（HR-MS）法）法 HR-MS還可以給出化合物的精確分子量。還可以給出化合物的精確分子量。 從氫核磁共振波譜和碳核磁共振波譜中可直接從氫核磁共振波譜和碳核磁共振波譜

41、中可直接獲得碳?xì)涞膫€(gè)數(shù)，再結(jié)合質(zhì)譜給出的分子量的獲得碳?xì)涞膫€(gè)數(shù)，再結(jié)合質(zhì)譜給出的分子量的信息，就可以得到氧的個(gè)數(shù)，用這種方法也能信息，就可以得到氧的個(gè)數(shù)，用這種方法也能確定化合物的分子式。確定化合物的分子式。d.不飽和度不飽和度天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分56第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法 2.質(zhì)譜法質(zhì)譜法作用：作用：質(zhì)譜常用于確定分子質(zhì)譜常用于確定分子量，并可求算分子式和量，并可求算分子式和提供其它結(jié)構(gòu)信息。提供其它結(jié)構(gòu)信息。特點(diǎn)：特點(diǎn)： a.a.適宜適宜測(cè)定極性偏小和測(cè)定極性偏小和中等極性的化合物；中等極性的化合物； b.b.常規(guī)質(zhì)譜儀價(jià)格比較常規(guī)質(zhì)

42、譜儀價(jià)格比較便宜，一些特殊質(zhì)譜儀便宜，一些特殊質(zhì)譜儀很昂貴；很昂貴； c.c.樣品用量少（只需樣品用量少（只需5 510 10 g g）質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分57第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法 3.紅外光譜紅外光譜測(cè)定范圍：測(cè)定范圍： 利用分子中價(jià)鍵的伸縮及彎曲振動(dòng)在利用分子中價(jià)鍵的伸縮及彎曲振動(dòng)在4000625cm-1紅外區(qū)域引起的吸收，而測(cè)得紅外區(qū)域引起的吸收，而測(cè)得的吸收?qǐng)D譜。的吸收?qǐng)D譜。其中其中1600cm1600cm-1-1以上為化合物的以上為化合物的特征基團(tuán)區(qū)特征基團(tuán)區(qū)，1000-500cm1000-500cm-1-1為為指

43、紋區(qū)。指紋區(qū)。作用：作用：可用于鑒別羥基、氨基、雙鍵、芳環(huán)等可用于鑒別羥基、氨基、雙鍵、芳環(huán)等特征官能團(tuán)以及芳環(huán)取代類型。特征官能團(tuán)以及芳環(huán)取代類型。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)： 任何氣態(tài)、液態(tài)、固態(tài)樣品均可測(cè)定；任何氣態(tài)、液態(tài)、固態(tài)樣品均可測(cè)定； 每種化合物都有紅外吸收；每種化合物都有紅外吸收； 常規(guī)紅外光譜儀價(jià)格低廉；常規(guī)紅外光譜儀價(jià)格低廉； 樣品用量少（只需樣品用量少（只需5-10 5-10 g g）傅立葉變換紅外光譜儀傅立葉變換紅外光譜儀天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日13時(shí)09分58第四節(jié)第四節(jié) 結(jié)構(gòu)研究的方法結(jié)構(gòu)研究的方法 4.紫外紫外-可見吸收光譜可見吸收光譜n測(cè)定范圍：測(cè)定范圍：200700nm范范圍內(nèi)圍內(nèi)n作用：作用： 提供基本骨架信息提供基本骨架信息; ; 樣品中雜質(zhì)的測(cè)定樣品中雜質(zhì)的測(cè)定 定量分析定量分析n特點(diǎn)：特點(diǎn)： 液態(tài)樣品才能測(cè)定；液態(tài)樣品才能測(cè)定； 常規(guī)紫外光譜儀價(jià)格低廉；常規(guī)紫外光譜儀價(jià)格低廉； 樣品用量少（只需樣品用量少（只需5-10 5-10 g g）紫外光譜儀紫外光譜儀天然藥物化學(xué)天然藥物化學(xué)2022年3月15日1